ГОСТ Р ИСО 10993.4-99 Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 4. Исследование изделий, взаимодействующих с кровью
6.2 Методы исследования
6.2.1 Методы, рекомендуемые для изучения взаимодействия изделий и материалов с кровью
Рекомендуемые методы исследования сгруппированы на основе категорий изделий. Перечни методов приведены в таблицах 2-6.
Таблица 2 - Изделия, контактирующие с кровью извне. Уровень 1 - Кровоток, непрямой (см. 5.2.1)
Тест | Метод | Комментарии |
Тромбоз | Световая микроскопия (адгезия тромбоцитов, лейкоциты, агрегаты, эритроциты, фибрин и др.) | Световую микроскопию можно заменить на СЭМ, если какие-либо свойства материала осложняют световую микроскопию |
Коагуляция | ЧТВ (неактивированное) | - |
Тромбоциты | Подсчет тромбоцитов | - |
Гематология | Количество лейкоцитов, дифференциальный подсчет лейкоцитов; гемолиз (гемоглобин плазмы) | Гемолиз - наиболее важный тест этой категории, который регистрирует степень разрушения клеточной стенки эритроцитов при контакте материалов и изделий с кровью. Этот метод должен быть одним из нормативных стандартных методов определения гемолиза |
Иммунология | С3а, С5а, ТСС, C4d, Bb, iC3b, SC5b-9 | Перечень, включая четыре последние теста, отражает различные стадии активации комплемента |
Таблица 3 - Изделия, контактирующие с кровью извне. Уровень 1 - Циркулирующая кровь (см. 5.2.2)
Тест | Метод | Комментарии |
Тромбоз | Процент окклюзии; сокращение потока; гравиметрический анализ (масса тромбов); световая микроскопия (адгезия тромбоцитов, лейкоциты, скопления клеток, эритроциты, фибрин и т.д.); снижение давления через устройство | Световую микроскопию можно заменить на СЭМ, если свойства материала затрудняют осуществление световой микроскопии. Для изделий, имеющих длительный или многократный контакт (см. 6.2.1.2), снижать давление не рекомендуется |
Коагуляция | ЧТВ (неактивированное) | - |
Тромбоциты | Подсчет тромбоцитов; агрегация тромбоцитов; время кровотечения | - |
Гематология | Количество лейкоцитов, дифференциальный анализ лейкоцитов; гемолиз (количество свободного гемоглобина в плазме) | Гемолиз - наиболее важный тест этой категории, который регистрирует степень разрушения клеточной стенки эритроцитов при контакте материалов и изделий с кровью. Этот метод должен быть одним из нормативных стандартных методов определения гемолиза |
Иммунология | С3а, С5а, ТСС, C4d, Bb, iC3b, SC5b-9 | Перечень, включая четыре последние теста, отражает различные стадии активации комплемента |
Таблица 4 - Изделия, контактирующие с кровью извне. Уровень 2 - Дополнительный
Тест | Метод | Комментарии |
Тромбоз | СЭМ (адгезия и агрегация тромбоцитов, морфология тромбоцитов и лейкоцитов; фибрин) | - |
Коагуляция | Исследование специфических коагуляционных факторов; ФПА, D-димер, F | - |
Тромбоциты | ТФ-4, | Маркировка индием |
Гематология | Подсчет ретикулоцитов; активация высвобождения специфических продуктов из клеток периферической крови (гранулоциты) | Рекомендуется только для изделий, имеющих длительный или многократный контакт с кровью (см. 6.2.1.2) |
Иммунология | ИЛ-1 и другие цитокинины; определение i-PHK, специфической для цитокининов | - |
Таблица 5 - Имплантируемые изделия. Уровень 1 (см. 6.3)
Тест | Метод | Комментарии |
Тромбоз | Процент окклюзии; сокращение потока; вскрытие изделия (макро- и микроскопия); аутопсия дистальных органов (макро- и микроскопия) | - |
Коагуляция | ЧТВ (неактивированное), ПВ; ТВ; плазменный фибриноген, ПДФ | - |
Тромбоциты | Подсчет тромбоцитов; агрегация тромбоцитов | - |
Гематология | Количество лейкоцитов, дифференциальный подсчет лейкоцитов; гемолиз (количество свободного гемоглобина в плазме) | Гемолиз - наиболее важный тест этой категории, который регистрирует степень разрушения клеточной стенки эритроцитов при контакте материалов и изделий с кровью. Этот метод должен быть одним из нормативных стандартных методов определения гемолиза |
Иммунология | С3а, С5а, ТСС, C4d, Bb, iC3b, SC5b-9 | Перечень, включая четыре последние теста, отражает различные стадии активации комплемента |
Таблица 6 - Имплантируемые изделия. Уровень 2 - Дополнительный
Тест | Метод | Комментарии |
Тромбоз | СЭМ, ангиография | - |
Коагуляция | Исследование специфических факторов свертывания крови; ФПА, D-димер, F | - |
Тромбоциты | Исследование меченых | - |
Гематология | Подсчет ретикулоцитов; активация высвобождения специфических продуктов из клеток периферической крови (гранулоциты) | - |
Иммунология | ИЛ-1 и другие цитокинины; определение i-PHK, специфичной для цитокининов | - |
Рекомендуют два уровня исследований. Уровни подразделяют на пять классов. В основе разделения лежит изучаемый процесс или система:
- тромбоз,
- коагуляция,
- тромбоциты и их функции,
- гематология,
- иммунология.