Исследование комаров на наличие личинок дирофилярий
1. Перед вскрытием живых самок комаров обездвиживают эфиром или в морозильной камере (-18°C) в течение 10-15 минут.
2. Комаров погружают на несколько секунд в этиловый спирт, затем промокают на фильтровальной бумаге и помещают в каплю физиологического раствора на предметное стекло.
3. Комаров препарируют под стереоскопическим микроскопом (объектив 3-4) в следующей последовательности: крылья, конечности, голову с ротовым аппаратом, грудной отдел и брюшко.
4. Из брюшка выделяют желудок и мальпигиевы сосуды.
5. При препарировании хоботка хорошо отделяется нижняя губа, в которой могут быть обнаружены личинки третьей стадии.
6. Подготовленный нативный препарат закрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом (объектив 10, а для уточнения вида и стадии развития дирофилярий объектив 40).
Личинки первой стадии (L1) могут быть обнаружены в желудке, второй (L2) - в мальпигиевых сосудах и третьей (L3) - в гемолимфе комара и его хоботке. При этом хорошо видно движение дирофилярий.
7. Перед вскрытием мертвых комаров, собранных в течение сезона их активности, предварительно помещают в 96° этиловый спирт на 30-60 минут, затем вскрывают по вышеописанной методике.
Препарат высушивают и без дополнительной фиксации окрашивают по Романовскому-Гимзе. После этого препарат просматривают под микроскопом и регистрируют наличие или отсутствие личинок дирофилярий в комаре.
Электронный текст документа
подготовлен АО "Кодекс" и сверен по:
официальный сайт Роспотребнадзора
www.rospotrebnadzor.ru (сканер-копия)
по состоянию на 13.10.2016