ГОСТ 33775-2016

     

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Медоносная пчела (Apis mellifera). Тест на личинках на токсичность

Testing of chemicals of environmental hazard. Honey bee (Apis mellifera). Larval toxicity test

     

МКС 13.020.01

Дата введения 2017-03-01

Предисловие

Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Ассоциацией "Некоммерческое партнерство "Координационно-информационный центр государств - участников СНГ по сближению регуляторных практик" (Ассоциация "НП КИЦ СНГ") на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии международного документа, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 20 апреля 2016 г. N 87-П)

За принятие стандарта проголосовали:

(Поправка. ИУС N 1-2023).

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 июня N 757-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33775-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 марта 2017 г.

5 Настоящий стандарт является модифицированным по отношению к международному документу OECD, Test No. 237:2013* "Медоносная пчела (Apis mellifera). Тест на личинках на токсичность" ("Honey bee (Apis mellifera) larval toxicity test, single exposure", MOD) путем изменения структуры. Сопоставление структуры настоящего стандарта со структурой примененного в нем международного документа приведено в дополнительном приложении ДА.

________________

* Доступ к международным и зарубежным документам, упомянутым в тексте, можно получить, обратившись в Службу поддержки пользователей. - Примечание изготовителя базы данных.

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования международного документа для приведения в соответствие с ГОСТ 1.5 (подраздел 3.6)

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Май 2019 г.

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации.
     
     В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты"

ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС N 1, 2023 год

Поправка внесена изготовителем базы данных

Введение

Настоящий стандарт основан на методе, разработанном во Франции [1]-[3], который был опробован в виде кольцевого метода в период с 2005 по 2008 г. в семи европейских лабораториях [4].

Настоящий стандарт относится к требованиям, сформулированным в Соединенных Штатах, Канаде и Европе [5]-[7], для испытания токсичности химических веществ на личинках, которым скармливали обогащенный испытуемым веществом корм в лабораторных условиях с использованием одноуровневой стратегии.

Настоящий стандарт на личинках медоносных пчел дополняет TG ОЭСР 213 [8] и TG 214 [9] на молодых взрослых медоносных пчелах, и его следует рассматривать в качестве первоначального уровня испытания в общей схеме оценки рисков для пчел [4].

     1 Область применения

1.1 Настоящий стандарт устанавливает метод определения острой токсичности для расплода медоносной пчелы в лабораторных условиях.

1.2 Метод основан на определении летальной дозы через семьдесят два часа (72-ч LD) после однократного воздействия на личинки химического вещества (в частности, действующего вещества или препаративной формы пестицида). Полученные данные используют в соответствующих схемах оценки рисков для расплода медоносных пчел.

     2 Принцип метода

На первые сутки (D1) испытания отбирают синхронизированные личинки первой стадии развития (L1) (т.е. личинки одного возраста) из сот трех пчелиных семей и помещают по отдельности в 48-луночные планшеты, где им скармливают стандартизированное количество искусственного корма. На четвертые сутки (D4) испытания одну дозу испытуемого вещества вводят личинкам с кормом в диапазоне пяти концентраций в возрастающем порядке. Гибель личинок регистрируют на D5, D6 и D7 испытания. Через 72 ч рассчитывают LD для личинок (суммарная гибель на D7).

     3 Информация об испытуемом химическом веществе

Необходимо иметь сведения о растворимости в воде, растворимости в растворителе и давлении паров исследуемого вещества. Полезная информация об испытуемом химическом веществе включает структурную формулу, чистоту, стабильность в воде и на свету, следует представить значение коэффициента распределения в системе октанол-вода (). Представляют описание внешнего вида и источника испытуемого вещества (партия, номер партии). Методические указания по испытанию химических веществ с физико-химическими свойствами, которые затрудняют проведение испытания, приводятся в Руководстве ОЭСР N 23 [10].

     4 Стандартные вещества

Токсичным химическим веществом, используемым в настоящем методе в качестве стандарта, является диметоат технической чистоты (CAS RN. 60-51-5). Стандартное химическое вещество подвергают испытанию для подтверждения того, что тест-система и условия являются чувствительными и надежными. Дозу (8,8±0,5) мкг действующего вещества (ДВ)/личинку, растворенную максимум в 3 мкл воды, смешивают с кормом непосредственно перед введением личинкам и скармливают на D4 [2], [3].

     5 Достоверность испытания

Для испытания используют следующие критерии достоверности:

- в контрольном планшете(ах) суммарная гибель личинок в период с D4 по D7 должна составлять 15% в каждой повторности;

- в обработке стандартным химическим веществом гибель личинок (после поправки, 8.1.1) должна составлять 50% на D7.

     6 Описание метода

     6.1 Оборудование

6.1.1 Личинок разводят в прививочных рамках из кристаллического полистирола (например, ref CNE/3, NICOTPLAST Society), имеющих внутренний диаметр 9 мм и глубину 8 мм. Рамки сначала стерилизуют, например, погружением на 30 мин в этанол или другой стерилизующий раствор, а затем сушат в вытяжном шкафу с ламинарным потоком. Каждую рамку помещают в лунку 48-луночного планшета. Верхнюю часть прививочной рамки можно поддерживать на уровне планшета, например размещением на дне лунки кусочка стоматологического ватного валика, смоченного 500 мкл стерилизующего раствора, объем которого увеличен добавлением 15% глицерина (масса/объем) (см. рисунок 1).

Рисунок 1 - Рамка с личинками в лунке с культурой ткани

6.1.2 Данные планшеты помещают в герметичный эксикатор из плексигласа (например Nalgene 5314-0120 или 5317-0180 в зависимости от требуемого объема) с чашкой, наполненной насыщенным раствором сульфата калия (), для поддержания насыщенной водой атмосферы. Эксикатор помещают в термостат, снабженный системой принудительной циркуляции воздуха, для того, чтобы температура вокруг эксикатора была одинаковой - от 34°C до 35°C, и максимально близкой к диапазону температуры во время проведения испытания.

     6.2 Тестовые организмы

Источник личинок

6.2.1 Личинки отбирают от трех различных семей, каждая из которых представляет повторность (см. 7.1.1). Семьи должны быть надлежащим образом накормленными, здоровыми (т.е. насколько это возможно, должны отсутствовать признаки болезней и паразитарных инвазий), с известным источником и физиологическим состоянием.

6.2.2 Испытания проводят во время кладки яиц королевой. В случае проведения санитарной обработки (например, обработки против клещей или возбудителей заболеваний) регистрируют дату проведения обработки семей и указывают название использованного препарата. Не допускаются никакие обработки за четыре недели до начала испытания.

6.2.3 На D3 (см. рисунок 3) для обеспечения получения личинок от трех семей, королев минимум из трех семей содержат в своей семье в изоляционной камере для вылупления, включающей пустую соту или соту с формирующимся рабочим расплодом и пустые лунки (см. рисунок 2). Изоляционную камеру для вылупления помещают рядом с сотами, содержащими расплод. На D2 максимум через 30 ч после выдерживания в камере королеву выпускают из камеры после проверки на наличие свежих отложенных яиц. В зависимости от фертильности королевы рекомендуется сократить время изоляции для минимизации вариабельности в размере и возрасте личинок. Соту, содержащую яйца, оставляют в камере рядом с расплодом на стадии инкубации и до вылупления (D1).