ГОСТ 14746-69

Группа Р31

     

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

СРЕДА ГЛЮКОЗО-ЦИТРАТНО-ЖЕЛТОЧНАЯ ДЛЯ ХРАНЕНИЯ
 СПЕРМЫ БЫКОВ ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ 2-5 °С

Medium, glucose-citrate-yolk, for keeping
of bull sperm at temperature 2-5 °C

     

Дата введения 1970-01-01

Постановлением Комитета стандартов, мер и измерительных приборов при Совете Министров СССР от 17/VI 1969 г. N 692 срок введения установлен с 1/I 1970 г.

ПЕРЕИЗДАНИЕ. Август 1973 г.

Настоящий стандарт распространяется на синтетическую глюкозо-цитратно-желточную (ГЦЖ) среду, .предназначенную для хранения спермы быков-производителей при температуре 2-5 °С, применяемой на станциях и пунктах искусственного осеменения.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

1.1. Глюкозо-цитратно-желточную среду готовят непосредственно перед ее применением на станциях искусственного осеменения в соответствии с Инструкцией по искусственному осеменению крупного рогатого скота, утвержденной Министерством сельского хозяйства СССР, и Ветеринарно-санитарными правилами работы станций с пунктов искусственного осеменения, утвержденными Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР.

1.2. В состав ГЦЖ среды входят компоненты, указанные в табл.1.

Таблица 1

1.3. Глюкоза медицинская ч.д.а. или х.ч., антибиотики и белый растворимый стрептоцид должны отвечать требованиям Государственной фармакопеи. Все препараты перед применением проверяют на безвредность для спермиев животных. Безвредность антибиотиков определяют по ВТУ 117-67, утвержденным Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР, а глюкозы и цитрата - по эталонам этих препаратов, установленных Государственным научно-контрольным институтом ветеринарных препаратов.

1.4. Содержание влаги в глюкозе допускается не более 10%.

При приготовлении среды препарат берут в большем количестве, чем указано в рецепте, с учетом содержания кристаллизационной воды.

Количество глюкозы () в г вычисляют по формуле:

,

где - количество безводной глюкозы, требуемое рецептом;

- содержание воды в препарате в процентах по анализу.

1.5. Желток куриных яиц берут от проверенных здоровых кур, из яиц со сроком хранения при температуре 2-5 °С не более 7 суток. Желательно брать желтки, окрашенные в ярко-оранжевый цвет.

1.6. Среду готовят в день разбавления спермы. Компоненты, входящие в состав среды, отвешивают на аналитических весах.

Перед отвешиванием реактивов проверяют точность весов и используют для навески часовое стекло, обработанное тампоном, смоченным 96%-ным этиловым спиртом по ГОСТ 5962-67*.

______________

* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000. - Примечание изготовителя базы данных.

    1.7. Для приготовления среды используют стерильные колбы и мерные цилиндры по ГОСТ 1770-64*.

________________

* На территории Российской Федерации действует ГОСТ 1770-74. Здесь и далее. - Примечание изготовителя базы данных.

Дистиллированную воду кипятят 15-20 мин и берут ее в необходимом объеме.

Глюкозу и цитрат стерилизуют ультрафиолетовыми лучами в бактерицидной камере (УНБК-1) в течение 15-20 мин или в растворе текучим паром при 100 °С в течение 30 мин.

После охлаждения раствора до 80-90 °С в стерильных условиях добавляют в него стрептоцид. Затем при температуре 58-60 °С в раствор добавляют желток куриных яиц. Для этого скорлупу яиц обеззараживают тампоном, смоченным 70%-ным раствором этилового спирта, или ультрафиолетовыми лучами в настольной бактерицидной камере в течение 10-15 мин.

Яйцо раскалывают стерильным скальпелем, белок сливают в чашку, а желток осторожно перекладывают на стерильный лист фильтровальной бумаги, чтобы удалить остатки белка и оболочку желтка. Желтки перекатывают к краю фильтровальной бумаги, прокалывают оболочку и сливают их в стерильный цилиндр или мензурку.

Измеренное количество желтка вносят в колбу с раствором и тщательно встряхивают до получения однородного цвета.

Затем при температуре не выше 45 °С вносят антибиотики в сухом виде или предварительно растворенными в 1-2 мл дистиллированной воды.

1.8. Приготовленная ГЦЖ среда по физико-химическим и биологическим свойствам должна отвечать требованиям и нормам, указанным в табл.2.

Таблица 2