Статус документа

МУ 4.2.1097-02 Лабораторная диагностика холеры

5.3. Идентификация культур холерных вибрионов

Культуры, выделенные на различных этапах, идентифицируют с целью определения их принадлежности к виду Vibrio cholerae соответствующей серогруппы (О1, О139 или др.).

К виду V. cholerae относят грамотрицательные, аспорогенные, полиморфные палочки, слегка изогнутые или прямые, активно подвижные, с одним полярно расположенным жгутиком, образующие индофенолоксидазу, ферментирующие глюкозу в аэробных и анаэробных условиях до кислоты (без газа), расщепляющие маннит, маннозу, сахарозу, но не активные в отношении к арабинозе, инозиту, салицину и некоторым другим субстратам. Холерные вибрионы декарбоксилируют лизин и орнитин, но не обладают дигидролазой аргинина, образуют индол, обладают нитратредуктазой, не продуцируют сероводород. Таксономическое положение холерных вибрионов и признаки, дифференцирующие их от родственных микроорганизмов, приведены на рис.2 и в табл.2, 3, 4.

Рис.2. Классификация вибрионов

Примечания: 1) таксономия вибрионов представлена по Bergeys manual of Determinative Bacteriology, 1994;

2) предложено McDonell & Colwell (1985) отнести к новому роду Listonella;

3) типовые штаммы О2-О39 соответствуют Sakazaki (1970): О40-О83, а также О12; О23 и О26 не изучены в сравнении с международной коллекцией типовых штаммов.

Таблица 2

Основные дифференциальные признаки рода Vibrio и некоторых других микроорганизмов


Признаки	Роды сем. Vibrionacеае						Entero- bacteriaceae	Pseudo monadaceae
	Vibriо		Аеrоmonas	Enhydrobacter	Plesiomonas	Photobacterium
	V. cholerae	Другие виды
1	2	3	4	5	6	7	8	9
Окраска по Граму, морфология	Грамотрицательные полиморфные прямые или слегка изогнутые палочки
Подвижность	+	+ (-)	+ (-)	-	+	+	+ (-)	+
Оксидаза	+	+ (-)	+	+	+	+ (-)	-	+(-)
Рост на средах без NaCI	+	- (+)	+	+	+	-	-	-
Чувствительность к 0-129*	+	+ (-)	-	-	+	+	-	-
О/Ф глюкозы в среде Хью-Лейфсона	+/+	+/+	+/+	+/+	+/+	+/+	+/+	+/-
Газ из глюкозы	-	- (+)	+ (-)	-	-	+	+/-	-
Лизиндекарбоксилаза	+	+ (-)	- (+)	+	+	+	+/-	- (+)
Орнитиндекарбоксилаза	+	+/-	- (+)	+	+	+	+/-	- (+)
Аргининдигидролаза	-	- (+)	+	+	+	+	-/+	+/-
Ферментация:
лактозы	-	- (+)	- (+)	-	+	X	+/-	- (+)
маннита	+	+ (-)	+ (-)	X	-	-	+ (-)	+ (-)
арабинозы	-	- (+)	+ (-)	X	-	-	+ (-)	- (+)
сахарозы	+	+ (-)	+	X	-	- (+)	+/-	-
инозита	-	- (+)	-	X	+	-	- (+)	X
Образование:
ацетилметилкарбинола	+ (-)	- (+)	+ (-)	-	-	+	- (+)	X
индола	+	+ (-)	+ (-)	-	-	-	+ (-)	+/-
нитратредуктазы	+	+ (-)	+	+	+	+ (-)	+	+/-
-галактозидазы	+	+ (-)	+	X	+	+	- (+)	X
желатиназы	+	+ (-)	+	X	-	+	- (+)	+/-
Биолюминесценция	- (+)	- (+)	-	X	-	+	-	-
Мол. % G+С в ДНК	38	51	57-63	66	51	40-44	39-59	58-70

Условные обозначения:

* - бактериостатический агент 2,4-диaмuнo-6,7-диизопропилптериоидин;

Х - нет данных;

+ - положительный результат в 90%;

- - отрицательный результат в 90%;

+/- - положительный и отрицательный результаты встречаются в равной степени;

+ (-) или - (+) - в скобках редко наблюдаемый результат.

Таблица 3

Дифференциация патогенных для человека видов рода Vibrio


Признаки	V. cholerae	V. algino- lyticus	V. cicinna- tiensis	V. dam- sela	V. fluvialis	V. furnissii	V. harveyi	V. hollisae	V. metschni- kovii	V. mimicus	V. parahaemo- lyticus	V. vulni- ficus
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13
Морфология*
Подвижность	+	+	+	d	d	+	-	+/-	d	+	+	+
Роение на агаре	-	+	-	-	-	-	d	-	-	-	d	-
Индофенолоксидаза	+	+	+	+	+	+	+	+	-	+	+	+
Образование:
газа из глюкозы	-	-	-	-	-	+	-	-	-	-.	-	-
индола	+	+	-	-	-	+ (-)	+	+	+ (-)	+	+	+
ацетилметилкарбинола	+ (-)	+	+/-	+	-	-	d	-	+	-	-	-
Ферментация:
лактозы	-	-	-	-	-	-	-	-	+ (-)	- (+)	-	d
арабинозы	-	-	+	-	+	+	-	+	-	- (+)	+/-	-
сахарозы	+	+	+	-	+	+	d	-	+	-	-	-
целлобиозы	-	-	+	-	- (+)	- (+)	d	-	-	-	-	+
маннита	+	+	-	-	+	+	d	-	+	+	+	+ (-)
салицина	-	-	+	-	+/-	-	-	-	-	-	-	+
Аргининдигидролаза	-	-	-	+	+	+	-	-	- (+)	-	-	-
Лизиндекарбоксилаза	+	+	+	+ (-)	-	-	+	-	+ (-)	+	+	+
Орнитиндекарбоксилаза	+	d	-	-	-	-	-	-	-	+	+	+
-галактозидаза	+	-	+/-	-	d	d	-	-	d	+	-	d
Нитратредуктаза	+	+	+	+	+	+	+	+	-	+	+	+
Амилаза	+	+	+	X	+	d	+	X	+	-	+	+
Желатиназа	d	+	-	-	+/-	d	-	-	d	d	+	d
Рост в 1%-ной пептонной воде с NaCI:
0%	+	-	-	-	- (+)	- (+)	-	-	- (+)	+	-	-
3%	+	+	+	+	+	+	+	+	- (+)	+	+	+
6%	d	+	+	+	+	+	+	d	d	d	+	d
10%	-	+	-	-	- (+)	-	-	-	-	-	-	-
Рост при: 4 °С	-	-	-	-	-	-	-	X	-	-	-	-
20 °С	+	+	-	-	+	+	+	X	+	X	+	+
35 °С	+	+	+	+	+	+	+	X	+	+	+	+
42 °С	+	+	-	-	d	-	d	X	d	d	d	d
45 °С	-	-	-	-	d	-	-	X	d	X	-	-
Биолюминесценция	- (+)	-	-	-	-	-	d	-	-	-	-	-
Чувствительность к 0-129	+	- (+)	- (+)	+	d	-	+	d	+	+	- (+)	+