Статус документа
Статус документа

ГОСТ 32903-2014 Продукция соковая. Определение водорастворимых витаминов: тиамина (B(1)), рибофлавина (В(2)), пиридоксина (B(6)) и никотинамида (PP) методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии

Приложение Д
(рекомендуемое)

     
Порядок кондиционирования хроматографической колонки

Д.1 Общая схема кондиционирования системы перед выводом на рабочий режим сводится к следующему*:

_______________

* Данную операцию выполняют с целью уравновешивания сорбента колонки.


- насос системы промывают рабочим элюентом (если система была под другим элюентом, насос перемывают в соответствии с совместимостью растворителей);

- на колонку подают раствор дигидрофосфата калия, приготовленный по 6.3.4, со скоростью 0,10 см/мин до установления постоянного давления;

- скорость потока постепенно увеличивают с шагом 0,1 см/мин, с установлением постоянного давления после каждого прибавления до 1,0 см/мин;

- перед первым измерением с помощью программного обеспечения, в соответствии с руководством пользователя выполняют операции в соответствии с таблицей Д.1.


Таблица Д.1 - Порядок вывода хроматографа на рабочий режим

N пп

Выполняемая операция

Время, мин

1

Промывка инжектора

6,5

2

Ввод образца с нулевым объемом или "холостая инжекция"*

15,0

3

Уравновешивание колонки

5,0

* В зависимости от конструктивных особенностей хроматографической системы выполняют ввод образца с нулевым объемом (программная функция) или "холостое инжектирование" - ввод 20 мм подвижной фазы по 6.3.4.

          

Выполнение данной операции осуществляют с использованием условий, указанных в таблице Д.2.


Таблица Д.2 - Профиль градиента при холостом определении

Время, мин

Скорость потока подачи элюента, см/мин

Состав подвижной фазы (элюента), массовая доля, %

Раствор дигидрофосфата калия

Ацетонитрил

0

1

96,0

4,0

2

80,0

20,0

7

80,0

20,0

9

96,0

4,0

15

96,0

4,0

Д.2 Выключение хроматографической системы проводят в соответствии с руководством по эксплуатации, при этом:

- скорость потока подвижной фазы снижают до 0,1 см/мин и затем подачу останавливают;

- насос промывают водой;

- колонку отмывают водой при скорости (0,5-1,0) см/мин в течение 30 мин и выключают прибор.