МУК 4.2.735-99 Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов

4.2. Микроскопические методы

4.2.1. Копроовоскопия (исследование фекалий на яйца гельминтов)

4.2.1.1. Метод толстого мазка под целлофаном по Като и Миура

Толстый мазок представляет собой тонкий слой фекалий на предметном стекле под гигроскопическим целлофаном, пропитанным смесью глицерина и фенола.

    Необходимые реактивы и оборудование

1. Глицерин

2. Фенол - 6%-ный раствор (100 мл дистиллированной воды + 6 г фенола)

3. Малахитовый зеленый - 3%-ный раствор (2,5 г малахитовой зелени + 75 мл дистиллированной воды)

4. Целлофан (гигроскопический)

5. Предметные стекла

6. Палочки стеклянные или деревянные

7. Валик или резиновая пробка

8. Микроскоп

    Подготовка к работе

Приготовление рабочего раствора Като

100 мл 6%-ного р-ра фенола + 100 мл глицерина + 1,2 мл 3%-ного р-ра малахитового зеленого (раствор можно хранить длительное время в склянке из темного стекла с притертой крышкой).

Фенол дезинфицирует препарат; глицерин просветляет мазок; малахитовая зелень снимает напряжение глаз микроскописта.

При отсутствии фенола и малахитовой зелени можно использовать раствор глицерина (50 мл глицерина + 50 мл дистиллированной воды).

Подготовка целлофановых полосок

Нарезать полоски из гидрофильного целлофана (гидрофильный целлофан горит, в отличие от полиэтиленовой пленки, которая плавится и непригодна для исследования), чтобы их размер соответствовал размеру предметного стекла.

Полоски поместить в рабочий раствор Като не менее чем на 24 ч до проведения анализа. В 200 мл рабочего раствора можно обрабатывать до 5 тыс. новых целлофановых полосок.

    Ход исследования

- На предметное стекло нанести 30-50 мг фекалий (размером с горошину). Растереть индивидуальной палочкой (стеклянной, деревянной).

- Фекалии накрыть целлофановой полоской, обработанной в растворе Като.

- Целлофан сверху притереть резиновой пробкой или специальным валиком, ширина которого соответствует или немного больше ширины предметного стекла, до получения тонкого, равномерного, прозрачного слоя.

- Препарат выдержать при комнатной температуре в течение 1 ч или в термостате при 40 °С в течение 20-30 мин.

- Микроскопировать при увеличении: объектив х8 или х10, окуляр х7 или х10 (для уточнения морфологического строения яиц гельминтов объектив х40).

Эффективность метода

- Позволяет просмотреть в 20-30 раз больше фекалий, чем в нативном мазке.

- Выявляет яйца кишечных и печеночных гельминтов при высокой и средней интенсивности инвазии.

- Менее эффективен для выявления инвазий низкой интенсивности.

    Применение метода

- Рекомендуется при массовых обследованиях населения на кишечные гельминтозы, например: при обследовании декретированных контингентов взрослого населения и детей организованных коллективов.