ОЦЕНКА ВОЗДЕЙСТВИЯ ВРЕДНЫХ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ НА КОЖНЫЕ ПОКРОВЫ И ОБОСНОВАНИЕ ПРЕДЕЛЬНО ДОПУСТИМЫХ УРОВНЕЙ ЗАГРЯЗНЕНИЙ КОЖИ
(Методические указания)
УКАЗАНИЯ ПОДГОТОВИЛИ:
НИИ гигиены труда и профзаболеваний АМН СССР (Е.Н.Марченко, Е.Г.Дымова, Н.Н.Молодкина, Н.Г.Иванов, Р.П.Родионова).
Московский институт гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана (Ю.Л.Егоров, М.А.Кропоткина, М.В.Малышева, В.А.Галицкая).
Институт биофизики МЗ СССР (В.А.Кондрашов).
Филиал Всесоюзного научно-исследовательского химико-фармацевтического института им. С.Орджоникидзе (Л.Ф.Шашкина).
Киевский институт гигиены труда и профессиональных заболеваний (Н.Г.Гончаренко, Г.П.Рожковская).
Институт биофизики МЗ ССCР (Н.Д.Сагайдак-Черняк, Е.В.Русских).
Уфимский НИИ гигиены труда и профзаболеваний (Г.Г.Максимов).
НИИ гигиены, токсикологии и профпатологии (Н.И.Калинина).
Московский филиал ВНИИХИМПРОЕКТ (Т.К.Никитенко).
НИИ резиновых и латексных изделий (Н.И.Шумская).
Министерствам здравоохранения союзных республик разрешается размножить методические указания в необходимом количестве.
УТВЕРЖДЕНЫ Зам. главного государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченко "1" ноября 1979 г. N 2102-79
1.1. В связи с широкой химизацией народного хозяйства, интенсивным использованием новых химических веществ, увеличением масштабов производства возросла опасность контакта и проникновения химических веществ через кожные покровы.
Каждое четвертое вещество, содержание которого нормировано в воздухе рабочей зоны имеет пометку "опасно при поступлении через кожу". Однако, до настоящего времени нет единого документа, который позволил бы:
- получать сравнимые данные по оценке реальной опасности возникновения острых и хронических проявлений воздействия химических веществ на кожные покровы в экспериментальных и производственных условиях;
- учесть возможность интоксикации при поступлении вредного вещества через кожу при клинико-гигиенической корректировке предельно допустимых концентраций веществ в воздухе рабочей зоны, особенно в тех случаях, когда концентрации вредных веществ не превышают гигиенических нормативов;
- регламентировать загрязнение кожных покровов работающих веществами, способными проникать через кожу;
- обосновать необходимость технологических и специальных защитных мероприятий, направленных на полное или максимальное исключение контакта кожных покровов работающих с вредными веществами.
1.2. Настоящие указания позволяют унифицировать методы и подходы к изучению местного раздражающего и кожно-резорбтивного действия химических соединений и к установлению гигиенического норматива содержания их на кожных покровах.
1.3. Предельно допустимый уровень загрязнений кожи (ПДУ) устанавливается для всей поверхности кожных покровов. В отдельных случаях при загрязнении только кистей рук - нормативы устанавливаются для кистей рук. При этом необходимо подтверждение отсутствия загрязнений кожи различных участков тела работающих по результатам смывов.
1.4. Методические указания предназначены для специалистов научно-исследовательских институтов, врачей токсикологических лабораторий санитарно-эпидемиологических станций. С целью контроля за соблюдением ПДУ загрязнений кожи - для врачей СЭС и санитарно-химических лабораторий промышленных предприятий.
1.5. Гигиеническая регламентация загрязнения кожных покровов вредными химическими веществами позволит научно обосновать оздоровительные, лечебно-профилактические мероприятия по профилактике профессиональной заболеваемости и разработать эффективные средства индивидуальной защиты.
2.1. Изучение местного раздражающего действия и резорбции вещества через кожу должно проводиться:
- для всех новых, внедряемых в производство химических соединений;
- для химических соединений, широко применяемых в промышленности, но не изученных при воздействии на кожные покровы.
Изучению подлежат вещества, находящиеся в жидком или твердом агрегатном состоянии. Устанавливать ПДУ для газообразных веществ не целесообразно, т.к. соблюдение ПДК вещества в воздухе рабочей зоны предохраняет организм от токсического воздействия при проникновении его через кожные покровы.
2.2. Перед проведением исследований необходим тщательный анализ физико-химических свойств соединений, параметров токсичности при других путях поступления вещества, некоторых специальных параметров (липофильность, коэффициент распределения октанол (вода, масло/вода)), особенностей технологического процесса для построения рабочей гипотезы о наличии и степени раздражающего эффекта, возможности проникновения через кожу, особенностях его распределения и прогнозирования токсичности.
2.3. Изучение воздействия химических веществ на кожные покровы с последующим обоснованием гигиенических нормативов проводится в 4 этапа:
l. Исследование и оценка местного действия.
II. Ориентировочная оценка кожно-резорбтивного действия.
III. Количественная оценка кожной резорбции с установлением:
а) среднесмертельной дозы - и средне-эффектного времени гибели животных - ;
б) порога и зоны ocтpoгo действия;
в) коэффициента кумуляции - ;
г) порога и зоны хронического действия;
д) предельно допустимого уровня загрязнения кожи - ПДУ.
IV. Клинико-гигиеническое обоснование предельно допустимого уровня загрязнений кожи.
2.4. Выбор животных
2.4.1. В качестве подопытных животных используются белые крысы с исходной массой 180-200 г, мыши (18-22 г), морские свинки (200-300 г), кролики (2,0-3,0 кг). Эксперимент проводят не менее, чем на двух видах животных, обязательными являются опыты на белых крысах.
Для изучения местного раздражающего действия в острых опытах кролики должны быть породы "Шиншилла", морские свинки - светлой масти.
2.4.2. Количество животных в группе не менее 8-10 особей. Среди животных одной группы максимальная разница в массе должна составлять не более 10%.
2.5. Подготовка животных к эксперименту
2.5.1. Участок аппликации должен составлять 5% общей поверхности кожи животных, что соответствует 2/3 хвоста у крыс и мышей, или участку кожи на спине крыс 4х4 см, кроликов 7х8 см, морских свинок 5х5 см.
2.5.2. За 1-2 дня до эксперимента тщательно выстригают ножницами или электромашинкой шерсть на спине. Применение депилятория недопустимо. В опыт пригодны животные с чистой здоровой кожей без механических повреждений. Для изучения местного действия шерсть выстригают на симметричных участках спины по обе стороны от позвоночника, оставляя шерстяной покров между ними в 2 см. Правый бок служит для аппликации изучаемого вещества, левый - для контроля.
Для изучения кожной резорбции исследуют один бок животного, при этом контролем служит другая группа животных.
2.5.3. На время экспозиции для исключения слизывания вещества с кожи и поступления его через органы дыхания животных фиксируют, фиксация должна осуществляться наиболее физиологичным способом. С этой целью применяют специальные станки, либо полужесткие воротники (из резины, пластика или линолеума); морских свинок и белых крыс помещают в индивидуальные домики.
2.5.4. Время экспозиции - 4 часа для всех видов животных кроме мышей, контакт для которых составляет 2 часа. Время наблюдения после однократной и повторной аппликаций - две недели.
2.6. Способ нанесения
2.6.1. Исследуемое вещество наносится на 5% участок кожи животного в строго дозированных количествах из расчета на 1 кг массы тела и на 1 см поверхности кожного покрова, равномерно распределяя его на всей поверхности.
2.6.2. Изучаемые соединения наносят, как правило, в нативном виде. В случае невозможности нанесения вещества perse, а также при наличии выраженного раздражающего либо токсического эффекта применяют разведение химического вещества. В качестве растворителей и разбавителей следует использовать дистиллированную воду, модельную среду, имитирующую потовую жидкость (приложение 1). При невозможности разведения вещества в перечисленных выше растворителях допускается применение растительного и вазелинового масла, этилового спирта и ацетона.
2.6.3. Нанесение вещества осуществляется открытым способом при температуре окружающей среды 18-24 °С. Для летучих веществ (температура кипения до 160 °С) следует использовать закрытый способ: компрессный метод Ведрова и Долгова, метод наклейки капсул и часовых стекол, применение камер КНИД-1 (приложение 2).
2.6.4. Контрольные животные должны находиться в одинаковых условиях. На соответствующие участки кожи им наносится растворитель или разбавитель, используемый в опыте. При изучении местного действия контролем служит противоположный участок кожи того же животного.
2.7. Способ смыва
2.7.1. После окончания экспозиции необходимо остатки вещества удалить теплой водой с мылом, избегая грубых приемов и манипуляций, способных вызывать повреждение кожи.
2.7.2. Для установления количественных параметров токсичности при резорбции вещества через кожу необходимы сведения о количестве вещества, проникшего в организм. С этой целью следует определить остаточные количества вещества на коже. Определение вещества в смывах проводится сразу после экспозиции при установлении , и (не менее 8 раз в течение хронического эксперимента).
2.7.3. Общие методические требования к проведению смывов с кожи животных сводятся к использованию специфического избирательного химического метода как для проведения смыва, так и анализа его. Жидкость, применяемая для смыва должна:
- обладать способностью растворять искомые вещества;
- быть безвредной как для кожи, так и целостного организма (например, этиловый спирт, слабая кислота, слабая щелочь).
2.7.4. Ватным тампоном, смоченным в жидкости, проводится смыв с участка кожи, на котором проводили аппликацию вещества. Манипуляцию повторяют не менее 2-х раз; последним сухим - промокают участок кожи. Все тампоны складывают в стаканчик с притертой пробкой.
2.7.5. Для малолетучих соединений количество веществ, проникшее в организм рассчитывают по формуле:
, (1)
где - количество вещества, проникшее в организм в мг/кг;
- количество вещества, нанесенное на кожу в мг;
- количество вещества в смыве в мг;
- масса тела в г.
или , (2)
где - количество вещества, проникшее в организм в мг/см;
- количество вещества, нанесенное на кожу в мг;
- количество вещества в смывах в мг;
- участок аппликации вещества на коже в см.
Для летучих соединении следует в формулы 1 и 2 вносить поправку на испарение (приложением N 3).
2.7.6. При наличии возможности определения вещества или его метаболитов в биосредах расчет проникшего в организм вещества производят, исходя из определяемых количеств.
3.1. Исследования проводят в острых (однократных) опытах. На кожу первоначально наносится 20 мг/см вещества. Реакция кожи регистрируется по окончании экспозиции, через 1 и 16 часов после однократной аппликации.
3.2. Функциональные нарушения кожи характеризуются появлением различной степени выраженности эритемы, отека, трещин, изъязвлений, изменением температуры и скорости проницаемости эпидермиса, снижением сопротивления кожи постоянному электрическому току, уменьшением ее нейтрализующей способности. Способность оценки функционального состояния кожи по выраженности эритемы и величине отека изложены в приложении N 4. Степень нарушения кожного покрова зависит от выраженности раздражающих свойств химического вещества, его концентрации и длительности воздействия. Оценка выраженности раздражающих свойств при однократной аппликации проводится по следующей классификации: