Порядок кондиционирования хроматографической колонки
Д.1 Общая схема кондиционирования системы перед выводом на рабочий режим сводится к следующему*:
_______________
* Данную операцию выполняют с целью уравновешивания сорбента колонки.
- насос системы промывают рабочим элюентом (если система была под другим элюентом, насос перемывают в соответствии с совместимостью растворителей);
- на колонку подают раствор дигидрофосфата калия, приготовленный по 6.3.4, со скоростью 0,10 см/мин до установления постоянного давления;
- скорость потока постепенно увеличивают с шагом 0,1 см/мин, с установлением постоянного давления после каждого прибавления до 1,0 см/мин;
- перед первым измерением с помощью программного обеспечения, в соответствии с руководством пользователя выполняют операции в соответствии с таблицей Д.1.
Таблица Д.1 - Порядок вывода хроматографа на рабочий режим
N пп | Выполняемая операция | Время, мин |
1 | Промывка инжектора | 6,5 |
2 | Ввод образца с нулевым объемом или "холостая инжекция"* | 15,0 |
3 | Уравновешивание колонки | 5,0 |
* В зависимости от конструктивных особенностей хроматографической системы выполняют ввод образца с нулевым объемом (программная функция) или "холостое инжектирование" - ввод 20 мм подвижной фазы по 6.3.4. |
Выполнение данной операции осуществляют с использованием условий, указанных в таблице Д.2.
Таблица Д.2 - Профиль градиента при холостом определении
Время, мин | Скорость потока подачи элюента, см/мин | Состав подвижной фазы (элюента), массовая доля, % | |
Раствор дигидрофосфата калия | Ацетонитрил | ||
0 | 1 | 96,0 | 4,0 |
2 | 80,0 | 20,0 | |
7 | 80,0 | 20,0 | |
9 | 96,0 | 4,0 | |
15 | 96,0 | 4,0 |
Д.2 Выключение хроматографической системы проводят в соответствии с руководством по эксплуатации, при этом:
- скорость потока подвижной фазы снижают до 0,1 см/мин и затем подачу останавливают;
- насос промывают водой;
- колонку отмывают водой при скорости (0,5-1,0) см/мин в течение 30 мин и выключают прибор.