МУК 4.2.2314-08

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методы санитарно-паразитологического анализа воды

Дата введения: с момента утверждения

1. РАЗРАБОТАНЫ: Институтом медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского ММА им. И.М.Сеченова (Н.А.Романенко, А.И.Чернышенко, Г.И.Новосильцев, Е.Н.Морозов, Н.А.Турбабина); ФГУЗ "Федеральный центр гигиены и эпидемиологии" Роспотребнадзора (А.И.Верещагин, И.В.Брагина, Т.Н.Цыбина, Т.Г.Сыскова, М.В.Зароченцев); кафедрой паразитологии, паразитарных и тропических болезней ММА им. И.М.Сеченова (В.П.Сергиев, Р.К.Мирзоева, М.В.Гузеева); ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в г.Москве" (Н.И.Тимошенко); ГНЦ РФ Физико-энергетический институт (Б.И.Фурсов, Г.С.Жданов); ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в г.Челябинске" (Б.Е.Рабинович); Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Т.М.Гузеева, З.С.Середа); ГУ НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н.Сысина РАМН (Ю.А.Рахманин, Р.И.Михайлова, А.Е.Недачин); ФГУП НИИ физических проблем им. Ф.В.Лукина (С.М.Кузьмин, Е.С.Кузьмин, С.М.Безручко); Тюменским НИИ КИП (Т.Ф.Степанова); ООО "СтайЛаб" (А.В.Галкин); РМАПО Минсоцразвития России (А.Е.Беляев); РАГС при Президенте РФ (В.В.Гутенев); Курским Госуниверситетом (Н.С.Малышева, С.С.Пехова, Н.А.Плехова, Е.Л.Дмитриева); ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Белгородской области" (В.В.Евдокимов, В.И.Евдокимов).

2. РЕКОМЕНДОВАНЫ К УТВЕРЖДЕНИЮ Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 6 декабря 2007 г. N 3).

3. УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Г.Г.Онищенко 18 января 2008 г.

4. ВВЕДЕНЫ ВЗАМЕН МУК 4.2.964-00 "Санитарно-паразитологическое исследование воды хозяйственного и питьевого использования"

1. Область применения

1.1. Методические указания устанавливают методы лабораторного паразитологического контроля безопасности питьевой воды по нормируемым показателям СанПиН 2.1.4.1074-01 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества", СанПиН 2.1.4.1116-02 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной в емкости. Контроль качества", СанПиН 2.1.2.1188-03 "Плавательные бассейны. Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды. Контроль качества".

1.2. Настоящие методические указания являются обязательными для контроля питьевой воды по показателям паразитарной безопасности при проведении государственного санитарно-эпидемиологического надзора (контроля) в учреждениях Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и лабораториях других организаций, аккредитованных в установленном порядке.

Допускается применение любого из указанных в настоящих МУК методов по выбору исполнителя.

Допускается использование аналогов оборудования, приборов, реагентов и материалов, указанных в настоящих МУК, разрешенных к применению в установленном порядке.

2. Отбор, хранение и транспортирование проб

2.1. Общие требования к отбору проб питьевой воды

Отбор проб воды на объектах надзора проводится в соответствии с действующими нормативно-методическими документами (СанПиН, ГОСТ, МУК) и настоящими методическими указаниями.

Для отбора проб воды используют специально предназначенную для этих целей одноразовую посуду или емкости многократного применения. Многоразовая посуда (емкости) должна быть изготовлена из материалов, выдерживающих обработку кипячением.

При исследовании воды из распределительной сети отбор проб производится из крана с предварительным спуском воды не менее 3-5 мин, с применением гибких шлангов, водораспределительных сеток, насадок. При отборе проб воды с концентрированием осадка на мембранных или порошковых фильтрах применяют насадки аппаратов напорного фильтрования, напор воды при этом регулируют с таким расчетом, чтобы он был достаточным для фильтрации через мембранные фильтры (МФАСП или ATM).

При исследовании воды на объектах транспорта (водном, воздушном, железнодорожном) отбор проб воды производится на выходе из гидротехнических сооружений, осуществляющих водоснабжение данных транспортных средств.

Из открытых (поверхностных) водоемов, плавательных бассейнов пробы отбирают с поверхности, с различных глубин объемом 25-50 л, емкостями 1,5-2,0 л с интервалом 2-3 мин.

Забор проб воды с объекта (точки пробозабора) проводят несколькими способами:

1) отбор воды с каждой точки пробозабора обследуемого объекта по 25-50 л непосредственно в большие закрывающиеся емкости (фляги, бутыли, канистры и т.п.) и соответственно доставкой этих объемов воды для исследования в лабораторию;

2) отбор воды (по 25-50 л с каждой точки) с последующим концентрированием проб с применением химреактивов (коагулянтов) непосредственно на обследуемом объекте и доставкой на исследование в лабораторию уменьшенного в 10 и более раз объема (осадок с надосадочной жидкостью);

3) отбор проб воды с помощью фильтровальных приборов на объектах водозабора и доставкой на исследование в лабораторию концентрированного осадка на мембранных или порошковых фильтрах.

2.2. Хранение и транспортирование проб

В лабораторию доставляют маркированные емкости с пробами исследуемой воды или осадок с надосадочной жидкостью после применения коагулянтов, или концентрированный осадок на фильтрах (мембранных или порошковых).

Фильтры, через которые проводилось фильтрование исходной воды с помощью фильтровальных приборов непосредственно на объекте надзора, помещают в широкогорлый флакон или стеклянную банку, добавляют исходной (исследуемой) воды с таким расчетом, чтобы вода покрывала поверхность фильтра, закрывают флакон или банку завинчивающейся или притертой крышкой и доставляют в лабораторию. При использовании фильтровальных приборов с порошковым фильтром в лабораторию доставляют концентрат пробы в пластиковой емкости, входящей в состав прибора.

Емкости с пробами воды, мембранными фильтрами с концентрированным осадком или с порошковым концентратом маркируют с указанием даты и номера пробы, количества мембранных фильтров с одной точки пробоотбора. Маркированные пробы в лабораторию транспортируют для дальнейшего исследования с сопроводительным актом отбора проб воды, где указывается место отбора (населенный пункт, водный объект и т.п.), дата, время забора, количество точек пробоотбора, номера проб, количество воды или количество фильтров и другая информация.

Пробы воды должны быть доставлены в лабораторию в течение 24 ч после отбора. Пробы, не прошедшие предварительную обработку, хранят при комнатной температуре 15-20 °С не более двух суток. Концентрированные пробы можно хранить в холодильнике при температуре 2-4 °С в течение не более трех суток.

3. Оборудование, расходные материалы, реактивы

3.1. Фильтровальное оборудование*

________________

* Допускается применение аналогичных приборов отечественных и зарубежных производителей, разрешенных к применению в установленном порядке.

Приборы мембранного фильтрования:

1) вакуумные фильтровальные установки типа ПВФ-142, ПВФ-35, ПВФ-47;

2) напорного фильтрования типа ПНФ, УППВ.

Приборы порошкового фильтрования:

1) напорного фильтрования - типа ПробоКонг и его модификации;

2) отборник флотанта фильтрующий типа "ОФФ-25".

3.2. Вспомогательное оборудование и расходные материалы

Лабораторная центрифуга типа ОПН-3, ОПН-8, ЦЛС-31М, ОС-6М со сменным ротором или другие марки с аналогичными параметрами, обеспечивающие 1500-3000 об./мин, позволяющие центрифугировать пробы воды в центрифужных пробирках объемом от 10 мл.

Низкотемпературный холодильный шкаф или холодильник бытовой, поддерживающий температуру 2-6 °С.

Термостат, поддерживающий рабочую температуру 37 °С и обеспечивающий градиент температуры в камере ±1 °С.

Весы лабораторные механические равноплечие (аптекарские) с наибольшим пределом взвешивания 1000 г, с допустимой погрешностью не более 0,1 г с разновесами или электронные с наибольшим пределом взвешивания 200 г, с допустимой погрешностью не более 0,01 г.

Ареометры с пределами измерения от 1,000 до 1,400 кг/м.

Дистиллятор, обеспечивающий качество дистиллированной воды не ниже ГОСТа 6709-72.

Шкаф сушильный, стерилизационный, обеспечивающий температуру до 180 °С.

Световые микроскопы отечественные типа МИКМЕД-2 (вариант 2) и других фирм, оснащенные окулярами с увеличением 10 (дополнительно могут быть 7 и 5), объективами 10, 40, 100. Окуляр-микрометр и объект-микрометр.

Мембранные фильтры для фильтрования воды на основе ацетатов целлюлозы типа МФАС-СПА с размерами пор от 1,5 до 3,0 мкм, МФАС-СПА-4 с размерами пор от 2,5 до 4,5 мкм или прозрачные аналитические трековые мембраны ATM на основе полиэтилентерефталата с размерами пор от 1,0 до 5,0 и более мкм. Диаметр фильтровальных дисков 25, 35, 47, 70 и до 142 мкм, в зависимости от диаметра фритты фильтродержателя используемого фильтровального оборудования.

Предфильтры - капроновая сетка с ячейками 60-70 мкм.

Емкости для отбора проб воды из нейтрального материала, пригодные для обеззараживания (широкогорлые стеклянные или пластиковые флаконы емкостью 100-500 мл с притертым или завинчивающимися крышками, металлические или пластиковые канистры емкостью 10-25 л, стеклянные бутыли, фляги молочные металлические, эмалированные бидоны и др.).

Дозаторы пипеточные полуавтоматические с наконечниками.

Лабораторный вортекс, лабораторный ротатор.

Лабораторная посуда стеклянная одноразового или многоразового использования (химические стаканы, колбы, чашки Петри, цилиндры измерительные, пробирки центрифужные градуированные, микропробирки полипропиленовые, стеклянные палочки, стекла предметные, стекла покровные, пипетки стеклянные или разовые и т.п.).

Инструментарий металлический: пинцеты для работы с мембранными фильтрами, ножницы, иглы препаровальные, шпатели.

Лотки эмалированные, металлические, эмалированные кастрюли, ведра.

Горелки газовые или спиртовки.

Штативы лабораторные для пробирок и микропробирок.

Часы песочные на 3-5 мин, часы сигнальные или электронный таймер.

Кисти акварельные широкие (мягкие или полужесткие).

4. Методы концентрирования проб питьевой воды

Концентрация больших объемов воды (50 л и более) на объектах позволяет пробу воды, предназначенную для доставки в лабораторию на исследование, уменьшить до 0,5-1,0 л.

Концентрирование больших объемов воды применимо также непосредственно в лабораториях, что позволяет не только уменьшить объемы исследуемых проб воды, но и хранить пробы перед исследованием в холодильнике до 3-х суток (п.2.2).

Все пробы воды, которые сконцентрированы с применением химических реактивов (коагулянтов), исследуются после предварительной фильтрации через мембранные фильтры.

4.1. Концентрирование проб воды с применением химических веществ

4.1.1. Концентрирование пробы воды гидрокарбонатом кальция

К 10 л пробы добавить 100 мл 1 моль/л CaCl, затем 100 мл 1 моль/л NaHCO. Встряхнуть емкость для перемешивания.

Добавить 100 мл 1 моль/л NaOH. Встряхнуть емкость для перемешивания.

Дать отстояться не менее 2 ч.

После осаждения хлопьев осторожно удалить из емкости надосадочную жидкость, оставив 4-5 см жидкости над осадком (даже если осадок невидим).

В осадок с надосадочной жидкостью добавить 100-200 мл 10%-ной сульфаминовой кислоты (NHSOH) для полного растворения хлопьев.

Хорошо перемешать содержимое емкости и перелить в центрифужные флаконы объемом 1000 мл или 500 мл, пронумерованные в соответствии с номером пробы.

Вода во флаконах должна иметь рН=6±0,5, чтобы не было повторного образования хлопьев. При несоответствии рН осторожно отрегулировать раствором 1 моль/л NaOH.

Центрифугировать флаконы 10 мин при 1500-2000 об./мин.

Сразу после центрифугирования осторожно удалить (слить) надосадочную жидкость или отсосать лабораторным вакуумным насосом с давлением не более 0,2 бар.

Энергично перемешать оставшуюся жидкость, ресуспендируя осадок, и перенести его в градуированную центрифужную пробирку объемом 50 мл.

Довести объем в ней до 50 мл фильтрованной дистиллированной водой (сполоснуть центрифужный флакон дистиллированной водой и перенести в 50 мл центрифужную пробирку).

Центрифугировать пробирки 15 мин при 2000-2500 об./мин.

Записать объем осадка сразу после центрифугирования.

Удалить надосадочную жидкость или отсосать пипетками, оставив 1 см над осадком.

Добавить дистиллированную воду в центрифужную пробирку, доведя объем до 5 мл.