МУК 4.2.590-96 Бактериологические исследования с использованием микробиологического экспресс-анализатора "Бак Трак 4100"
3.6. Определение листерий
1. Среда Рrе-Media 403А и BiMedia 403A (готовится в соответствии с инструкцией - см. гл.10).
2. Предварительное обогащение.
Для предварительного обогащения используется среда Рrе-Media 403A.
Смешать необходимое количество продукта, в котором регламентируется отсутствие листерий со средой Pre-Media 403А в соотношении 1:10, затем гомогенизировать образец.
Инкубировать образец со средой Рrе-Media 403А в течение 24 ч.
3. Протокол измерения.
3.1. Дать среде BiMedia 403A уравновеситься при комнатной температуре в течение 12 ч.
3.2. Установить температуру 37 °С на приборе "Вас Trac".
3.3. В основном меню программы "Вас Trac" установить следующие параметры:
Параметры для инкубаторного блока (Adjust parameters):
Время исследования (Duration) | 36 ч | |||
Масштаб измерений (Scale): | ||||
М-параметр | 0-20% | |||
Е-параметр | 0-80% | |||
Время задержки (Delay) | 1 ч | |||
Пороговые значения (Thresholds): | ||||
М-параметр | 5% | |||
Е-параметр | 15% | |||
Проводить учет результатов по Е-параметру. | ||||
Пороговое значение по времени (Time limit) | 30 ч | |||
4. Добавить в каждую измерительную ячейку по 10 мл среды BiMedia 403A.
5. Добавить в ячейку 0,1 мл предобогащенного образца; тщательно перемешать содержимое, вращая ячейку между ладонями (не переворачивать ячейку!).
6. Для контроля среды используйте одну измерительную ячейку с 10 мл среды BiMedia 403A (без инокулята).
7. Выбрать в основном меню программы ЗАПУСК ИЗМЕРЕНИЙ (Start Measurement) и начать измерения.
8. После того, как каждая позиция в блоке будет отмаркирована как свободная на экране монитора, поместить измерительные ячейки в прибор "Вас Trac".
Измерение начнется автоматически через 1 ч после загрузки ячеек в прибор.
Рост микроорганизмов и время определения изменения импеданса (IDT) будут записаны автоматически.
УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
Образец загрязнен листериями, если изменение импеданса превышает 15%-ное пороговое значение по Е-параметру в течение 30 ч.
9. Подтверждение Listeria-позитивных образцов.
В случае положительного ответа на листерии проводится подтверждение с высевом на селективные питательные среды в соответствии с нормативными документами. Высев производится непосредственно из измерительной ячейки.