ГОСТ 32075-2013 Материалы текстильные. Метод определения токсичности (с Поправкой)

     6 Проведение испытаний

Для проведения испытаний используют водные экстракты текстильных материалов, контрольные растворы, а также размороженную суспензионную кратковременную культуру клеток млекопитающих - сперму быков по ГОСТ 26030.

Порядок приготовления перечисленных растворов приведен в 6.1-6.3.

6.1 Приготовление опытного раствора

Исследованию подвергают водные экстракты элементарных образцов текстильного материала или образцов одежды.

6.1.1 В качестве экстрагента используют дистиллированную воду по ГОСТ 6709.

6.1.2 Для приготовления экстракта используют один из отобранных по 5.1 элементарных образцов массой (1,0±0,01) г.

6.1.3 Измельченный элементарный образец помещают в колбу с притертой пробкой, заливают дистиллированной водой из расчета 50 мл воды на (1,0±0,01) г образца, тщательно перемешивают, добиваясь полного смачивания текстильного материала водой. При плохом смачивании частей элементарного образца материала водой допускается применение утяжелителей нейтрального состава (например, пластиковых или стеклянных шариков).

Опытным раствором является экстракт с добавлением сухих реактивов глюкозы и цитрата натрия (в пропорции: на 10 мл испытуемого раствора - глюкозы 0,4 г, цитрата натрия 0,1 г).

(Поправка. ИУС N 8-2016).

6.1.4 Экстракцию проводят в суховоздушном термостате [3] при температуре (40±2)°С в течение 24 ч.

6.2 Приготовление контрольного раствора

6.2.1 В качестве контрольного раствора используют глюкозо-цитратный раствор: из расчета на 10 мл дистиллированной воды - глюкоза - 0,4 г, цитрат натрия - 0,1 г.

Контрольный раствор одновременно является разбавителем для оттаивания замороженной спермы.

6.3 Оттаивание замороженной спермы

6.3.1 Для оттаивания замороженной спермы в пробирку отбирают разбавитель в объеме, указанном в паспорте на сперму быка, и ставят ее в термостат анализатора изображения АТ-05 [1] с температурой (40±1,5)°С.

6.3.2 Анатомическим пинцетом извлекают из сосуда Дьюара гранулу спермы и опускают ее в пробирку с нагретым до (40±1,5)°С раствором, приготовленным по 6.3.1. Сразу после размораживания содержимое пробирки тщательно перемешивают, встряхивая пробирку, и ставят обратно в термостат на 5-6 мин.

6.4 Проведение испытаний

Индекс токсичности определяют при сравнении экспериментальных данных опытного раствора с контрольным.

6.4.1 Температура проведения испытаний - (40±1,5)°С. Испытуемые растворы (контрольный и опытный) в течение эксперимента должны постоянно находиться при указанной температуре.

Контрольный и опытный растворы (в количестве по 0,4 мл каждого) отбирают в пробирки с притертыми пробками и ставят в блок термостата анализатора изображения АТ-05 при температуре (40±1,5)°С.

6.4.2 В пробирки с контрольным и опытным растворами помещают по 0,1 мл полученной по 6.3 суспензии сперматозоидов.

6.4.3 Заполняют по пять капилляров анализатора изображения АТ-05 контрольным и опытным растворами.

6.4.4 Капилляры устанавливают в каретку и помещают ее в анализатор изображений АТ-05 [1].

6.4.5 Нажатием кнопки "Старт" анализатора изображения АТ-05 начинают процесс испытаний (накопление экспериментальных данных).

Процесс испытаний, обработка результатов эксперимента, вычисление индекса токсичности, коэффициента вариации и всех характеристик эксперимента выполняются автоматически анализатором изображений типа АТ-05.

6.4.6 При подвижности сперматозоидов порядка 10% от первоначальной активности в опытных капиллярах останавливают процесс накопления экспериментальных данных нажатием кнопки "Стоп".

6.4.7 При получении значения коэффициента вариации величины интенсивности движений сперматозоидов более 15% эксперимент повторяют начиная с 6.3.

Если значение коэффициента вариации не более 15%, то результаты испытаний считают статистически значимыми. Результаты испытаний оформляют протоколом.

Протокол испытаний должен содержать значение индекса токсичности с точностью до 0,1 и отвечать требованиям ГОСТ ИСО/МЭК 17025.