МУ 3.1.1027-01 Сбор, учет и подготовка к лабораторному исследованию кровососущих членистоногих - переносчиков возбудителей природно-очаговых инфекций

7. Методы сбора и учета численности кровососущих членистоногих

При эпизоотологическом обследовании природных очагов трансмиссивных болезней организуют сбор кровососущих членистоногих с целью последующего обнаружения в организме переносчиков возбудителей этих инфекций. В ходе планового обследования территории очага одновременно со сбором эктопаразитов для лабораторного исследования проводят разовые учеты их численности. Другой важной формой паразитологической работы являются стационарные наблюдения, при которых осуществляют регулярные учеты численности эктопаразитов на протяжении сезона их активности или круглогодично, а также проводят углубленное изучение вопросов экологии, эпизоотологии по специальным комплексным программам. Добытый на стационаре материал подлежит обязательному лабораторному исследованию. Обе эти формы не исключают, а дополняют друг друга и во многих случаях не могут быть четко разграничены. Кроме перечисленных форм обследования организуют специальные учетные работы на территориях, где планируют и проводят дезинсекционные мероприятия.

Работники, проводящие полевые наблюдения, должны быть обеспечены защитной одеждой согласно действующим санитарным правилам по безопасности работы с микроорганизмами I-II групп патогенности.

7.1. Эпизоотологическое обследование и разовые учеты численности эктопаразитов

Сбор эктопаразитов в процессе обследования природных очагов проводят со всех отлавливаемых мелких млекопитающих (грызунов, насекомоядных, зайцеобразных, хищников), птиц, а также из их гнезд и ходов нор. Переносчиков собирают с крупных диких, домашних и сельскохозяйственных животных, отлавливают в природных биотопах и в жилье человека. Осмотру на наличие эктопаразитов подлежат все найденные трупы млекопитающих и птиц.

При эпизоотологическом обследовании очагов чумы главное внимание уделяют сбору блох из основных мест их обитания - с шерсти хозяина, его гнезда и ходов нор. При этом в различных очагах в зависимости от экологии носителей и переносчиков обследуют преимущественно те или иные места обитания, являющиеся более доступными для массового сбора блох. Основные сборы в большинстве очагов проводят со зверьков при их очесе в лаборатории. В поселениях малого суслика организуют массовые сборы блох из первого колена ходов нор. В поселениях малых песчанок, длиннохвостого суслика, где в первом отрезке нор численность блох низкая, их собирают из более глубоких отрезков. На территориях, заселенных полевками, блох легко добыть из гнезд зверьков. Наряду с блохами, как в природе, так и в лаборатории, при очесе животных собирают различных паразитиформных клещей, вшей.

При обследовании очагов туляремии, весенне-летнего клещевого энцефалита, геморрагических лихорадок проводят массовые сборы иксодовых клещей в природных биотопах, а также с сельскохозяйственных животных, мелких млекопитающих (грызунов), по возможности - с крупных диких животных. Сбор прочих кровососущих членистоногих (аргасовых, гамазовых и краснотелковых клещей, вшей) и кровососущих двукрылых (комаров, мошек, мокрецов и слепней) проводят исходя из конкретных особенностей природного очага и задач противоэпидемических формирований. Чаще всего эта работа осуществляется на стационарных участках.

В очагах сибирской язвы внимание уделяют слепням. В очагах многих вирусных инфекций необходимо организовать широкий сбор клещей, комаров, возможно мошек, мокрецов.

Целью проводимых в процессе эпизоотологического обследования разовых учетов численности является получение оперативной информации, позволяющей судить о видовом составе, распределении между хозяевами, численности переносчиков в текущем сезоне на всей очаговой территории. Сбор полевого материала желательно организовать так, чтобы его весь можно было использовать в целях учета. Методы сбора эктопаразитов в местах их обитания, а также орудия лова носителей должны быть стандартными. Добытых животных предпочтительнее помещать в мешочки по одному. При разборке материала в лаборатории желательно определять видовую принадлежность переносчиков. Кроме того, необходимо иметь данные о числе осмотренных объектов и о числе объектов, где встречаются те или иные эктопаразиты. В этих случаях обеспечивается возможность вычислять индексы обилия и встречаемости как отдельных систематических групп, присутствующих в данном сборе (блохи, иксодовые, гамазовые клещи и т.д.), так и отдельных видов в каждой из групп переносчиков. В противном случае рассчитывают только общие индексы обилия различных групп переносчиков.

Видовую принадлежность эктопаразитов можно определять при использовании консервированного материала. Для этого часть сборов эктопаразитов из различных мест обитания консервируют в 70-градусном спирте с учетом количества осмотренных объектов. При обследовании малоизученной территории желательно определять до вида всех кровососущих членистоногих.

Некоторые приемы сбора эктопаразитов и осуществляемого при этом учета их численности более подробно описаны ниже.

7.1.1. Сбор эктопаразитов с мелких млекопитающих и птиц

Грызунов, а также других мелких млекопитающих и птиц для сбора с них эктопаразитов добывают различными способами: давилками Геро, живоловками, капканами, петлями, отстрелом, в ловчие канавки, выливанием водой. Обязательно подбирают встречающиеся в поле трупы животных. Наиболее полные сборы можно получить при добыче животных в живоловки или отстреле, а также при условии достаточно быстрого изъятия их из орудий лова, пока эктопаразиты не успели покинуть труп хозяина. Поэтому при отлове активных в течение дня животных предпринимают систематический осмотр орудий лова, а при отлове ночных животных орудия лова проверяют на рассвете или при необходимости - в ночное время.

Добытых зверьков и птиц помещают в мешочки. Мелких зверьков можно умерщвлять корнцангами в самом мешочке, крупных - до укладки в него. В зависимости от целей сбора животных укладывают в мешочки по одному или небольшими группами по видам с учетом места добычи, стации и т.д. Мешочки должны превышать размер животного в 2-3 раза. Их шьют из плотной белой ткани. На расстоянии 4-5 см от верха пришивают завязку. Мешочки используют рубцом наружу. После помещения животного в мешочек его края дважды подворачивают, складывают гармошкой и туго завязывают. Мешочки с животными с одного места добычи можно объединять в одну связку. Под тесемку закладывают этикетку с указанием даты, точного адреса, стации, вида и количества животных, фамилии сборщика. Если на месте поимки остались блохи или иксодовые клещи, их собирают в пробирку, которую укладывают в мешочек вместе с хозяином или непосредственно сбрасывают в мешочек на хозяина. Транспортируют мешочки с животными в металлических отсадниках или больших клеенчатых мешках. Не допускается вторично использовать мешочки без обработки (кипячения).

В лаборатории работу с доставленным материалом проводят в заразном отделении или специальном боксе. Мешочек с животным помещают в эмалированный таз или кювету, развязывают тесемки и собирают эктопаразитов с внутренней поверхности, постепенно выворачивая мешочек. Тушку сбрасывают в таз, а мешочек осматривают на наличие эктопаразитов, а затем свертывают лицевой стороной наружу и погружают в ведро с водой. Очес млекопитающих и птиц проводят частым гребнем, кисточкой, пинцетом или зубной щеткой против шерсти (перьев). Особое внимание следует обращать на места концентрации эктопаразитов. На мелких млекопитающих блохи, клещи (иксодовые, гамазовые, аргасовые) чаще встречаются вокруг основания хвоста, в подмышечных впадинах, на шее. Личинки клещей-краснотелок кроме того скапливаются на наружной и внутренней поверхностях ушных раковин. На птицах иксодовые, аргасовые, некоторые гамазовые клещи обычно прикрепляются на веках, вокруг ушных отверстий, под крыльями, а краснотелковые локализуются в нижней части тела, реже на голове. Птиц перед осмотром, как правило, ощипывают.

Одновременно с очесом эктопаразитов сортируют по группам. Блох из таза выбирают мягким пинцетом, специально изготовленным из гибкой стальной ленты, или аспиратором. Иксодовых клещей можно собирать глазным, анатомическим, мягким пинцетом или тонкой кисточкой. Этих кровососущих помещают в сухие пробирки и закрывают ватно-марлевыми или корковыми пробками. Вшей и гамазовых клещей собирают препаровальной иглой, мягкой кисточкой, смоченной в воде или спирте, и, чтобы избежать расползания, переносят в пробирки с водой или 70-градусным спиртом (для коллекционирования). Личинок краснотелковых клещей осторожно соскабливают пинцетом или же вырезают участки кожи с паразитами.

На пробирках с эктопаразитами указывают вид животного и его порядковый номер по протоколу очеса и вскрытия (форма 1).

При необходимости доставки зверьков живыми и сохранения на них эктопаразитов живоловки с отловленными животными помещают в полотняные мешочки большого размера, которые в свою очередь укладывают в металлические отсадники или деревянные ящики, обитые внутри жестью. Очес живого зверька проводят с помощью марлевого конуса (сачка), плотно облегающего его тело. При энергичном поглаживании зверька пальцами рук в разных направлениях блохи свободно проходят через марлю.

Иногда применяют эфир, но не хлороформ. Животное либо помещают в сосуд, куда бросают вату, смоченную эфиром, либо просто проводят по шерсти смоченным тампоном. Уснувших блох счесывают обычным способом.

Для сбора блох с собак, кошек, ежей и с прочих животных их шерсть можно слегка припудрить инсектицидом (хорошо применять пиретроиды - относительно безвредные для теплокровных животных препараты), затем завернуть животное на несколько минут в ткань или посадить в мешочек, оставив снаружи голову. Блохи остаются на ткани, после чего их собирают. Другим способом является мытье кошек, собак теплой водой с хозяйственным мылом или специальным дезраствором.

Для сбора блох с убитых хищных млекопитающих и других крупных животных их можно подвесить над тазом с водой, куда будут падать покидающие труп эктопаразиты. Можно также воспользоваться обработкой шерсти животных инсектицидами. При работе с высоко прыгающими блохами используют посуду с высокими краями (баки, большие кастрюли).

Данные, полученные при разборке материала в лаборатории, заносят в форму 1. После определения видовой принадлежности эктопаразитов заполняют форму 2, в конце отчетного периода - форму 3. В этих и некоторых других формах предусматривают количество граф видового состава, соответствующее числу встречающихся на данной территории видов эктопаразитов.

7.1.2. Сбор эктопаразитов из нор грызунов

Сбор эктопаразитов из нор грызунов для лабораторного исследования предпринимают в периоды, когда в верхних частях ходов нор (первом колене) находится максимальное количество насекомых, что характерно для весенне-летнего и осеннего сезонов. Обследование нор в жаркий период года лучше проводить утром и вечером, в прохладный - в середине дня. Метод применим в поселениях грызунов, чьи блохи обладают выраженной миграционной активностью. Из входов нор также добывают иксодовых клещей. Гамазовые клещи, как правило, встречаются редко. Кроме того, в субстрате ходов нор могут быть найдены все стадии развития аргасовых клещей.

Эктопаразитов из ходов нор добывают с помощью различных приспособлений: лент, тампонов, выгребалок. Для получения сравнимых учетных данных следует применять однотипные способы сбора.

Норы сусликов, пищух обследуют с помощью ленты-шланга. Для этого из светлой фланелевой ткани шьют чехол шириной 5-6 см и длиной 150 см, к его верхнему концу пришивают шнур 1-1,5 м длиной для извлечения шланга из норы. Чехол набивают ватой или поролоном, можно вставить внутрь упругий резиновый шланг либо каркас из проволоки.

Для обследования нор сурков с помощью ленты готовят полоску светлой ткани шириной 20-25 см и длиной 150 см. Одну из продольных сторон сгибают вдвое на ширину 2-2,5 см и прошивают. В образовавшуюся складку вставляют упругую проволоку, конец которой выступает наружу на 15-20 см. Один конец ленты прочно закрепляют на проволоке. Обследовать входы нор сурков можно также ватным тампоном, обтянутым непроницаемой для блох тканью (фланель, бязь) и прикрепленным на упругую проволоку, ивовый прут и т.д. Размер тампона соответствует диаметру нор.

Сбор членистоногих из ходов нор лентами всех типов проводят следующим образом. Перед входом в нору помещают салфетку или лучше круг - обтянутый фланелевой тканью обруч (диаметром около 50 см) с небольшой ручкой (до 15 см). Ленту-шланг вводят в первое колено норы, шевелят несколько секунд, а затем извлекают ее из норы, осматривают, поместив на круг (салфетку), и мягким пинцетом собирают блох и клещей. При сборах для лабораторного исследования ленту вводят в ход норы несколько раз. Для учетных работ блох из первого колена норы выбирают полностью, т.е. до тех пор, пока эктопаразиты перестанут попадать на ленту.

В местностях с песчаными почвами эктопаразитов из наклонных нор добывают выгребанием субстрата, который извлекают из норы к устью скребком-выгребалкой или особым черпаком, похожим на узкую столовую ложку, в вырытую перед норой ямку (тарелку, миску). Собирают эктопаразитов пинцетом, аспиратором или укороченной бактериологической пробиркой. Для выбора из субстрата различных стадий аргасовых клещей можно использовать набор сит с убывающей величиной ячеек (не менее 2 мм) либо просматривать субстрат на светлой клеенке или в эмалированной кювете. Собирают клещей мягким пинцетом или кисточкой.