Р 52.24.662-2004 Оценка токсического загрязнения природных вод и донных отложений пресноводных экосистем методом биотестирования с использованием коловраток

     9 Отбор, хранение и подготовка проб донных отложений для биотестирования

9.1 Отбор проб донных отложений проводят согласно РД 52.24.635, РД 52.24.609, используя способы и устройства, предусмотренные РД 52.24.609.

9.1.1 Помимо проб донных отложений, для токсикологического анализа обязательно отбирают воду на этом же участке, желательно из придонного слоя согласно ГОСТ 17.1.5.04, ГОСТ 17.1.5.05 для подготовки пробы донных отложений, получения вытяжек, разбавления и т.д.

9.1.2 Отобранные пробы донных отложений помещают в чистые пластиковые мешки или пластиковые (стеклянные) банки с широким горлом, в которых доставляют их в лабораторию.

9.1.3 Пробы не консервируют.

9.2 Хранят пробы во влажном состоянии не более 1 сут при температуре не выше 2-4 °С. Сразу после отбора пробы помещают в холодильник или в прохладное место на борту экспедиционного судна.

9.2.1 Биотестирование проводят не позднее чем через 1 сут.

9.2.2 Допустимо замораживание проб. В замороженном состоянии пробы можно хранить в течение 60 сут при температуре минус 15-20 °С.

9.3 Подготовку опытной пробы и контрольной, отобранной на фоновом створе, проводят одновременно с помощью одних и тех же процедур.

9.4 Каждая опытная проба должна сопровождаться отбором контрольной пробы с идентичным типом и характеристиками донных отложений. Если тип донных отложений в опытных пробах различен, то к каждой опытной пробе необходимо ставить свой контроль.

9.5 Подготовка проб для разных вариантов биотестирования (нативная проба и водная вытяжка) основана на следующем.

9.5.1 Биотестирование проводят на пробах с естественной влажностью (без высушивания).

9.5.2 Для биотестирования нативной пробы ее во влажном состоянии просеивают через сито с порами от 0,5 до 1,5 мм для удаления обломков раковин, камней, водорослей и отмерших организмов, используя природную воду, отобранную одновременно с донными отложениями. Количество используемой для этой процедуры воды должно быть минимальным. Дают воде и полученному осадку отстояться в течение 6 ч. Сливают с помощью сифона большую часть воды в сосуд и сохраняют ее. Осадок перемешивают с оставшейся водой и используют для анализа.

Осадок можно хранить во влажных условиях при температуре от 2 до 4 °С не более 1 суток. Допускается замораживание осадка при температуре от минус 15 до минус 20 °С и хранение его в течение 60 сут (по РД 52.24.635), если невозможно провести биотестирование в течение указанного времени.

Наиболее объективную оценку токсического загрязнения донных отложений получают при проведении биотестирования непосредственно после отбора проб.

9.5.3 Для биотестирования водной вытяжки полученный осадок (по 9.5.2) помещают в чашки Петри и оставляют на воздухе при температуре (20±5) °С для получения воздушно-сухой пробы. К навеске массой 100 г добавляют природную воду (отобранную с фонового участка или отстоявшуюся водопроводную воду), в соотношении 1:4, согласно РД 52.24.635, или 1:5. Водный экстракт можно получить либо центрифугированием в течение 15 мин при 3000 об./мин, согласно РД 52.24.635, либо встряхиванием на шейкере в течение 1 ч с частотой 150 раз в минуту, или вручную в течение 1 ч.

Одну часть (1/2) водной вытяжки используют без фильтрования для анализа токсичности, обусловленной взвешенными веществами. Другую часть (1/2) фильтруют через бумажный фильтр до получения прозрачного фильтрата для оценки токсичности, обусловленной присутствием растворенных в воде загрязняющих веществ.

9.6 Биотестирование водной вытяжки донных отложений проводят с использованием любых тест-объектов, в том числе коловраток.

9.7 Биотестирование нативной необработанной пробы донных отложений проводят с использованием хирономид по РД 52.24.635.