ГОСТ 26573.1-93 Премиксы. Методы определения витамина А

     2 Определение витамина А методом обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии

Сущность метода заключается в экстракции витамина А (ретинола ацетат) из премикса экстрагентом и хроматографическом анализе содержания витамина в испытуемом растворе с использованием жидкостного хроматографа.

Метод применим в диапазоне концентраций витамина А 20-10000 международных единиц (ME) на 1 г премикса. Предельная погрешность метода - 10%.

2.1. Аппаратура и реактивы

Хроматограф жидкостный микроколоночный "Милихром" по ТУ 25-05.2830 или его последующие модификации со спектрофотометрическим детектором и спектральным диапазоном 190-360 нм.

Колонка хроматографическая одного из указанных размеров: 2х64, 2х80, 2х120 мм с числом теоретических тарелок не менее 4000 (по прилагаемому к колонке паспорту), заполненная одним из следующих сорбентов: Силасорб С, Силасорб SPHС, Сепарон С.

Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104*.

__________________

* С 1 июля 2002 года вводится в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).

Баня водяная, обеспечивающая постоянство температуры (75±1) °С.

Спектрофотометр со спектральным диапазоном работы 186-1100 нм.

Колбы конические со шлифом вместимостью 25 см, КН-2-25-18 МХС по ГОСТ 25336.

Пипетка 4-1(2)-1 (исполнения 4, 1-го или 2-го класса, вместимостью 1 см).

Пипетка 6-1(2)-10 или 7-1(2)-10.

Пипетка 2(3)-1(2)-50.

Колбы мерные 2-25-1(2) (исполнения 2, вместимостью 25 см, 1-го или 2-го класса точности) по ГОСТ 1770.

Колбы мерные 2-50-1(2) по ГОСТ 1770.

Цилиндры 1(2, 3, 4)-100, 1(2, 3, 4)-500 по ГОСТ 1770.

Воронка ВФО-40-ПОР 16 ХС по ГОСТ 25336.

Холодильник ХПТ-1-100-18 ХС по ГОСТ 25336.

Насос водоструйный по ГОСТ 25336.

Бюретка 6-2-2 (исполнения 6, 2-го класса точности, вместимостью 2 см).

Склянки с притертой пробкой.

Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300.

Спирт этиловый абсолютированный по ТУ 84-11-99.

Спирт изопропиловый (пропанол-2), х. ч., по ТУ 6-09-402.

Спирт пропиловый (пропанол-1), х. ч., по МРТУ 6-09-6628.

Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, х. ч., по ТУ 6-09-06-1092.

Ретинола ацетат в масле, 3,44%-ный раствор с активностью 90000-110000 МЕ/см по фармакопее.