МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЛЕПИДОЦИДА НА ОБРАБОТАННЫХ ИМ РАСТЕНИЯХ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНТНЫМ МЕТОДОМ*

________________
     * Разработаны Е.А.Мельниковой и Е.А.Пляченко (ВНИИГИНТОКС).

УТВЕРЖДЕНО 22.05.85 N 3891-85

Краткая характеристика препарата. Лепидоцид - бактериальный инсектицидный препарат для борьбы с листогрызущими насекомыми. Действующим началом препарата служат споры и продукты жизнедеятельности бактерий - Bacillus thuringiensis Var. kurstaki. Он практически не токсичен для теплокровных животных: при введении в желудок ЛД для белых мышей превышает 15 г/кг, для белых крыс - 9,7±1,9 г/кг. Споры в организме теплокровных не прорастают и не вызывают инфекционного заболевания. Препарат представляет собой аморфный порошок кремового цвета со слабым специфическим запахом. В воде образует нестойкую суспензию.

Принцип метода. В основу определения остаточных количеств лепидоцида на растениях положена реакция взаимодействия антигена из спор микроорганизма с меченными флюоресцеином антителами и выявление спор в люминесцентном микроскопе по специфическому свечению. Использован непрямой иммунофлюоресцентный метод.

Метрологическая характеристика метода. Предел обнаружения: одна спора в 50 полях зрения, что соответствует (при титре лепидоцида 10 спор/г) 0,01 мкг препарата на 1 г пробы, или 10 спор на 1 г пробы. Ошибка метода 15%.

Избирательность метода. Метод специфичен при условии использования иммунных сывороток против спор микроорганизма, активных в разведениях 1:160-1:640 и выше.

Реактивы и материалы. Этанол х.ч. Хлорид натрия, 0,85%-ный раствор. Нефлюоресцирующее иммерсионное масло. Сухая люминесцентная ослиная сыворотка против глобулинов кролика производства Института эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва. Специфическая иммунная сыворотка кролика против спор.

Приборы, аппаратура, посуда. Люминесцентный микроскоп марки МБИ-15 или другой аналогичный. Объект-микрометр. Центрифуга с частотой вращения 12 мин. Термостат на 37 °С. Аппарат для встряхивания. Колбы. Пробирки бактериологические. Чашки Петри. Предметные стекла. Микропипетки.