10.1 Приготовленные гистологические препараты рассматривают под любым световым микроскопом проходящего света. Сначала используют обзорные план объективы - 10-кратный или меньше, а затем объективы со средним увеличением - до 40-кратного. Окуляры применяют с 10- или 16-кратным увеличением. Для получения достоверных результатов необходимо исследовать не менее чем по два среза с каждого из трех кусочков, отобранных от каждого образца.
10.2 Растительные углеводные добавки на основании их морфологических особенностей идентифицируют с помощью таблиц 1, 2.
Таблица 1 - Определительная таблица для идентификации растительных добавок углеводной природы
Компонент | ||||||||
Наименование показателя | Крахмалсодержащие добавки | Каррагинан | Камеди гуара и рожкового дерева | Пряно-ароматические добавки | Целлюлоза | |||
Крахмал | Мука | Ферментиро- | Полуочищенный | Очищенный | ||||
Форма частиц | Форма: свернутый жгут; боба; округлая с темной точкой в центре | Округлые частицы объединены в крупные агрегаты | Мелкие округлые частицы с темной точкой в середине | Частицы имеют неправильную форму округлой "кляксы", характеризуются неоднородностью | Частицы имеют неправильную форму, более однородны | Отдельно лежащие растительные клетки или группы клеток. Каждая клетка окружена четко видимой неокрашиваемой цитоплазматической оболочкой | Частицы чаще неправильной формы, расположены единично. Форма клеток зависит от вида пряности | Частицы имеют цилиндрическую форму, встречаются волокнистые структуры |
Размер | Нативный от 3 до 5 мкм, гидратированный - до 100 мкм | В соответствии с помолом | От 5 до 20 мкм | От 60 до 140 мкм | От 60 до 140 мкм | Размер одной клетки от 5 до 15 мкм | От 5 до 200 мкм | Длина от 5 до 70 мкм, ширина от 1 до 20 мкм |
Структура при окраске раствором Люголя | Черно-синие частицы | Черно-синие частицы | Черно-синие частицы | Окраска в бурый цвет | Окраска в бурый цвет | Нет окраски | Возможна окраска в темно-коричневый цвет | Нет окраски |
Структура при окраске гематоксилином и эозином | Нет окраски | Нет окраски | Нет окраски | Лилово-сиреневые стеклоподобные конгломераты, включающие в себя выраженную неоднородность, сотоподобную структурированность | Лилово-сиреневые стеклоподобные структуры. Неоднородность выражается только в разной плотности окраски | Округлое компактное эозинофильное вещество, окруженное широким неокрашиваемым светлым пространством | Соответствует структуре клеток листа, коры или плода использованного пряно-ароматического растения | Нет окраски |
Таблица 2 - Микроструктура растительных добавок углеводной природы
Рисунок 1 - Крахмал | Рисунок 2 - Крахмал |
Рисунок 3 - Рисовый крахмал | Рисунок 4 - Мука |
Рисунок 5 - Каррагинан полуочищенный | Рисунок 6 - Каррагинан очищенный |
Рисунок 7 - Камедь | Рисунок 8 - Камедь |
Рисунок 9 - Перец душистый | Рисунок 10 - Красный перец |
Рисунок 11 - Лук | Рисунок 12 - Целлюлоза |
От растительных углеводных добавок следует дифференцировать соевые белковые добавки - в клеточных комплексах преобладает окрашиваемое в розовый цвет эозином вещество:
соевый изолированный белок - частицы округлые, с отверстием внутри, имеют форму гантели или цветка;
соевый концентрат - частицы состоят из клеток цилиндрических (продольный срез) или округлых (поперечный срез), окруженных узким ровным неокрашиваемым просветом - целлюлозной оболочкой;
текстурированный соевый белковый продукт - волокнистый компонент - тонкие рыхлые пучки волокон и неокрашиваемые узкие цилиндрические клетки собранные в стопки.
При затруднениях в проведении идентификации компонентов состава анализируемых образцов следует использовать [6].
10.3 В ходе визуальной оценки гистологического препарата под световым микроскопом определяется наличие растительных углеводных добавок.
10.4 На основании данных, полученных в результате гистологического исследования, выявляют присутствие растительных углеводных добавок, проводят их качественную идентификацию и делают заключение о соответствии фактического состава анализируемого продукта с указанием в действующей документации (ГОСТ, ТУ) или на этикетке.
10.5 После проведения исследования препараты с окраской срезов гематоксилином Эрлиха и эозином хранят в комнатных условиях до трех лет. Препараты, окрашенные раствором Люголя, не заключают под покровное стекло и хранению свыше 10 дней не подлежат.