Действующий

ГОСТ Р 52173-2003 Сырье и продукты пищевые. Метод идентификации генетически модифицированных источников (ГМИ) растительного происхождения (Переиздание)

     6 Подготовка к проведению анализа

6.1 Приготовление растворов

     6.1.1 Приготовление раствора концентрацией (Трис-)=1 моль/дм

В мерную колбу по ГОСТ 12738 вместимостью 100 см помещают 12,11 г Трис (оксиметил) аминометана по 4.33, [12] растворяют в приблизительно 80 см деионизированной воды по 4.32, [11]. Концентрированной соляной кислотой по ГОСТ 3118 доводят рН раствора до 7,5, затем доводят до метки деионизированной водой и перемешивают. Срок хранения в холодильнике по ГОСТ 26678 при температуре от 4°С до 5°С - не более 6 мес.

     6.1.2 Приготовление раствора концентрацией ()=5 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 29,22 г хлористого натрия по ГОСТ 4233, растворяют в приблизительно 80 см деионизированной воды, доводят до метки деионизированной водой и перемешивают. Срок хранения при температуре от 4°С до 5°С - не более 6 мес.

     6.1.3 Приготовление раствора концентрацией ()=30%

В колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 50 см помещают 3 г гидроокиси натрия по ГОСТ 4328, растворяют в 7 см деионизированной воды. Срок хранения при температуре от 4°С до 5°С - не более 6 мес.

    6.1.4 Приготовление раствора концентрацией (ЭДТА)=0,5 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 100 см помещают 14,62 г этилендиаминтетрауксусной кислоты по 4.23, [8], растворяют в приблизительно 80 см деионизированной воды. Раствором гидроокиси натрия, приготовленным по 6.1.3, доводят рН раствора до 8,0, деионизированной водой доводят до метки и перемешивают.

Срок хранения при температуре от 4°С до 5°С - не более 6 мес.

    6.1.5 Приготовление лизирующего буфера

В мерную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 25 см помещают 0,5 г бромида гексадецилтриметиламмония, растворяют в 10 см  деионизированной воды, добавляют автоматическим микродозатором 2,5 см раствора Трис-, приготовленного по 6.1.1, 7 см раствора хлористого натрия, приготовленного по 6.1.2, 1 см раствора ЭДТА, приготовленного по 6.1.4, доводят деионизированной водой до метки, перемешивают.

Срок хранения при температуре от 4°С до 5°С - не более 6 мес. В случае выпадения осадка при хранении раствор выдерживают при комнатной температуре или подогревают в термостате по 4.8, [6] при температуре 65°С до полного растворения.

Непосредственно перед использованием в приготовленный раствор добавляют автоматическим микродозатором меркаптоэтанол по 4.34, [13] из расчета 4 мм на 1 см лизирующего буфера и перемешивают.

     6.1.6 Приготовление хлороформа, насыщенного водой

В колбу вместимостью 200 см вносят цилиндром по ГОСТ 1770 100 см хлороформа по ГОСТ 20015, добавляют 20 см деионизированной воды по ГОСТ 6709, тщательно перемешивают и оставляют на 24 ч для насыщения.

Срок хранения при температуре от 4°С до 5°С - не более 6 мес.

     6.1.7 Приготовление 70%-ного раствора этилового ректификованного спирта

В колбу вместимостью 200 см вносят цилиндром 70 см 96%-ного этилового ректификованного спирта по ГОСТ Р 51652, добавляют 26 см деионизированной воды и перемешивают.

Срок хранения при температуре от 4°С до 5°С - не более 6 мес.

     6.1.8 Приготовление раствора концентрацией (БСА)=20 мкг/см

В пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 см помещают 0,002 г сухого БСА по 4.36, [15], добавляют 1 см  деионизированной воды, перемешивают до полного растворения. Отбирают 10 мм приготовленного раствора и переносят в пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 см, добавляют 1 см деионизированной воды и перемешивают.

Срок хранения в морозильной камере при температуре минус 20°С - не более 1 мес.

     6.1.9 Приготовление смеси нуклеотидов концентрацией =4 ммоль/дм

В микроцентрифужную пробирку вместимостью 0,2 см вносят 96 мм деионизированной воды, 1 мм АТФ (концентрацией 100 ммоль/дм) по 4.43, [22], 1 мм ГТФ (концентрацией 100 ммоль/дм) по 4.43, [24], 1 мм  ЦТФ (концентрацией 100 ммоль/дм) по 4.43, [23], 1 мм ТТФ (концентрацией 100 ммоль/дм) по 4.43, [25], смесь перемешивают.

Срок хранения при температуре минус 20°С - не более одного  года.

 6.1.10 Приготовление 1xTBE буфера для электрофореза

В мерную колбу вместимостью 1000 см вносят 10,8 г Трис (оксиметил) аминометана, 5,5 г борной кислоты по ГОСТ 9656 и 0,92 г этилендиаминтетрауксусной кислоты, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают до полного растворения.

Срок хранения при комнатной температуре - не более 1 мес.