Статус документа

ГОСТ Р 53913-2010 (ИСО 16654:2001) Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения Escherichia coli О157

5 Питательные среды, реактивы и антисыворотки

Общие правила микробиологических исследований - по ГОСТ Р ИСО 7218.

5.1 Обогатительная среда (модифицированный триптон-соевый бульон с новобиоцином (mTSB + N)

Состав:


Ферментативный перевар казеина	17,0 г.
Ферментативный перевар сои	3,0 г.
D(+)-глюкоза	2,5 г.
Желчные соли No. 3	1,5 г.
Хлорид натрия	5,0 г.
Моногидрофосфат калия (KНРO)	4,0 г.
Дистиллированная вода	1000 см

5.1.1 Приготовление среды

Растворяют компоненты или готовую дегидратированную питательную среду в воде, при необходимости подогревают. Устанавливают уровень рН, используя рН-метр (см. 6.6), если необходимо, так, чтобы после стерилизации он соответствовал рН (7,4±0,2) при температуре 25 °С.

Разливают среду в соответствующих количествах в колбы или склянки (6.7).

Стерилизуют в течение 15 мин в автоклаве (см. 6.1) при температуре 121 °С.

5.1.1.1 Раствор новобиоцина

Состав:


Новобиоцин	0,45 г.
Дистиллированная вода	100 см

Приготовление раствора:

Растворяют новобиоцин в воде и стерилизуют фильтрованием через микропористую мембрану.

Готовят раствор перед определением.

5.1.1.2 Приготовление готовой среды

Непосредственно перед применением в среду (см. 5.1.1) добавляют 1 см или 4 см раствора новобиоцина (см. 5.1.1.1 или к 225 см, или к 900 см охлажденной среды mTSB (см. 5.1.1).

Конечная концентрация новобиоцина равна 20 мг/дм среды mTSB.

5.2 Первая селективная среда для выделения микроорганизмов: агаровая среда Мак-Конки с сорбитом и суплементом СТ (цефиксим и теллурит калия) (CT-SMAC)

5.2.1 Основная среда

Состав:


Ферментативный перевар казеина	17,0 г.
Ферментативный перевар животных тканей	3,0 г.
Сорбит	10,0 г.
Желчные соли No. 3	1,5 г.
Хлорид натрия	5,0 г.
Нейтральный красный	0,03 г.
Кристаллический фиолетовый	0,001 г.
Агар	9-18 г.*
Дистиллированная вода	1000 см.

_______________

* В зависимости от прочности геля.