Р 4.1.1672-03 Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище

3.3. Метод хромато-масс-спектрометрии в анализе стеринов

Метод основан на прямом хромато-масс-спектрометрическом анализе стеринов, выделенных из липидов путем тонкослойной хроматографии фракции неомыляемых веществ.     

Условия проведения анализа

Выделение липидов проводят одним из унифицированных методов, предложенным для данного БАД и исключающим разрушение стеринов.

Экстракцию неомыляемых веществ следует проводить по возможности быстро, предохраняя пробы от попадания на них прямого солнечного света, отгонку растворителя следует проводить под вакуумом на ротационном испарителе при комнатной температуре.

Подготовку к проведению анализа и выделение стеринов из липидов проводят по п. "Колориметрический метод определения содержания стеринов".

Условия анализа: хромато-масс-спектрометр с автоматической системой обработки данных, энергия ионизирующих электронов 70 eV; диапазон массовых чисел 39-500 а.е.м.; температура источника ионов 120 °С; хроматографическое разделение на капиллярной колонке 47 м х 0,3 мм с химически связанной фазой SE-30, начальная температура колонки 50 °С - 2 мин, 240 °С - 8 мин. с последующим программированием со скоростью 4 °С/мин до 300 °С и изотермой (30 мин), температура испарителя 280 °С, переходных линий 275 °С. Скорость газа-носителя гелия 1,3 см/мин, в момент ввода пробы сброс перекрыт на 30 с, далее деление потока 1:60.

Структуру компонентов определяют путем сравнения полученных масс-спектров с имеющейся базой данных, а также по молекулярным и характеристическим осколочным ионам, выбор которых определяется эмпирическими корреляциями между масс-спектром и структурой изучаемых стеринов.

Таблица 8

     
Состав фракций стеринов, % отн., выделенных из ряда БАД
на растительной основе и на основе морепродуктов, полученный с помощью
метода хромато-масс-спектрометрии