МУК 4.2.590-96 Бактериологические исследования с использованием микробиологического экспресс-анализатора "Бак Трак 4100"
3.2. Определение бактерий группы кишечных папочек - БГКП (колиформ)
1. Среда BiMedia 160B (готовится в соответствии с инструкцией - см. гл.10).
2. Протокол измерения.
2.1. Установить температуру 37 °С на приборе "Вас Trac".
2.2. В основном меню программы "Вас Тrас" установить следующие параметры:
Параметры для инкубаторного блока (Adjust parameters):
Время исследования (Duration) | 24 ч | |||
Масштаб измерений (Scale) - | ||||
М-параметр | 0-50% | |||
Е-параметр | 0-50% | |||
Время задержки (Delay) | 1 ч | |||
Пороговые значения (Thresholds): | ||||
М-параметр | 5% | |||
Е-параметр | 10% | |||
Проводить учет результатов по М-параметру. | ||||
Пороговое значение по времени (Time limit 1) | 12 ч | |||
Пороговое значение по времени (Time limit 2) | 18 ч | |||
3. Добавить в каждую измерительную ячейку по 9 мл среды BiMedia 160B.
4. Добавить исследуемый образец из соответствующего разведения продукта, в котором не допускается наличие БГКП
4.1. Если наличие БГКП не допускается в 0,01 г продукта, то для исследования берется 1 мл из разведения 1:100.
4.2. Если наличие БГКП не допускается в 0,1 г продукта, то для исследования берется 1 мл из разведения 1:10.
4.3. Если наличие БГКП не допускается в 1 г продукта, то для исследования берется 5 мл из разведения 1:5 и добавляется к 5 мл среды 160В двойной концентрации.
Возможен также альтернативный вариант при использовании измерительных ячеек на 100 мл.
4.4. Если наличие БГКП не допускается в 1 г продукта, то для исследования берется 10 мл из разведения 1:10 и добавляется к 90 мл среды BiMedia 160B.
4.5. Если наличие БГКП не допускается в 10 г продукта, то для исследования берется 10 мл из разведения 1:1 и добавляется по 5 мл гомогената в две измерительные ячейки к 5 мл среды 160В двойной концентрации.
Возможен также альтернативный вариант при использовании измерительных ячеек на 100 мл.
4.6. Если наличие БГКП не допускается в 10 г продукта, то для исследования берется 10 мл из разведения 1:5 и добавляется к 50 мл среды BiMedia 160B двойной концентрации.
5. Тщательно перемешать содержимое, вращая ячейку между ладонями (не переворачивать ячейку!).
6. Для контроля среды используйте одну измерительную ячейку с 10 мл среды BiMedia 160В (без инокулята).
7. Выбрать в основном меню программы ЗАПУСК ИЗМЕРЕНИЙ (Start Measurement) и начать измерения.
8. После того, как каждая позиция в блоке будет отмаркирована как свободная на экране монитора, поместить измерительные ячейки в прибор "Вас Trac".
Измерение начнется автоматически через 1 ч после загрузки ячеек в прибор. Рост микроорганизмов и время определения изменения импеданса (IDT) будут записаны автоматически.
УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ:
Исследуемое количество продукта содержит единичные клетки БГКП и проба считается контаминированной колиформами, если изменение импеданса превышает 5%-ное пороговое значение по М-параметру и 10%-ное пороговое значение по Е-параметру в течение 12 ч.
При положительном результате наблюдается изменение цвета питательной среды (исходный пурпурный цвет среды меняется на желтый).
Дополнение. Если клетки БГКП находились в стрессовом состоянии (термическая обработка, замораживание, высушивание и т.п.), то может наблюдаться более медленный рост культуры с увеличением времени определения по М-параметру до 18 ч.
В этом случае проба считается контаминированной, если изменение импеданса превышает 5%-ное пороговое значение по М-параметру и 10%-ное пороговое значение по Е-параметру в течение 18 ч.