Статус документа
Статус документа

ГОСТ Р ИСО 11133-2-2008 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие указания по приготовлению и производству культуральных сред. Часть 2. Практические руководящие указания по эксплуатационным испытаниям культуральных сред

     

Приложение В
(рекомендуемое)

     
Рекомендуемые тест-микроорганизмы для широко используемых культуральных сред (приводится информация о культуральных средах, условиях содержания сред, тест-микроорганизмах, номере коллекции культур тест-микроорганизмов и ожидаемых реакциях)


Таблицы В.1-В.6 составлены, принимая во внимание контрольные штаммы, используемые в Европейской фармакопее, и рекомендации фармакопеи, касающиеся микробиологии пищевых продуктов в отношении культуральных сред (Рабочая группа Международного комитета по микробиологии пищевых продуктов и гигиене). Данные критерии предстоит включить в соответствующие стандарты при их подготовке или пересмотре в будущем (новый стандарт или пересмотр). Утвержденная партия среды - это партия среды, которая показала удовлетворительные эксплуатационные характеристики. Допускается использование тех же штаммов из других эталонных коллекций (например, NCTC, CIP и др.). Все приводимые среды описаны в стандартах ЕН и ИСО.



Таблица В.1 - Селективные среды для подсчета микроорганизмов

Среда

Тип

Микроорганизмы

Обозначение стандарта

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Эталонные среды

Метод контроля

Критерии

Характерная реакция

Бэрда-

Паркера

S

Коагулязопо-

ложительные стафилококки

ЕН ИСО 6888-1

Производи-

тельность

24-48 ч/37 °С

S. aureus АТСС 6538

S. aureus АТСС 25923

Триптика-

зосоевый агар (TSA)

Количест-

венный

PR0,5

Черные/серые колонии с четким ореолом (реакция просветления яичного желтка)








Селектив-

ность

48 ч/37 °С

Е. coli

АТСС 25922 или 8739

-

Качественный

Полное ингиби-

рование

-








Специфич-

ность

24-48 ч/37 °С

S. epidermidis ATCC 12228

-

Качественный

-

Черные/серые колонии без реакции просветления яичного желтка

RPFA

S

Коагулязопо-

ложительные стафилококки

ЕН ИСО 6888-2

Производи-

тельность

24-48 ч/37 °С

S. aureus АТСС 6538 или 6538 Р

S. aureus АТСС 25923

TSA

Количест-
венный

PR0,5

Черные/серые колонии с темным ореолом








Селектив-

ность

48 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Качественный

Полное ингиби-
рование

-








Специфич-

ность

24-48 ч/37 °С

S. epidermidis ATCC 12228

-

Качественный

-

Черные/серые колонии без темного ореола

Хлор-ам-

феникол или

OGA (OGY)

S

Дрожжи/плес-

невые грибы

ИСО 7954

Производи-

тельность

3-5 дней/25 °С

С. albicans АТСС 10231

A. niger ATCC 16404

P. cyclopium АТСС 16025

S. cerevisiae АТСС 9763

SDA, OGA или хло-     рамфени-
кол агар

Количест-
венный

PR0,5

Характерные колонии в соответствии с каждым видом







Селектив-

ность

3-5 дней/25 °С

E.coli ATCC 25922 или 8739

B. subtilis ATCC 6633

-

Качественный

Полное ингиби-

рование

-

MRS

S

Молочнокис-

лые бактерии

ИСО 15214

Производи-

тельность

72 ч/30 °С

L. sake АТСС 15521

Ped. damnosus АТСС 29358 Lc. lactis АТСС 19435

Партия среды MRS, уже утверж-

денная

Количест-

венный

PR0,5

Характерные колонии в соответствии с каждым видом








Селектив-

ность

72 ч/30 °С

Е. col АТСС 25922 или 8739

-

Качественный

Полное ингиби-

рование

-












В. cereus АТСС 11778





MYP

S

Bacillus cereus

EН ИCO 7932

Производи-

тельность

24-48 ч/30 °С

В. cereus АТСС 11778

TSA

Количест-

венный

PR0,7

Розовые колонии с ореолом осадка

Селектив-

ность

48 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Качественный

Полное ингиби-

рование

-

Специфич-

ность

48 ч/37 °С

В. subtilis АТСС 6633

-

-

-

Желтые колонии без ореола осадка

Oxford

S

Listeria mono-

cytogenes

EН ИCO 11290

Производи-

тельность

48 ч/37 °С

L. mono 1/2a АТСС 19111

TSA

Количест-
венный

PR0,5

Черно-серые колонии с черным ореолом

L. mono 4b АТСС 13932








Селектив-

ность

48 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Качественный

Полное ингиби-
рование

-












Е. faecalis АТСС 29212 или 19433
















С. albicans АТСС 10231





PALCAM

S

Listeria monocytoge-

nes

EН ИCO 11290

Производи-

тельность

48 ч/37 °С

L. mono 1/2a АТСС 19111

TSA

Количест-
венный

PR0,5

Серо-зеленые и черные колонии с черным ореолом








Селектив-

ность

72 ч/30 °С

L. mono 4b АТСС 13932

-

Качественный

Полное ингиби-
рование

-












Е. coli АТСС 25922 или 8739
















Е. faecalis АТСС 29212 или 19433





TS(C)

S

Clostridium perfringens

ЕН ИСО 7937

Производи-

тельность

20 ч/37 °С (анаэробная атм.)

Cl. perfringens АТСС 13124

Партия среды TS(C), уже утверж-
денная

Количест-
венный

PR0,7

Черные колонии








Cl. perfringens АТСС 12916












Селектив-

ность TSC

20 ч/37 °С (анаэробная атм.)

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Количест-
венный

-

Полное ингибирование








Специфич-

ность TS



-

Количест-
венный

-

Белые колонии

VRBG

S

Enterobacteria-ceae

ИСО 7402, ИСО 8523

Производи-

тельность

24 ч/ 37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

TSA

Количест-
венный

PR0,5

Розово-красные колонии с ореолом или без ореола осадка












S. typhimurium АТСС 14028












Селектив-

ность

24 ч/37 °С

Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

Качественный

Полное ингиби-

рование

-

VRBL

S

Coliforms

ИСО 4832

Производи-

тельность

24 ч/30 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

TSA

Количест-

венный

PR0,5

Пурпурные колонии с ореолом или без ореола осадка








Селектив-

ность

24 ч/30 °С

Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

Качественный

Полное ингиби-

рование

-








Специфич-

ность

24 ч/30 °С

Ps. aeruginosa АТСС 27853

-

Качественный

-

Бесцветные или бежевые колонии

CT-SMAC

S

Escherichia coli О157

ИСО 16654

Производи-

тельность

24 ч/37 °С

E.coli O 157:H7 АТСС 43894 или 43895 (не токсикогенные)

TSA

Количест-

венный

PR0,5

Прозрачные колонии с бледной желтовато-коричневой окраской и диаметром около 1 мм








Селектив-

ность

24 ч/37 °С

S. aureus АТС 6538 или 25923

-

Качественный

Полное ингиби-

рование

-








Специфич-

ность

24 ч/37 °С

Е. coli АТСС 11775 или 25922

-

Качественный

-

Розовые колонии

BGBLB

L

Coliforms

ИСО 4831

Производи-

тельность

24-48 ч/30 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

С. freundii АТСС 43864

-

Полуколи-

чественный

Мутность 2 + газ в 1/3 пробирки Дюрхэма

Образование газа и мутность








Селектив-

ность

24-48 ч/30 °С

Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

Качественный

Отсутствие роста

-

LST

L

Coliforms

ИСО 4831

Производи-

тельность

24-48 ч/30 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

С. freundii АТСС 43864

-

Полуколи-

чественный

Мутность 2 + газ в 1/3 пробирки Дюрхэма

Образование газа и мутность








Селектив-

ность

Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

Качественный

Отсутствие роста

-

EC

L

Escherichia coli

ИСО 7251

Производи-

тельность

24-48 ч/44 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Полуколи-

чественный

Мутность 2 + газ в 1/3 пробирки Дюрхэма

Образование газа и мутность








Селектив-

ность

24-48 ч/44 °С

Ps. aeruginosa АТСС 27853

-

Качественный

Отсутствие роста

-

S= твердая среда.

Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).

L= жидкая среда.

Примечание - Для твердых культуральных сред возможно также использование полуколичественного метода культивирования.



Таблица В.2 - Неселективные среды для подсчета микроорганизмов

Среды

Тип

Микро-
орга-
низмы

Стан-
дарт

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Эта-
лонные среды

Метод контроля

Критерии

Характерис-
стические реакции

РСА

S

Общая флора

ИСО 4833

Произво-
дитель-
ность

72 ч/30 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

TSA

Коли-
чест-
венный

PR0,7

-







S. aureus АТСС 6538 или 6538 Р











В. Subtilis АТСС 6633





S = твердая среда.

Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).



Таблица В.3 - Обогатительные селективные среды

Среда

Тип

Микро-
организмы

Обозначение стандарта

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Эталон-
ные среды

Метод контроля

Критерии

Характерная реакция целевых микроорганизмов

ЕЕ

L

Enterobacteria сеае

ИСО 7402 ИСО 8523

Производи-

тельность

24 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739 или S. typhimurium АТСС 14028

-

Полуколи-

чественный

Более 10 колоний на VRGB

Розово-красные колонии с или без ореола осадка







Селектив-

ность

24 ч/37 °С

+ Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

Полуколи-

чественный

Полное ингиби-

рование



Half-Fraser

L

Listeria mono-

cytogenes

EN ИСО 11290-1

Производи-

тельность

24 ч/30 °С

L. mono 1/2a АТСС 19111

-

Полуколи-

чественный

>10 колоний на Oxford или PALCAM

Серо-черные колонии с черным ореолом







или L. mono 4b АТСС 13932











+ Е. coli АТСС 25922 или 8739











+ Е. faecalis АТСС 29212 или 19433











Селектив-

ность

24 ч/30 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-







Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

<100 колоний на TSA


Fraser

L

Listeria mono-

cytogenes

EH ИСО 11290-1

Производи-

тельность

48 ч/37 °С

L. mono 1/2a АТСС 19111

-

Полуколи-

чественный

>10 колоний на Oxford или PALCAM

Серо-черные колонии с черным ореолом











или L. mono 4b АТСС 13932





+ E. coli ATCC 25922 или 8739












+ E. faecalis ATCC 29212 или 19433












Селектив-

ность

24-48 ч/37 °С

E. coli ATCC 25922 или 8739

-

Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-












E. faecalis ATCC 29212 или 19433




<100 коло-

 ний на TSA


ITC

L

Yersinia ente-

rocolitica

ИСО 10273

Производи-

тельность

48 ч/25 °С

Y. enterocolitica ATCC 23715 или 9610

-

Полуколи-

чественный

<10 колоний на CIN или SSDC

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)












+ E. coli ATCC 25922 или 8739
















+ Ps. aeruginosa ATCC 27853












Селектив-

ность

48 ч/25 °С

Ps. aeruginosa ATCC 27853

-

Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-












P. mirabilis ATCC 29906





Park & San ders

L

Campylobacter

ИСО 10272

Производи-

тельность

См. стандарт

С. coli АТСС 43478*

-

Полуколи-

чественный

<10 колоний на среде Karmali или любой дру-

 гой среде по выбору

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)











или С. jejuni АТСС 33291 или 29428*















+ Е. coli АТСС 25922 или 8739















+ P. mirabilis АТСС 29906











Селектив-

ность

См. стандарт

+ Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-











P. mirabilis АТСС 29906





Preston

L

Campylobacter

ИСО 10272

Производи-

тельность

18ч/42 °С

С. coli АТСС 43478

-

Полуколи-

чественный

< 10 колоний на среде Karmali или любой дру-

 гой среде по выбору

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)











или С. jejuni АТСС 33291 или 29428















+ Е. coli АТСС 25922 или 8739





+ P. mirabilis АТСС 29906







Селектив-

ность

18ч/42°С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-











P. mirabilis АТСС 29906





PSB

L

Yersinia ente-

rocolitica

ИСО 10273

Производи-

тельность

3-5 дней/25 °С

Y. enterocolitica АТСС 23715 или 9610

-

Полуколи-

чественный

>10 колоний на CIN или SSDC

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)











+ Е. coli АТСС 25922 или 8739















+ Ps. aeruginosa АТСС 27853











Селектив-

ность

3-5 дней/25 °С

Ps. aeruginosa АТСС 27853

-

Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-











P. mirabilis ATCC 29906





MKTTn

L

Salmonella

ИСО 6579

Производи-

тельность

24 ч/37 °С

S. typhimurium ATCC 14028

-

Полуколи-

чественный

>10 колоний нa XLD или другой среде по выбору

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)











или S. enteritidis ATCC 13076















+ E. coli ATCC 25922 или 8739





+ Ps. aeruginosa АТСС 27853








Селектив-

ность

24 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-












Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

-

<10 коло-
ний на TSA

-

Rappaport Vassiliadis

L

Salmonella

EH 12824

Производи-

тельность

24 ч/41,5 °С

S. typhimurium АТСС 14028

-

Полуколи-

чественный

<10 колоний на BGA или другой среде по выбору

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)












или S. enteritidis АТСС 13076

-

-

-

-












+ Е. coli АТСС 25922 или 8739
















+ Ps. aeruginosa АТСС 27853












Селектив-

ность

24 ч/41,5 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739


Полуколи-

чественный

Полное ингибирова-

ние на TSA

-












Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

-

<10 коло-

ний на TSA

-

RVS

L

Salmonella

ИСО 6579

Производи-

тельность

24 ч/41,5 °С

S. typhimurium АТСС 14028

-

Полуколи-
чественный

>10 колоний нa XLD или другой среде по выбору

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)

или S. enteritidis ATCC 13076











+ Е. coli АТСС 25922 или 8739















+ Ps. aeruginosa АТСС 27853

-

-

-

-







Селектив-

ность

24 ч/41,5 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Полуколи-
чественный

Полное ингибирова-
ние на TSA

-











Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

-

<10 коло-
ний на TSA

-

Selenite-
cystine

L

Salmonella

EH 12894

Производи-

тельность

24 ч/37 °С

S. typhimurium АТСС 14028

-

Полуколи-
чественный

<10 колоний на BGA или другой среде по выбору

Характерные колонии согласно каждой среде (см. стандарт)











или S. enteritidis ATCC 13076















+ Е. coli АТСС 25922 или 8739















+ Ps. aeruginosa АТСС 27853











Селектив-

ность

24 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Полуколи-
чественный

<100 колоний на TSA

-











Е. faecalis АТСС 29212 или 19433





L = жидкая среда.

Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).



Таблица В.4 - Обогатительные неселективные среды

Среда

Тип

Микро-
организмы

Обозначение стандарта

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Эталон-
ные среды

Метод контроля

Критерии

Характерная реакция

BHI

L

Staphylococcus

ИСО 6888

Производи-

тельность

24 ч/37 °С

S. aureus АТСС 25923

-

Качест-
венный

Мутность 1-2

-

Brucella

L

Campylobacter

ИСО 10272

Производи-

тельность

2-5 дней/25 °С

С. coli АТСС 43478

-

Качест-
венный

Мутность 1-2

-












С. jejuni АТСС 33291 или 29428





Peptone-

salt (пеп-

тоновая соль)

L

Dilution liquids (разбавитель)

ИСО 6787

Раство-

ритель

45 мин/20 °С-25 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

TSA

Количест-
венный

+/-50% кол. к (+/-50% изначального подсчета)

-












S. aureus АТСС 25923

-

-

-

-

Thioglycol-

late

L

Clostridium perfringens

ИСО 3937

Производи-

тельность

24 ч/37 °С

Cl. perfringens ATCC 13124

-

Качест-
венный

Мутность 1-2

-

TSYEB

L

Listeria mono-

cytogenes

ИСО 11290

Производи-

тельность

24 ч/25 °С

L. mono 1/2a АТСС 19111

-

Качест-
венный

Мутность 1-2

-












L. mono 4b ATCC 13932

-

-

-

-

L = жидкая среда.

Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).



Таблица В.5 - Селективные разделительные среды

Среда

Тип

Микро-
организмы

Обозначение стандарта

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Эталонные среды

Метод контроля

Критерии

Характерные реакции

Модифици-

рованная среда Butzler

S

Campylobacter

ИСО 10272

Производи-

тельность

24-72 ч/ 42 °С

С. coli АТСС 43478

-

Качест-

венный

Хороший рост (2)

Характерные колонии соглас-

но каждой среде (см. стандарт)

CCDA

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Karmali

-

-

-

-

-

С. jejuni АТСС 33291 или 29428

-

-

-

-

Preston

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Skirrow

-

-

-

Селектив-
ность

24-72 ч/42 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Качест-

венный

Полное или частичное ингибиро-

вание (0-1)

Не обнаружи-

вается никаких характерных колоний








S. aureus АТСС 25923

-

-

Полное ингибиро-

вание (0)

-

CIN

S

Yersinia entero-
colitica

ИСО 10273

Производи-
тельность

24 ч/30 °С

Y. enterocolitica АТСС 23715 или 9610

-

Качест-

венный

Хороший рост (2)

Характерные колонии соглас-

но каждой среде (см. стандарт)

SSDC

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-






Селектив-

ность

24 ч/30 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Качест-

венный

Полное или частичное ингибиро-

вание (0-1)

Не обнаружи-

вается никаких характерных колоний










S. aureus АТСС 25923

-

-

Полное ингибиро-

вание (0)

-

Агар с бриллиан-

товым зеленым (BGA)

S

Salmonella

EH 12824/ ИСО 6579

Производи-

тельность

24-48 ч/37 °С

S. typhimurium АТСС 14028

-

Качест-
венный

Хороший рост (2)

Характерные колонии соглас-

но каждой среде (см. стандарт)












S. enteritidis АТСС 13076

-

-

-

-

XLD

-

-

-

Селектив-

ность

24-48 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Качест-
венный

Полное ингиби-

рование или мед-

ленный рост (0-1)

Не обнаружи-

вается никаких характерных колоний










Е. faecalis АТСС 29212 или 19433

-

-

Полное ингибиро-

 вание (0)

-

S = твердая среда.

Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).



Таблица В.6 - Неселективные разделительные среды

Среда

Тип

Микроорганизмы

Обозначение стандарта

Функция

Инкубация

Контрольные штаммы

Эталонные среды

Метод контроля

Критерии

Характерная реакция

Питательный агар

S

Enterobacteria-

сеае

ИСО 7402, ИСО 8523

Производи-

тельность

24 ч/37 °С

Е. coli АТСС 25922 или 8739

-

Качест-
венный

Хороший рост (2)

-

-

-

Salmonella

EH 12824, ИСО 6579


24 ч/37 °С

S. typhimurium АТСС 14028

-

-

-

-

-

-

Yersinia enterocolitica

ИСО 10273


24 ч/30 °С

Y. enterocolitica АТСС 23715 или 9610

-

-

-

-

Агар TSYEA

S

Listeria monocytogenes

EH ИСО 11290

Производи-
тельность

24 ч/37 °С

L. mono 1/2a АТСС 19111 или L. mono 4b АТСС 13932

-

Качест-
венный

Хороший рост (2)

-

S - твердая среда.

Штаммы, предназначенные для использования в лаборатории пользователя (минимум).

Произвольные штаммы в зависимости от используемого метода.