10.1 Принцип метода
Метод основан на оценке изменения интенсивности биолюминесценции штаммов бактерий при воздействии токсических веществ, присутствующих в испытуемой пробе, по сравнению с контрольной пробой (дистиллированная вода). Уменьшение интенсивности биолюминесценции штаммов бактерий пропорционально токсическому эффекту испытуемой продукции.
Метод предназначен для скрининговой оценки токсичности косметической гигиенической моющей продукции, дезодорантов и продукции для депиляции в аэрозольной упаковке, жидкой парфюмерной продукции, спиртосодержащих лосьонов, зубных паст, ополаскивателей для полости рта.
10.2 Средства измерений, оборудование, реактивы и материалы
Весы лабораторные по ГОСТ OIML R 76-1, высокого класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г.
pH-метр любой марки с набором электродов.
Люминометр типа "Биотокс-10" с набором кювет вместимостью 1,5 см.
Биосенсор типа препарата "Эколюм".
Дозаторы лабораторные по ГОСТ 28311.
Колбы 2-25 (100)-2 по ГОСТ 1770.
Цилиндры 1-25 (250)-2 по ГОСТ 1770.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Термостат электрический суховоздушный с автоматическим терморегулятором до 50°C, позволяющий поддерживать заданную температуру с погрешностью ±1°C.
Допускается применение аналогичного оборудования и материалов с техническими и метрологическими характеристиками, а также реактивов по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте. При их применении следует руководствоваться рекомендациями изготовителя.
10.3 Приготовление проб испытуемой продукции
Испытуемые пробы готовят по 9.3.1 и в соответствии с таблицей 5.
Величина водородного показателя pH полученных испытуемых проб должна соответствовать диапазону 6,0-8,5.
10.4 Проведение измерений
При определении индекса токсичности параллельно тестируют контрольные (дистиллированная вода) и испытуемые пробы, при этом измерение проводится не менее чем в трех повторностях.
Подготовку прибора, определение рабочей концентрации биосенсора и измерение интенсивности биолюминесценции проводят в соответствии с эксплуатационной документацией на оборудование.
10.5 Обработка и оформление результатов испытания
Оценку токсичности испытуемой пробы проводят по относительному различию в интенсивности биолюминесценции контрольной и испытуемой проб и вычислению индекса токсичности , представляющего безразмерную величину.
Индекс токсичности определяется по формуле
, (5)
где и - соответственно интенсивность люминесценции испытуемой и контрольной проб.
За результат испытания принимают среднеарифметическое значение величины индекса токсичности .
По величине индекса токсичности делают вывод о степени токсичности испытуемого образца продукции в соответствии с таблицей 6.
Таблица 6 - Оценка степени токсичности испытуемого образца