Определение содержания аминного азота в питательных средах проводят методом формольного титрования. Принцип метода основан на блокировании формальдегидом при рН 7,0 свободных аминогрупп и титровании щелочью эквивалентного количества карбоксильных групп. Начало и конец титрования определяют потенциометрически.
Реактивы: 1) натрия гидроксид (0,1 моль/л) или раствор соляной кислоты (0,1 моль/л);
2) натрия гидроксид 10%-й раствор;
3) раствор формалина (40%-й раствор формальдегида)* (ГОСТ 1625-75**).
_______________
* Перед каждым определением рН формалина доводят до рН 7,0 10%-м раствором натрия гидроксида.
** На территории Российской Федерации действует ГОСТ 1625-89. - Примечание изготовителя базы данных.
Ход определения
В стакан вместимостью 50 мл наливают необходимый объем () (подготовка проб см. примечания 1 и 2) анализируемого раствора препарата, содержащего 1,5-5,0 мг аминного азота, и доводят общий объем дистиллированной водой до 20 мл. Электроды потенциометра (см. определение рН) погружают в исследуемый раствор, рН которого доводят до значения 7,0 с помощью раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л) или раствора соляной кислоты (0,1 моль/л)*.
_______________
* В ходе определения электроды должны все время оставаться погруженными в раствор.
К нейтрализованному раствору добавляют 2 мл нейтрального формалина, перемешивают и, не вынимая электроды, титруют содержимое раствором натрия гидроксида (0,1 моль/л) до рН 9,1*. Проводят два параллельных измерения.
_______________
* При титровании следует использовать бюретку, вместимостью 5 мл.
Содержание аминного азота в исследуемом препарате в процентах () вычисляют по следующим формулам.
Для сухого образца:
,
где - количество раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л) в миллилитрах, пошедшее на титрование испытуемой пробы от рН 7,0 до 9,1;
- поправка к титру раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л);
- количество аминного азота в миллиграммах, эквивалентное 1,0 мл р-ра натрия гидроксида (0,1 моль/л);
- анализируемая навеска сухого препарата в миллиграммах, содержащаяся в титруемом объеме "";
- коэффициент пересчета миллиграммов в проценты.
Примечание 1.
Для сухих образцов (гидролизаты, экстракты, среды (1,5-4,0% аминного азота) - ""=10 мл 1%-го р-ра (анализируемая навеска образца "" составляет соответственно 100 мг).
Для жидкого образца: