МУ 3.5.2431-08 Изучение и оценка вирулицидной активности дезинфицирующих средств

4.5. Применение нейтрализатора ДС и субстанции

Для нейтрализации ДС (субстанции) используют вещество - нейтрализатор (или комплекс из нескольких веществ), останавливающее действие ДС. Нейтрализатор либо добавляют непосредственно в питательную среду, либо промывают им тест-объекты после воздействия ДС (субстанции, исследуемого вещества) для того, чтобы остановить его действие на тест-вирус через заданное время (экспозицию).

4.5.1. Для нейтрализации ДС в виде монопрепарата на основе окислителей (хлор-, йод-, кислородсодержащие средства) применяют 0,1-1,0% растворы тиосульфата натрия:

для катионных поверхностно-активных веществ - 0,1-1,0% растворы лаурилсульфата натрия (сульфонол) или растворы сульфонола с 10% обезжиренного молока;

для альдегидов - 1,0% раствор бисульфита натрия;

для кислот - щелочи в эквивалентном количестве;

для щелочей - кислоты в эквивалентном количестве;

для спиртов - воду;

для композиционных средств - "комплексный" нейтрализатор, например, содержащий Твин 80 (3%), сапонин (0,3-3,0%), гистидин (0,1%), цистеин (0,1%). Если в состав ДС входят окислители, в нейтрализатор дополнительно вводят тиосульфат натрия. Следует иметь в виду, что "комплексный" нейтрализатор обладает выраженным цитотоксическим действием на клеточные культуры.

4.5.2. Если не удается подобрать какой-либо из перечисленных нейтрализаторов, что проявляется в неспецифической дегенерации культуры клеток (или гибели мышей, уток), то используют 60-80% сыворотки (без консерванта) крупного рогатого скота (СКРС), инактивированную при 56 °С в течение 30 мин. СКРС нейтрализует большой перечень ДВ и наиболее близка к "универсальному" нейтрализатору.

4.5.3. При невозможности нейтрализовать токсическое действие ДС следует применять дополнительные методы удаления ДС - диализ смеси вирус-дезинфектант, например, с использованием сефадекса LH-20, G-75, осаждения вируса методом высокоскоростного центрифугирования, фильтрацией через мембранные фильтры.