ГОСТ 12044-93 Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения зараженности болезнями (с Поправкой)

     7 Метод обмывки семян (суспензии спор) и центрифугирования

Метод применяют для определения наличия спор головни на поверхности семян злаковых культур и лука; спор возбудителей болезни пасмо на семенах льна; спор рамуляриоза - на семенах кориандра; спор ржавчины на клубочках свеклы и семенах аниса; спор и мицелий церкоспороза на семенах фенхеля. На зерновых культурах этим способом можно определить зараженность семян ржи стеблевой и твердой головней, пшеницы - стеблевой и твердой головней, ячменя - каменной и черной (ложной пыльной) головней, кукурузы - пыльной головней, проса - обыкновенной мелкоспоровой головней, риса - гельминтоспориозом, фузариозом, головней (приложения Г, Д, Ж, Л, М и П).

7.1 Отбор проб

7.1.1 Для проведения анализа из семян основной культуры отсчитывают подряд две рабочие пробы по 100 семян в каждой.

7.2 Проведение анализа

7.2.1 Каждую рабочую пробу помещают в пробирку, заливают 10 см воды и взбалтывают. Семена с гладкой поверхностью (пшеница, рожь) взбалтывают в течение 5 мин, семена с шероховатой поверхностью (свекла и др.) - 10 мин, семена льна - 1 мин. Полученные суспензии можно обследовать непосредственно под микроскопом для идентификации патогенов или можно выделить споры путем центрифугирования. В случае центрифугирования промывную воду от каждой пробы семян сливают в отдельные пробирки центрифуги и центрифугируют в течение 10-15 мин при скорости 2000-2500 об/мин. Если в центрифуге не все пробирки заняты суспензией, то свободные заполняют для равновесия чистой водой до того же уровня. По окончании центрифугирования из пробирок осторожно отбирают 9 см надосадочной жидкости. Оставшийся осадок взмучивают пипеткой и из каждой пробирки готовят по пять препаратов. Для установления вида гриба препараты просматривают под микроскопом.

Количественный учет спор проводят в камере Горяева.

Зараженность спорами одного семени () в штуках вычисляют по формулам:

при подсчете в камере Горяева без предварительного центрифугирования

;                                                          (1)

при подсчете в камере Горяева с предварительным центрифугированием

,                                                         (2)

где - количество спор в 1 см суспензии, шт.;

10 - объем воды, взятой для смыва, см;

100 - количество семян, взятых для анализа, шт.

Величину в 1 см суспензии рассчитывают, умножая обнаруженное число спор на 250 тыс., если подсчет спор ведут в больших квадратах камеры Горяева, и на 400 тыс., если споры подсчитывают в малых квадратах камеры; если же подсчет ведут по всей площади камеры, то обнаруженное число спор умножают на 1111.

За результат анализа принимают среднеарифметическое результатов двух проб.