МУ 4.2.2723-10 Лабораторная диагностика сальмонеллезов, обнаружение сальмонелл в пищевых продуктах и объектах окружающей среды

12. Использование серологических методов исследования для диагностики сальмонеллезов и выявления различных форм бактерионосительства

В дополнение к микробиологическому методу диагностики в качестве ориентировочных во время вспышек могут быть использованы клинический, эпидемиологический, серологический и молекулярно-генетический методы. Эпидемиологическим подтверждением постановки диагноза является наличие вспышки при условии, что указанный больной подвергался воздействию выявленного фактора риска, а клиническим - обнаружение клинической картины сальмонеллеза.

Использование РПГА для диагностики сальмонеллезов имеет вспомогательное значение, т.к. в крови практически здоровых людей могут присутствовать антитела к антигенам сальмонелл. Вследствие этого понятие "диагностического титра" антител носит весьма условный ориентировочный характер. Следует учитывать и то, что для разных районов страны величина "диагностического титра" будет различной, что связано с территориальными особенностями эпидемической ситуации. Существенно большее диагностическое значение имеет нарастание уровня антител в динамике заболевания, для чего сыворотку нужно брать сразу после выявления больного, а затем в конце первой или в начале второй недели болезни. В более поздние сроки заболевания титр антител снижается, что также может служить диагностическим критерием.

Парные сыворотки должны исследоваться одномоментно (для этого первая сыворотка до исследования должна храниться в замороженном виде).

Условно-диагностическим титром считается титр не ниже 1:320 для взрослых, 1:80 для детей до 6 мес и 1:110 для детей старше 6 мес.

Положительным нарастанием титра антител считается их 4-х кратное увеличение по отношению к одному и тому же антигену.

При серологической диагностике сальмонеллезов большое диагностическое значение имеют иммуноглобулины, образование которых обусловливает нарастание титра антител в крови лиц, инфицированных сальмонеллами в определенные периоды жизни. При этом наиболее специфичны в диагностическом плане IgG-антитела. Вместе с тем IgM-антитела появляются в крови раньше других. Они могут образовываться и у здоровых лиц в результате "бытовой" иммунизации или вследствие ранее перенесенной инфекции, т.е. IgM-антитела менее специфичны.

IgM-антитела инактивируются при обработке сыворотки крови цистеином, тогда как IgG-антитела резистентны к этому препарату. После обработки сыворотки крови цистеином в РПГА выявляются только IgG-антитела, тем самым повышается специфичность реакции.

Скорость образования антител и их титр зависят от возраста больного, стадии и тяжести течения болезни, состояния преморбидного фона и других факторов, отражаемых в анализе.

Порядок исследования крови человека:

Сыворотку крови взрослых людей исследуют дважды: сразу после поступления больного в стационар и на второй неделе болезни, а при возможности исследование проводят и в период реконвалесценции.

Сыворотку крови детей первых двух лет жизни исследуют в динамике сразу после поступления ребенка в стационар, затем каждые 7-10 дней. При невозможности проведения повторных исследований однократное серологическое обследование назначают в следующие сроки в зависимости от возраста ребенка:

до года при легкой и средне-тяжелой формах - на третьей неделе болезни, при тяжелой форме - на четвертый-шестой;

в возрасте одного-трех лет - на второй неделе независимо от тяжести болезни;

старше трех лет независимо от тяжести болезни - на шестой-седьмой день.

В таблице N 3 приведен уровень антител в крови детей.

Табл.3

     
Уровень антител в крови детей