ГОСТ Р ИСО 20184-2-2021 Молекулярные диагностические исследования in vitro. Требования к процессам преаналитического этапа исследования замороженных тканей. Часть 2. Выделенные белки

     4 Общие сведения

Общие сведения о системах менеджмента качества медицинских лабораторий и, в частности, информация о контроле качества сбора, приема и обработки образцов (включая предотвращение перекрестного загрязнения) описаны в ИСО 15189:2012, 4.2, 5.4.4, 5.4.6 или ИСО/МЭК 17020:2012, раздел 8 и 7.2. Должны соблюдаться требования к лабораторному оборудованию, реагентам и исходным материалам в соответствии с ИСО 15189:2012, 5.3; ИСО 15189:2012, 5.5.1.2 и 5.5.1.3, а также могут применяться требования ИСО/МЭК 17020:2012, 6.2.

Все этапы диагностического рабочего процесса могут влиять на конечный результат исследования. Таким образом, весь рабочий процесс, включая стабилизацию биомолекул и условия хранения образцов, должен быть верифицирован и валидирован. Этапы рабочего процесса, которые не всегда поддаются контролю (например, интракорпоральная ишемия), должны быть задокументированы. Должна быть проведена оценка риска неконтролируемых этапов, включая их потенциальное влияние на результаты аналитических тестов, и приняты меры по предотвращению последствий для обеспечения требуемых аналитических характеристик методики.

Стабильность конкретных белков, подлежащих исследованию, и их посттрансляционные модификации (если это важно для анализа) следует исследовать в течение всего процесса, предшествующего исследованию, до его разработки и реализации (например, путем проведения эксперимента или исследования во временной динамике; см. также приложение A и [8]).

До стабилизации тканей путем заморозки количество протеина, конформации и образованные им связи могут существенно изменяться, например из-за индукции или подавления генов, разрушения РНК и изменения биохимического пути и энергетического статуса. Эти эффекты могут возникать из-за слишком длительной экстракорпоральной ишемии и экстракорпорального хранения, и средней температуры окружающей среды до заморозки. Кроме того, эти изменения могут варьироваться в тканях разных доноров/пациентов.

Как правило, чем больше продолжительность экстракорпоральной ишемии и экстракорпорального хранения и чем выше температура окружающей среды до заморозки образца тканей, тем больше риск того, что может произойти изменение белкового профиля.

Примечание - Продолжительное экстракорпоральное хранение вызывает изменение количества белка (например, цитокератина 18) и фосфопротеида (например, phospho-p42/44) [8], [9]. Хранение образца на мокром льду уменьшает этот эффект [10]. Количество белка и посттрасляционные модификации также могут варьироваться в зависимости от происхождения и типа тканей, исходного заболевания, хирургической процедуры, препаратов, вводимых для обезболивания или лечения сопутствующего заболевания, а также от различных условий окружающей среды после удаления тканей из тела пациента.

Поскольку интракорпоральную ишемию сложно стандартизировать, ее продолжительность должна быть задокументирована. Если невозможно избежать экстракорпорального хранения, продолжительность и температуру окружающей среды, в которой находится упакованный образец, следует отобразить в документации. Если образец транспортируют в другое помещение для заморозки, то продолжительность и условия транспортирования следует задокументировать.

Инструкции по технике безопасности при транспортировании и санитарной обработке должны соблюдаться в соответствии с ИСО 15189:2012, 5.2.3 и 5.4.5, а также ИСО 15190.

В течение всего процесса, предшествующего исследованию, должны соблюдаться меры предосторожности во избежание перекрестной контаминации между различными образцами, например путем использования одноразовых материалов, когда это возможно, или соответствующих процедур очистки между обработкой различных образцов.

Если медицинское изделие для диагностики in vitro, изготавливаемое в промышленных условиях и находящееся в обращении, не используется в соответствии с инструкциями производителя, ответственность за его использование и эксплуатационные характеристики возлагается на пользователя.