ГОСТ 34108-2017 Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Определение содержания микотоксинов прямым твердофазным конкурентным иммуноферментным методом (с Изменением N 1)

     12 Проведение испытания

12.1 Приготовление экстрактов микотоксинов

Экстрагирование

Взвешивают анализируемую пробу массой около 20 г, с записью результата до второго десятичного знака, помещают в коническую колбу вместимостью 250 см, добавляют 100 см экстрагента (см. таблицу 1). При использовании тест-системы N 2 для определения охратоксина А к пробе добавляют 50 см экстрагента. Закрывают колбу пробкой и перемешивают в течение 30 мин на устройстве для смешивания. Полученный раствор фильтруют через бумажный складчатый фильтр.

Примечания:

1 При экстракции необходимо соблюдать соотношение массы анализируемой пробы к объему растворителя.

2 Допускается использование ультразвуковой обработки (мощность генератора 35 Вт, рабочая частота 22 кГц) в ультразвуковой бане в течение 30 мин или проведение экстракции в блендере в течение 3 мин с высокой скоростью.

3 Экстракт должен иметь значение pH в интервале 6-8 единиц pH. Излишняя щелочность или кислотность экстракта может повлиять на результаты анализа, поэтому ее необходимо корректировать. Увеличить значение pH раствора можно добавлением в него 1 М раствора гидроокиси калия (КОН), уменьшить значение pH можно добавлением 1 М растворов азотной кислоты (), серной кислоты () или ортофосфорной кислоты ().

4 Допускается вместо фильтрации через бумажный фильтр проводить центрифугирование при 3000 g в течение 5 мин.

Таблица 1

Разбавление экстрактов для тест-системы N 1

Фильтрат для определения содержания суммы афлатоксинов, охратоксина А, Т-2 токсина используют для дальнейшего проведения испытания по 12.2.

Фильтрат для определения содержания афлатоксина разбавляют буферным раствором в соответствии с таблицей 1 и далее используют для дальнейшего проведения испытания по 12.2. Разбавление экстракта для определения содержания афлатоксина проводят следующим образом: в виалу дозатором помещают 1 см буферного раствора, вносят 1 см фильтрата, перемешивают.

Фильтрат для определения содержания ДОН, зеараленона, суммы фумонизинов разбавляют экстрагентом в соответствии с таблицей 1 и далее используют для дальнейшего проведения испытания по 12.2.

Разбавление экстракта для определения содержания ДОН проводят следующим образом: в виалу дозатором помещают 3 см дистиллированной воды, вносят 1 см фильтрата, перемешивают.

Разбавление экстракта для определения содержания зеараленона проводят следующим образом: в виалу дозатором помещают 4 см раствора А, вносят 1 см фильтрата, перемешивают.

Разбавление экстракта для определения содержания суммы фумонизинов проводят следующим образом: в виалу дозатором помещают 1,9 см дистиллированной воды, вносят 0,1 см фильтрата, перемешивают.

Далее проводят градуировку и анализ экстрактов проб по 12.2.

Разбавление экстрактов для тест-системы N 2

Фильтраты для определения содержания разбавляют в соответствии с таблицей 1 и далее используют для дальнейшего проведения испытания по 12.2.

Разбавление экстракта для определения содержания афлатоксина , суммы афлатоксинов, охратоксина А, зеараленона разбавителем проб проводят следующим образом: в пробирку типа Эппендорф дозатором помещают 500 мм разбавителя проб, вносят 500 мм фильтрата, перемешивают.

Фильтрат для определения содержания ДОН, суммы фумонизинов разбавляют экстрагентом в соответствии с таблицей 1 и далее используют для дальнейшего проведения испытания по 12.2.

Разбавление экстракта для определения содержания ДОН проводят следующим образом: в пробирку типа Эппендорф дозатором помещают 400 мм разбавителя проб, вносят 100 мм фильтрата, перемешивают.

Разбавление экстракта для определения содержания суммы фумонизинов проводят следующим образом: в пробирку типа Эппендорф дозатором помещают 700 мм разбавителя проб, вносят 50 мм фильтрата, перемешивают.

(Измененная редакция, Изм. N 1).

12.2 Проведение градуировки и анализа экстрактов проб