При определении чувствительности возбудителя чумы к антибактериальным препаратам с помощью ДДМ используют суспензию микробных клеток из суточной агаровой культуры в 0,85% изотоническом растворе хлорида натрия, стандартизированную по отраслевому стандарту мутности ГИСК им. Л.А.Тарасевича на 5 ед. - 5х10
м.к. (~1,5х10 КОЕ/мл). Суспензию наносят на поверхность агара в объеме 0,2 мл (
x10
КОЕ), равномерно распределяют стерильным шпателем. Через 10-15 мин накладывают диски (не более шести на чашку диаметром 100 мм). Посевы инкубируют при 28 °С. Предварительный учет проводят через 24 ч, окончательный - через 48 ч. Результаты учитывают при появлении сливного роста на контрольных чашках (без дисков). Диаметры зон задержки роста культуры вокруг дисков, включая диаметр самого диска, измеряют с точностью до 1 мм штангенциркулем, кронциркулем или специальной линейкой-лекалом.
Для МСР используют суспензию той же концентрации 5х10 м.к. (~1,5х10 КОЕ/мл), нанося небольшими каплями с помощью штампа-репликатора или касанием пипетки с тонким концом на чашки с питательной средой, содержащей различные концентрации антибактериальных препаратов, начиная с чашек, содержащих минимальное количество антибиотиков. Посевная доза - х10
-10
КОЕ. Посевы инкубируют при температуре 28 °С. Учет через 36-48 ч. Чувствительность/устойчивость культур определяют по минимальной концентрации препарата, подавляющей рост возбудителя (МПК, мг/л) на среде культивирования при наличии роста в контроле (агар без антибиотика).
