При проведении анализа используют химически чистые или чистые для анализа реактивы.
Вода, используемая для приготовления растворов ферментов, должна быть бидистиллированной.
Вода, используемая для приготовления растворов химических реагентов и подготовки проб, должна быть дистиллированной или деминерализованной.
Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов для определения лимонной кислоты при условии, что качество реактивов не ниже указанного в настоящем стандарте.
Препарат глицилглицин должен содержать не менее 90% основного вещества.
5.1 Глицилглициновый буферный раствор активной кислотностью 7,8 pH
7,13 г глицилглицина растворяют в 70 см дистиллированной воды по ГОСТ 6709. Активную кислотность раствора устанавливают равной 7,8 pH приблизительно 15 см раствора гидроокиси натрия по 5.5, добавляют 10 см раствора хлорида цинка по 5.6 и доводят общий объем раствора дистиллированной водой до 100 см. Буферный раствор устойчив при температуре 4 °С 1 мес.
5.2 Раствор НАДН
0,030 г динатриевой соли -никотинамидадениндинуклеотида (-НАДН-Nа, массовая доля основного вещества не менее 98%) и 0,060 г углекислого кислого натрия по ГОСТ 4201 растворяют в 6 см дистиллированной воды. Раствор устойчив при температуре 4 °С 1 мес.
5.3 Суспензия ферментов L-МДГ и L-ЛДГ
0,005 г сухого лиофилизата L-МДГ из свиного сердца активностью 6000 Е смешивают с 1 см раствора сернокислого аммония по ГОСТ 3769 молярной концентрации (NH)SO=3,2 моль/дм.
0,005 г сухого лиофилизата L-ЛДГ активностью 2750 Е смешивают с 1 см раствора сернокислого аммония по ГОСТ 3769 молярной концентрации (NH)SO=3,2 моль/дм.
Для приготовления суспензии ферментов L-МДГ и L-ЛДГ смешивают 0,4 см раствора сернокислого аммония по ГОСТ 3769 молярной концентрации (NH)SO=3,2 моль/дм, 0,1 см суспензии L-МДГ и 0,4 см суспензии L-ЛДГ. Суспензия ферментов устойчива при температуре 4 °С 12 мес.
5.4 Раствор ЦЛ
0,168 г сухого лиофилизата ЦЛ из Aerobacter aerogenes активностью 42 Е растворяют в 1 см бидистиллированной воды температурой 4 °С. Раствор устойчив при температуре 4 °С одну неделю, в замороженном состоянии при минус 20 °С - 1 мес.
5.5 Раствор гидроокиси натрия
8 г гидроокиси натрия по ГОСТ 4328 растворяют в 100 см дистиллированной воды.
5.6 Раствор хлорида цинка
0,080 г хлорида цинка по ГОСТ 4529 растворяют в 100 см дистиллированной воды.