Статус документа
Статус документа

ГОСТ Р ИСО 21871-2010 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Метод обнаружения и подсчета наиболее вероятного числа Bacillus cereus

     5 Питательные среды и реагенты

5.1 Общие положения

В лабораторной практике применяют ИСО 7218, ИСО/ТУ 11133-1 и ИСО/ТУ 11133-2.

5.2 Разведение - по ИСО 6887 (все части), ИСО 8261 и любому конкретному стандарту, распространяющемуся на исследуемую продукцию.

5.3 Жидкая селективная обогащенная среда: триптон-соевый полимиксиновый бульон (TSPB) по [1].

5.3.1 Основа среды

5.3.1.1 Состав

Наименование компонента

а) Среда двойной концентрации

b) Среда единичной концентрации

Ферментативный продукт переваривания казеина, г

34,0

17,0

Ферментативный продукт переваривания сои, г

6,0

3,0

Хлорид натрия (NaCI), г

10,0

5,0

Глюкоза, г

5,0

2,5

Фосфорнокислый калий двузамещенный (KHPO), г

5,0

2,5

Вода, см

1000

1000

          

5.3.1.2 Приготовление

Ингредиенты или готовую базовую среду растворяют в колбе вместимостью 1 дм воды, нагревают на слабом огне до кипения и кипятят 2-3 мин при постоянном перемешивании. При необходимости корректируют рН так, чтобы после стерилизации он был равен 7,3±0,2 при температуре 25 °С.

Среды распределяют в объеме по 10 см [среда двойной концентрации (5.3.1.1 а)] и по 9 см [среда единичной концентрации (5.3.1.1 b)] в пробирки размером 16х160 мм (6.7).

Стерилизуют в автоклаве (6.1) при температуре 121 °С в течение 15 мин.

5.3.2 Раствор полимиксина В сульфата

5.3.2.1 Состав

Полимиксина В сульфат, ЕД (или г)

500000 (или 0,05)

Вода, см

50

5.3.2.2 Приготовление

Полимиксина В сульфат растворяют в воде. Стерилизуют путем фильтрации.

5.3.3 Полная среда

Непосредственно перед использованием добавляют 200 мкл (для среды двойной концентрации) или 100 мкл (для среды единичной концентрации) раствора полимиксина В сульфата (5.3.2) в каждую пробирку, содержащую базовую среду (5.3.1).

5.3.4 Проверка эксплуатационных характеристик с целью гарантии качества питательной среды

Определение селективности и продуктивности - по ИСО/ТУ 11133-1. Тестирование эффективности питательного триптон-соевого полимиксинового бульона (TSPB) проводится по ИСО/ТУ 11133-2 и в соответствии с таблицей 1.


Таблица 1 - Результаты проверки эксплуатационных характеристик триптон-соевого полимиксинового бульона (TSPB)

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Метод контроля

Критерии

Характерные реакции

Производи-

тельность

48 ч при 30 °С

В. cereus АТСС 11778 или тот же штамм, зарегистрированный в других коллекциях

Полуколи-
чественный

10 КОЕ на РЕМВА или MYP

Характерные колонии на РЕМВА или MYP (см. 5.4.5 или 5.5.6)

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Метод контроля

Критерии

Характерные реакции

Селектив-

ность

48 ч при 30 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739 или тот же штамм, зарегистрированный в других коллекциях

Полуколи-
чественный

Полное ингибирование

-