ГОСТ 32195-2013 (ISO 13903:2005) Корма, комбикорма. Метод определения содержания аминокислот (Переиздание)

     6 Приготовление растворов

6.1 Приготовление раствора натрия гидроокиси молярной концентрации 7,5 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см (см. 4.12) помещают 300,0 г гидроокиси натрия (см. 5.10), растворяют в воде (см. 5.1) и доводят объем раствора водой до метки.

6.2 Приготовление раствора натрия гидроокиси молярной концентрации 1 моль/дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см (см. 4.12) помещают 40,0 г гидроокиси натрия (см. 5.10), растворяют в воде (см. 5.1) и доводят объем раствора водой до метки.

6.3 Приготовление раствора муравьиной кислоты с фенолом

В колбе вместимостью 1000 см (см. 4.12) смешивают 889 г муравьиной кислоты (см. 5.3) и 111 см воды (см. 5.1), затем добавляют 4,73 г фенола (см. 5.11).

6.4 Приготовление смеси для гидролиза - раствора соляной кислоты молярной концентрации 6 моль/дм, содержащего 1 г фенола в 1 дм

В мерную колбу вместимостью 1000 см (см. 4.12) помещают 492 см соляной кислоты (см. 5.4), добавляют 1 г фенола (см. 5.1) и доводят объем раствора водой (см. 5.1) до метки.

6.5 Приготовление смеси для экстракции - раствора соляной кислоты молярной концентрации 0,1 моль/дм, содержащего 2% тиодигликоль

В мерную колбу вместимостью 1000 см (см. 4.12) помещают 8,2 см соляной кислоты (см. 5.4), добавляют примерно 900 см воды (см. 5.1), затем добавляют 20 см тиодигликоля (см. 5.5) и доводят объем раствора до метки водой.

Примечание - Не допускается смешивать непосредственно соляную кислоту и тиодигликоль.

6.6 Приготовление раствора 5-сульфосалициловой кислоты массовой долей 6%

В мерную колбу вместимостью 1000 см (см. 4.12) помещают 60 г 2-водной сульфосалициловой кислоты, растворяют в воде (см. 5.1) и доводят объем раствора до метки.

6.7 Приготовление смеси для окисления

В небольшом стакане смешивают 0,5 см перекиси водорода (см. 5.2) с 4,5 см раствора муравьиной кислоты с фенолом (см. 6.3). Выдерживают при температуре от 20°С до 30°С в течение 1 ч, чтобы получить надмуравьиную кислоту, затем охлаждают в ледяной бане в течение 15 мин. Смесь готовят перед добавлением к образцу.

Примечание - Следует избегать попадания на кожу и использовать защитную одежду.

6.8 Приготовление цитратного буфера - раствора молярной концентрации ионов натрия 0,2 моль/дм, 2,20 ед. рН

В стакан вместимостью 1000 см (см. 4.16) наливают примерно 800 см воды (см. 5.1) и растворяют в ней 19,61 г натрия лимоннокислого 5,5-водного (см. 5.13), 5 см тиодигликоля (см. 5.5), 1 г фенола (см. 5.11) и 16,50 см соляной кислоты (см. 5.4). Доводят кислотность раствора до 2,20 ед. рН, переливают раствор в мерную колбу вместимостью 1000 см (см. 4.12) и доводят объем раствора в колбе до метки водой.

6.9 Приготовление буфера для элюирования

Буфер готовят в соответствии с инструкцией к используемому анализатору (см. 4.9).

6.10 Приготовление нингидрин-реагента

Реактив готовят в соответствии с инструкцией к используемому анализатору (см. 4.9).

6.11 Приготовление стандартных растворов аминокислот

6.11.1 Все стандартные растворы хранят при температуре ниже 5°С.

6.11.2 Готовят основной стандартный раствор аминокислот в соляной кислоте молярной концентрации каждой аминокислоты 2,5 мкмоль/см.

Примечание - Допускается использовать готовые растворы.

6.11.3 Приготовление стандартного раствора цистеиновой кислоты и метионин сульфона молярной концентрации 1,25 мкмоль/см

В мерную колбу вместимостью 1000 см (см. 4.12) помещают 0,2115 г цистеиновой кислоты (см. 5.9.2) и 0,2265 г метионина сульфона (см. 5.9.3), растворяют в цитратном буфере (см. 6.8) и доводят буфером объем раствора в колбе до отметки. Этот раствор не используют, если основной стандартный раствор (см. 6.11.2) содержит цистеиновую кислоту и метионин сульфон.

Срок хранения раствора - не более одного года.