Интенсивность флюоресценции тиохрома измеряют на флюорометре со светофильтрами, используемыми для витамина В, имеющими максимум пропускания в области от 320 до 390 нм (B-первичный) и от 400 до 580 нм (В-вторичный), начиная с проб стандартного раствора.
Интервал определяемых концентраций тиамина составляет от 0,1 до 0,4 мкг/см раствора, поступающего на измерение флюоресценции.