МУК 4.2.2316-08 Методы контроля бактериологических питательных сред

6.5. Определение рН

Определение рН питательных сред проводят потенциометрическим методом с применением стеклянного электрода.

Калибровка и проверка рН-метра (потенциометра). Подготовка рН-метра и электродной системы производится согласно инструкциям, прилагаемым к прибору. Перед работой на потенциометре необходимо, пользуясь стандартными буферными растворами со значениями рН 4,01; 6,86; 9,18 при 25 °С, провести калибровку прибора*. Для приготовления таких растворов могут быть использованы фиксаналы (ГОСТ 8.135-74**). Различие между показанием прибора и номинальным значением рН буферного раствора не должно превышать 0,04 единицы рН.

_______________

* Если рН контролируемого раствора отличается менее чем на единицу от рН стандартного буферного раствора, то достаточна проверка прибора по одному буферному раствору, величина рН которого лежит в том же диапазоне измерения, что и значения рН контролируемого раствора. Если рН контролируемых растворов находятся в широких пределах, то проверку рН-метра следует производить по двум (трем) стандартным буферным растворам в соответствии с инструкцией.

** На территории Российской Федерации действует ГОСТ 8.135-2004. - Примечание изготовителя базы данных.

При измерении рН контролируемых растворов отсчет величины рН по шкале прибора производят после того, как показания прибора примут установившееся значение. Время установления показаний определяется буферными свойствами и температурой раствора (обычно время установления показаний не превышает 2 мин). Определение рН проводят при (25±2) °С, в противном случае необходимо сделать соответствующие поправки (подвести ручку термокомпенсатора либо использовать коэффициент пересчета). При измерении рН агаровых сред следует иметь ввиду, что полученные значения рН являются условными.

Оценку значения рН питательных сред необходимо проводить с учетом последующей стерилизации.

Примечание: автоклавирование, как правило, приводит к снижению рН, поэтому перед стерилизацией рН среды повышают на 0,2 единицы от требуемой величины, а после автоклавирования реакцию среды проверяют повторно.

Метод измерения рН

Подготовка проб:

в готовых жидких средах и гидролизатах определение рН проводят непосредственно в растворе;

для готовых плотных агаровых сред определение рН проводят в расплавленном и охлажденном до 45-50 °С препарате (необходимо особо тщательно отмывать электрод после измерения рН в агаризованных средах теплой (50-60 °С) дистиллированной водой; предпочтительно для этих сред пользоваться специально выделенным рН-метром). Возможно также определение рН в экстракте, приготовленном добавлением к 2,00 г измельченного студня 100 мл дистиллированной воды (рН 7,0-7,2), настаивания в течение 1 ч при температуре 18-25 °С с периодическим перемешиванием стеклянной палочкой и последующим фильтрованием через бумажный фильтр;

для сухих препаратов, не содержащих агар, определение рН проводят в 2%-м растворе, приготовленном добавлением к 2,00 г сухого препарата 100 мл дистиллированной воды, перемешиванием и последующим фильтрованием через бумажный фильтр;

для сухих препаратов, содержащих агар, определение рН проводят в экстракте, приготовленном добавлением к 2,00 г сухого препарата 100 мл дистиллированной воды, настаиванием с периодическим перемешиванием в течение 1 ч при температуре 18-25 °С и последующим фильтрованием через бумажный фильтр.