ГОСТ Р ИСО 29701-2015 Нанотехнологии. Наноматериалы для испытаний в тест-системах in vitro. Метод определения содержания эндотоксинов с использованием лизата амебоцитов Limulus (ЛАЛ-тест)

Приложение А
(справочное)

     
Примеры мешающих факторов, оказывающих влияние на результаты ЛАЛ-теста

А.1 Ингибирование

Факторы, ингибирующие (замедляющие) реакцию ЛАЛ-реактива с эндотоксинами:

А.1.1 Соли: ацетат натрия (), 0,3 моль; натрий углекислый кислый (), 0,1 моль; хлористый калий (KCI), 50 ммоль; хлористый натрий (NaCI), 0,6 моль [17].

Примечание - Данный мешающий фактор устраним. Разведение испытуемой пробы устраняет ингибирование реакции.

А.1.2 Гепарин [18].

Примечание - Данный мешающий фактор устраним. Добавление в испытуемую пробу буферного раствора НСЭ, содержащего катионы натрия () и кальция () устраняет ингибирование реакции.

А.1.3 Ионы металлов: ионы железа ( и ), ионы хрома (), ионы алюминия () [19], [20].

Примечание - Данный мешающий фактор не устраним. Добавление в испытуемую пробу натриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (Na-ЭДТА) частично активирует реакцию.

А.1.4 Пластмассы (полипропилен) [21].

А.1.5 Вещества, модифицированные четвертичными соединениями аммония [22].

А.1.6 Фильтры из эфиров целлюлозы [23].

А.1.7 Ингибиторы протеаз [24].

А.1.8 Полисорбат 20 [25].

Примечание - Данный мешающий фактор устраним. Разведение испытуемой пробы устраняет ингибирование реакции.

А.2 Активация

Факторы, активирующие (усиливающие) реакцию ЛАЛ-реактива с эндотоксинами:

А.2.1 4Na-ЭДТА [19].

Примечания

1 Механизм действия полностью не изучен.

2 Ингибирование или активация реакции не наблюдается при содержании в испытуемой пробе 2Na-ЭДТА или 3Na-ЭДТА менее 0,5 ммоль. Наличие в испытуемой пробе высокой концентрации Na-ЭДТА вызывает ингибирование реакции в ЛАЛ-тесте [19].