МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО УНИФИЦИРОВАННОМУ МЕТОДУ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНТНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ БАКУЛОВИРУСОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ*

_______________

* Разработаны В.Л.Васильевой, В.И.Трусовым, А.Л.Гуралем (КНИИЭИБ).

УТВЕРЖДЕНО 27.04.84 N 3024-84

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания в воздухе рабочей зоны полиэдров и гранул бакуловирусов, являющихся действующим началом вирусных инсектицидных препаратов, что необходимо при разработке санитарно-гигиенических регламентов, санитарно-гигиеническом контроле, а также в научных исследованиях.

Краткая характеристика бакуловирусных инсектицидов. Известные в настоящее время отечественные вирусные препараты, разрабатываемые или применяемые в качестве инсектицидов против гусениц вредных насекомых, содержат в качестве действующего начала вирусы насекомых семейства бакуловирусов. Вирусы в препаратах представлены в виде телец-включений типа полиэдров или гранул, размеры от 0,3-1,5 мк (полиэдры) и до 0,25-0,8 мк (гранулы), в которых содержатся различные количества вирионов. Бакуловирусы обладают выраженной специфичностью в отношении насекомого-вредителя.

Вирусные тельца-включения получают из тканей и больных или погибших от вирусной инфекции гусениц соответствующего вида насекомых.

Вирусные препараты представляют собой концентрат-суспензию полиэдров или гранул в 50%-ном глицерине (жидкие формы) или порошок светло-серого цвета, состоящий из соответствующих компонентов действующего начала и наполнителя (каолин, силикон, тальк и т.д.). Препараты содержат полиэдры в концентрации в среднем 1·10 пдр/мл, или 1·10 грн/мл. Применяются путем опрыскивания (авиа-, тракторного, ранцевого) при норме расхода 100-200 мл препарата на 1 га с добавлением поверхностно-активного вещества ОП-7 из расчета 0,6-4,0 г на 10 л воды.

По данным КНИИЭИБ, изученные отечественные вирусные энтомопатогенные препараты вирин-ЭНШ, вирин-ЭКС, вирин-АББ, вирин-КШ, вирин-диприон не токсичны и не патогенны для человека и теплокровных животных. Изученные энтомопатогенные вирусы не репродуцируются в теплокровном организме, не вызывают явной или скрытой инфекции, безопасны в эпидемиологическом отношении. В условиях производства оказывают сенсибилизирующее действие на организм, что может приводить к развитию иммунопатологических состояний у работающих.

Принцип метода. Метод основан на специфическом взаимодействии антигенов (бакуловирусов) с антителами против полиэдров конкретного вируса. Образовывающийся комплекс, соединенный с флюоресцирующим красителем, выявляется в виде локализованного специфического свечения в лучах сине- и УФ-света на люминесцентных микроскопах.

Методика определения бакуловирусов в воздухе основана на использовании иммунофлюоресценции, широко применяемой в медицинской вирусологии для индикации различных вирусов (метод Кунса, 1941). Применяют непрямой вариант метода.

Метрологическая характеристика метода. Данным методом можно определить концентрацию телец-включений в 1 м воздуха от 0,5·10 и более.