ГОСТ Р 52995-2008 (ИСО 17129:2006) Молоко сухое. Определение содержания соевого и горохового белков с использованием капиллярного электрофореза в присутствии додецил сульфата (SDS-CE). Метод разделения

     5 Реактивы

Если не установлено иначе, то применяют реактивы только признанного аналитического качества и воду двойной дистилляции или деминерализованную либо воду эквивалентной чистоты.

5.1 Экстрагирующий буфер

Растворяют 1,14 г десятиводного тетрабората натрия (NaBO·10HO) и 1,49 г дигидрата натриевой соли этилен-диаминтетрауксусной кислоты (EDTA; CHNNaO·2НО) в мерном цилиндре (см. 5.1) в 80 см воды. Разбавляют водой до 100 см и перемешивают.

Проверяют, равен ли рН экстрагирующего буфера раствора 8,3±0,1. Если конечное значение рН выходит за этот интервал, повторяют приготовление экстрагирующего буфера, при этом заменяют все реактивы. Корректировка рН с помощью химических реактивов не допускается.

5.2 Буфер для образца

Растворяют 606 мг три(гидроксиметил)аминометана (CHNO), 1,00 г соли додецилсульфата натрия, (SDS; CHOSNa) и 37 мг EDTA (CHNNaO·2НО) в мерном цилиндре в 80 см воды и перемешивают. Добавляют 14,7 см соляной кислоты, имеющей концентрацию (HCI)=0,1 моль/дм и 2 см 2-меркаптоэталона. Разбавляют водой до 100 см и перемешивают.

Проверяют, равен ли рН буфера для образца 8,7±0,1. Если конечное значение рН выходит за этот интервал, повторяют приготовление экстрагирующего буфера, при этом заменяют все реактивы. Корректировка рН с помощью химических реактивов не допускается.

5.3 Электрофорезный буфер, например Beckman eCAPSDS 14-200 гелевый буфер или эквивалентный.

5.4 Раствор гидроокиси натрия (едкого натра), (NaOH)=0,1 моль/дм.

5.5 Эталонная смесь для испытания, содержащая белки, имеющие молекулярную массу от 10 до 200.

Примечание - В качестве эталонной смеси можно использовать смесь, имеющуюся в продаже.

5.6 Эталонный образец для калибровки с известным процентным содержанием растительного белка, которое поставляется NIZO (Ede, NL). Белковый состав калибрующего образца должен быть также известен.