Методические указания по определению микроколичеств трефлана и нитрофора*

________________

* Методические указания разработали:

1) газохроматографическое определение микроколичеств трефлана в воде, почве и пробах растительного происхождения - И.Ш.Кофман, В.И.Кофанов;

2) газохроматографическое определение микроколичеств трефлана в эфирных маслах и маслосодержащем сырье - Ю.С.Баранов, М.А.Клисенко, Л.А.Хилик;

3) определение остаточных количеств трефлана в томатах методом газожидкостной хроматографии - В.В.Молочников;

4) определение остаточных количеств нитрофора в сое и семенах хлопка с помощью электронно-захватного детектора - Г.А.Бегунов, И.А.Кочеровская;

5) полярографическое определение микроколичеств трефлана и нитрофора в воде, почве, томатах, томатном соке, капусте - М.М.Филимонова, В.Е.Горбунова, Б.Ф.Филимонов;

6) колориметрическое определение трефлана - Н.Г.Попова, У.С.Кашимов, У.Ф.Пулатов в модификации Г.П.Пушкиной, Н.В.Букиной.

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченко 18.11.1977 N 1790-77

Настоящие методические указания распространяются на определение трефлана в воде, почве, горохе, сахарной свекле, эфирных маслах, эфирномасличном сырье, томатах, томатном соке, капусте, лекарственном сырье и нитрофора в воде, семенах хлопка, сое при санитарном контроле.

Краткая характеристика препаратов. Трефлан: 2,6-динитро-4-трифторметил-N-N'-ди-н-пропиланилин (нитран, трифлуралин) - кристаллическое вещество темно-оранжевого цвета. Эмпирическая формула его CHFNO, молекулярная масса 335,3. Т. пл. 48,5-49,0 °С, т. кип. 96-97 °С при 0,18 мм рт.ст.; давление паров 1,99·10 мм рт.ст. при 29,5 °С. Инфракрасный спектр имеет максимум поглощения при 1622, 1535, 1345, 1305, 1172, 1130 см в растворе хлороформа. Легко растворим в органических растворителях: гексане, ацетоне, бензоле, ксилоле и др. Плохо растворим в воде (менее 1 мг/л при 27 °С) и этиловом спирте. Применяется в виде концентрата эмульсии с содержанием действующего вещества 25%.

Нитрофор: 2,6-динитро-4-трифторметил-,-диэтиланилин - кристаллическое вещество желто-оранжевого цвета с т. пл. 96-97 °С. Эмпирическая формула CHFNO, молекулярная масса 307,1.

Хорошо растворим во многих органических растворителях, в т.ч. в ацетоне, ксилоле, бензоле, четыреххлористом углероде, диэтиловом эфире. Хуже растворим в гексане и этиловом спирте. Растворимость в воде 2 мг/л при 25 °С.

В качестве гербицида используется препарат нитрофор, содержащий 50% действующего вещества.

Методика определения трефлана и нитрофора газожидкостной хроматографией, а также полярографическим и спектрофотометрическим методами

Основные положения

Методики предназначены для определения трефлана и нитрофора в воде, почве, горохе, сахарной свекле, эфирных маслах, эфирномасличном сырье, томатах, лекарственном сырье, семенах хлопка, сое с помощью газожидкостной хроматографии, полярографии и спектрофотометрии. Принципы методов. Газожидкостная хроматография. Метод основан на экстракции препаратов гексаном, очистке экстрактов на колонке с окисью алюминия, силикагеля или катионитом КУ-1 и газохроматографическом определении с ДЭЗ на неподвижных фазах SE-30 или полиэтиленгликоль-20М (ПЭГ-20М) и салициловая кислота. Нижний предел определения трефлана в воде, почве, томатах, томатном соке, эфирномасличном сырье 0,01 мг/кг, в эфирных маслах 0,1 мг/кг, в горохе, сахарной свекле 0,02 мг/кг. Нижний предел определения нитрофора в сое 0,002 мг/кг. Степень определения 70-80%. Метод избирателен в присутствии хлорорганических пестицидов.

Полярография. Метод основан на полярографировании подготовленных экстрактов на фоне 0,05 н. гидроокиси тетраэтиламмония в 60%-ном метаноле. Потенциал полуволны 0,2 В. Нижний предел определения трефлана и нитрофора в воде 0,01 мг/л, в томатах 0,1 мг/кг, в томатном соке 0,05 мг/л, в почве с большим содержанием гумуса 0,1 мг/кг, в капусте 0,2 мг/кг. Степень определения составляет: в воде, томатах, томатном соке - 80-90%; капусте, почве с большим содержанием гумуса - 40-60%.

Спектрофотометрия. Метод основан на измерении оптической плотности подготовленного экстракта из лекарственного сырья при 270 нм. Нижний предел определения 0,1 мг/кг. Степень определения 85-90%.

Реактивы и растворы

Стандартные растворы трефлана и нитрофора в гексане [1-4] (0,1-1,0 мкг/мл) и в метаноле [5, 6] (100 мкг/мл). Гексан х.ч., перегнанный [1-4]. Метанол х.ч., перегнанный [5, 6]. Сульфат натрия безводный, х.ч. Окись алюминия нейтральная, II степени активности.

Приготовление сорбента: определив потерю массы окиси алюминия при сушке в течение 5 ч при 130 °С, вычислить количество воды, необходимое для доведения влажности AlO до 1,5%. Смочить этим количеством стенки большой колбы и, добавив необходимое количество AlO, тщательно перемешать. Готовый сорбент хранить герметически закрытым.

Гексадекан, очищенный серной кислотой [1]. Водный раствор серной кислоты, 50%-ный [1]. Серная кислота концентрированная [1, 2, 5]. Стандартный раствор линдана в гексане (0,01-0,1 мкг/мл) [1]. Азот особой чистоты [1-4]. Диэтиловый эфир перегнанный [2]. Ацетонитрил ч. [4], перегнанный и пропущенный через колонку 400х40 мм, содержащую AlO (1,5% влажности) из расчета 500 мл ацетонитрила на 50 г AlO. Натрий хлористый х.ч. [4]. Водный раствор натрия хлористого, 7%-ный [5], 5%-ный [4]. Силикагель (ЧССР), АСК, КСК (100 меш) [5].

Гидроокись тетраэтиламмония, водный раствор, 10%-ный [5]. Фон - раствор гидроокиси тетраэтиламмония 0,05 н. в водном 60%-ном метаноле. Приготовление: к 600 мл метанола прибавляют 64 мл 10%-ного раствора гидроокиси тетраэтиламмония и доводят дистиллированной водой до 1 л [5]. Раствор пирогаллола "А" 10%-ный в 37%-ном водном растворе KOH [5]. Водный раствор KOH, 37%-ный [5]. Азот газообразный, очищенный от кислорода продуванием через раствор пирогаллола "А" [5]. Ртуть металлическая Р-1 [5]. Раствор серной кислоты в метаноле, 1 н. Приготовление: к 250 мл метанола прибавляют 26,4 г концентрированной серной кислоты и доводят до 500 мл метанолом [5]. Катионит кислый КУ-1 [5]. Водный раствор натра едкого, 10%-ный [5]. Активированный уголь, БАУ [3]. Бензол х.ч. [3]. 5% SE-30 на хроматоне-N-AW DMCS (0,16-0,20 мм) [1-4]. 5% полифенилметилсиликонового масла ПФМС-4 на хромосорбе W (80-100 меш) [1-4]. 5% ПЭГ-20М +0,2% салициловой кислоты на хроматоне-N-AW DMCS (0,16-0,20 мм) [4].

Приборы и посуда

Газовый хроматограф с детектором по захвату электронов ("Цвет-5", "Цвет-106", "Цвет-126", ЛХМ-8МДП, другие модели) [1-4]. Полярограф электронный ПЭ-312 (интегральная, схема) [5]. Фотоэлектроколориметр ФЭК-56М или спектрофотометры СФ-4а, СФ-16 [4]. Гомогенизатор или кофемолка-электромиксер. Ротационный испаритель ИР-1 или ИР-1М. Колонки хроматографические 300х20 мм [1, 2, 6], 250х10 мм [3], 400х20 мм [4], 400х10 мм [3, 4, 5]. Колонка ионообменная 250х10 мм [5]. Микрошприц МШ-ЭД [1-4]. Встряхиватель универсальный АВУ-1. Колбы конические. Воронки делительные. Воронки Бюхнера. Колбы Бунзена. Водоструйный насос. Колбы грушевидные на шлифах емкостью 14,5; 19, 29. Елочные дефлегматоры на шлифах емкостью 14,5; 19 [4]. V-образный переходник с керном на шлифах 14,5 [4]. Электролизер на 20 мл [5]. Ртутный капельный электрод с характеристикой 2,6165 мг/с, Т-2,1 с [5]. Каломельный электрод [5]. Склянка Дрекселя [5]. Лабораторная центрифуга с набором центрифужных стаканов [5]. Трубка полиэтиленовая 10x5 мм [5]. Зажим винтовой [5]. Банка полиэтиленовая на 1 л - 2 шт. [5]. Баня водяная с терморегулятором.

Подготовка к определению. Хроматографическую колонку заполняют окисью алюминия или силикагеля, уплотняя их путем легкого постукивания. Перед употреблением колонку промывают гексаном. Для подготовки ионообменной колонки 2 г катионита КУ-1 помещают в химический стакан и добавляют 10 мл метанола. После набухания смолу переносят в колонку (250х10 мм) и промывают 20 мл метанола. Пропускают через колонку 20 мл 1 н. серной кислоты в метаноле со скоростью 5 мл/мин и промывают метанолом до рН 7.

Ход анализа. Экстракция трефлана и очистка экстракта из воды. Порцию воды 500 мл, отфильтрованной через беззольный фильтр ("синяя лента"), экстрагируют в делительной воронке гексаном трижды по 30 мл. Объединенный, осушенный сульфатом натрия гексановый экстракт упаривают с помощью ротационного испарителя или в струе воздуха на водяной бане при температуре не выше 30 °С. При присутствии в пробе больших количеств хлорорганических инсектицидов к гексановому раствору добавляют 10 мл концентрированной серной кислоты и осторожно встряхивают. Сернокислотный слой переносят в делительную воронку, содержащую 500 мл дистиллированной воды. Оставшийся гексановый раствор промывают без встряхивания 15 мл 50%-ного раствора серной кислоты, присоединяя его к сернокислотному раствору. Гексановый слой может быть использован для определения остаточных количеств хлорорганических инсектицидов. Трефлан из кислотного слоя экстрагируют гексаном трижды по 30 мл. Осушенный безводным сульфатом натрия гексановый раствор упаривают на ротационном испарителе досуха.

Экстракция трефлана и очистка экстракта из почвы [5]. Пробу (100 г) почвы, просеянной через сито с отверстиями 0,5 мм, экстрагируют 200 мл метанола в аппарате для встряхивания в течение 1 ч. Пробу отфильтровывают на воронке Бюхнера в вакууме водоструйного насоса через фильтр "красная лента". Остаток на фильтре промывают 20 мл метанола, а затем повторно экстрагируют дважды по 50 мл метанола. Объединенный метанольный экстракт помещают в полиэтиленовую банку, приливают 100 мл дистиллированной воды и 100 мл гексана и встряхивают 30 мин в аппарате для встряхивания.

Гексановый слой отделяют в делительной воронке, а водно-метанольный экстрагируют повторно свежей порцией гексана (100 мл) в течение 30 мин. Объединенный гексановый экстракт упаривают до 5 мл с помощью ротационного испарителя или в струе воздуха на водяной бане при температуре не выше 30 °С. Для удаления из экстрактов присутствующих в них хлорорганических инсектицидов используют перераспределение в системе гексан - концентрированная серная кислота, как описано выше для проб воды.