ГОСТ 34553-2019 Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Токсикокинетические испытания (с Поправкой)

     5 Дополнительные подходы

Дополнительные подходы, кроме экспериментов in vivo, приведенные в настоящем стандарте, могут дать полезную информацию об абсорбции, распределении, метаболизме или выведении химического вещества у определенных видов животных.

5.1 Использование информации, полученной при исследовании in vitro

5.1.1 Ответы на определенные вопросы относительно метаболизма химического вещества можно получить при исследованиях in vitro с использованием соответствующих экспериментальных систем. Свежевыделенные или культивированные гепатоциты и субклеточные фракции печени (например, микросомы, цитозоль или фракция S9) можно использовать для изучения предполагаемых метаболитов. Изучение локального метаболизма вещества в органе-мишени (например, в легком) может быть информативным для оценки риска. Для этих целей могут быть полезны микросомальные фракции тканей-мишеней. Исследования на микросомах могут быть полезны для устранения потенциальных возрастных и половых различий, для определения параметров активности фермента ( и ), которые помогают оценить уровень дозы, определяемой метаболизмом вещества, при разных уровнях экспозиции. Кроме того, микросомы можно использовать для идентификации конкретных микросомальных ферментов, участвующих в метаболизме вещества, что может найти применение в экстраполяции данных на другие виды организмов (см. также 4.14.3.1). Возможность индукции биотрансформации можно исследовать in vitro с использованием субклеточных фракций печени (например, микросом и цитозоля) животных, предварительно обработанных исследуемым веществом, путем исследования индукции гепатоцитов или определенных клеточных линий, экспрессией соответствующих ферментов. В некоторых случаях и при соответствующих условиях субклеточные фракции, взятые из тканей человека, могут быть использованы для определения потенциальных различий в биотрансформации. Результаты исследований in vitro могут быть полезны при разработке физиологически обоснованных токсикокинетических (РВТК) моделей [6].

5.1.2 Исследования дермальной абсорбции in vitro могут дать дополнительную информацию для характеристики абсорбции [7].

5.1.3 Первичные культуры клеток печени и свежеприготовленные срезы ткани можно использовать для исследования аналогичных вопросов, наряду с препаратами микросом печени. В некоторых случаях можно исследовать конкретные вопросы, используя клеточные линии с охарактеризованной экспрессией соответствующего фермента или специально созданные клеточные линии. В определенных случаях может быть полезным изучение in vitro ингибирования и индукции конкретных изоферментов цитохрома Р450 (например, CYP1A1, 2Е1, 1А2 и др.) и/или ферментов фазы II, вызываемых исходным исследуемым веществом. Полученная информация может быть полезна для исследования химических веществ, имеющих сходную структуру.

5.2 Использование результатов токсикокинетических исследований в качестве дополнительной информации

5.2.1 Результаты анализов образцов крови, ткани и/или экскретов, полученные при проведении других исследований токсичности, могут содержать данные о биодоступности, изменении концентрации в плазме во времени (AUC, ), потенциале биоаккумуляции, скорости клиренса, а также о возрастных и половых различиях метаболизма и кинетики.

5.2.2 Планирование исследования может предусматривать поиск ответов на следующие вопросы: насыщение уровня абсорбции, биотрансформации или путей выведения при более высоких дозах исследуемого вещества; функционирование других метаболических путей при более высоких дозах и ограничение токсичных метаболитов при более высоких дозах.

5.2.3 Другие аспекты по оценке опасности могут включать:

- исследование возрастной чувствительности в результате изменений в состоянии гематоэнцефалического барьера, почек и/или способности к детоксикации;

- исследование субпопуляционной чувствительности из-за различий в способности к биотрансформации или других особенностей ТК;

- определение степени воздействия трансплацентарного переноса химических веществ на плод или новорожденного через лактацию.

5.3 Применение токсикокинетического моделирования

Токсикокинетическое моделирование может быть полезным при оценке разных аспектов опасности и риска, например для прогнозирования системного воздействия дозы на внутренние ткани. Кроме того, оно позволяет исследовать конкретные вопросы о способе воздействия вещества, путях экспозиции и схемах дозирования. Эти модели могут служить основанием для межвидовой экстраполяции результатов и оценки риска для человека. Данные, пригодные для разработки физиологически обоснованных токсикокинетических (РВТК) моделей для химического вещества любого вида, включают следующие параметры: 1) коэффициенты распределения; 2) биохимические константы и физиологические параметры; 3) параметры абсорбции для каждого способа поступления вещества; 4) кинетические данные in vivo для оценки модели [например, параметры выведения для соответствующих (более 10%) путей экскреции, и для метаболизма]. Экспериментальные данные, используемые при разработке моделей, должны быть получены с применением надежных научных методов, а результаты моделирования утверждены. Химические и видоспецифичные параметры, такие как скорости абсорбции, распределение в ткани крови и константы скорости метаболизма, часто определяют для обеспечения разработки некомпартментного или физиологического моделирования [8].