Оценку показателя проводят по способности бифидобактерий закислять среду культивирования путём измерения активной кислотности (рН) среды культивирования I генерации (в пробирках с ростом бифидобактерий на 5 сутки выращивания). Величину рН измеряют потенциометрическим методом во всех пробирках с наличием признаков роста с помощью потенциометра со стеклянным электродом и хлорсеребряным электродом сравнения, градуированным по стандартным буферным растворам рН 4, 7 и 9.
Контролем служит пробирка с исходной питательной средой. Полученные значения суммируют и усредняют.
Интенсивность кислотообразования у бифидобактерий коррелирует с антагонистической активностью. Критериями служат пределы рН: менее 4,5 - антагонистически активные бифидобактерии; 4,6-5,1 - слабый антагонизм, более 5,1 - отсутствие антагонистической активности.