• Текст документа
  • Статус
  • Сканер копия
Действующий


ГОСТ Р 55488-2013


НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПРОПОЛИС

Метод определения полифенолов

Propolis. Method for the determination of polyphenols



ОКС 65.140

Дата введения 2015-01-01

     
     
Предисловие

1 РАЗРАБОТАН Обществом с ограниченной ответственностью Центр исследований и сертификации "Федерал" (ООО Центр "Федерал")

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 432 "Пчеловодство"

3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 июня 2013 г. N 368-ст

4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ


Правила применения настоящего стандарта установлены в ГОСТ Р 1.0-2012 (раздел 8). Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе "Национальные стандарты", а официальный текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (gost.ru).


ВНЕСЕНА поправка, опубликованная в ИУС N 5, 2015 год


Поправка внесена изготовителем базы данных


     1 Область применения


Настоящий стандарт распространяется на прополис и устанавливает метод определения суммарного содержания полифенольных соединений водно-спиртового экстракта прополиса модифицированным методом Фолина-Чокальтеу в пересчете на галловую кислоту.

Требования к контролируемому показателю установлены в ГОСТ 28886.

2 Нормативные ссылки


В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 83-79 Реактивы. Натрий углекислый. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 3309-84 Часы настольные и настенные балансовые механические. Общие технические условия

ГОСТ 4109-79 Реактивы. Бром. Технические условия

ГОСТ 6552-80 Реактивы. Кислота ортофосфорная. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 10931-74 Реактивы. Натрий молибденовокислый 2-водный. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия

ГОСТ 18289-78 Реактивы. Натрий вольфрамовокислый 2-водный. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 27752-88 Часы электронно-механические кварцевые настольные, настенные и часы-будильники. Общие технические условия

ГОСТ 28886-90 Прополис. Технические условия

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования


ГОСТ Р 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

(Поправка. ИУС N 5-2015).

ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 51652-2000 Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия

ГОСТ Р 52001-2002 Пчеловодство. Термины и определения

ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии по стандартизации в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана недатированная ссылка, то рекомендуется использовать действующую версию этого стандарта с учетом всех внесенных в данную версию изменений. Если заменен ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, то рекомендуется использовать версию этого стандарта с указанным выше годом утверждения (принятия). Если после утверждения настоящего стандарта в ссылочный стандарт, на который дана датированная ссылка, внесено изменение, затрагивающее положение, на которое дана ссылка, то это положение рекомендуется применять без учета данного изменения. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, рекомендуется применять в части, не затрагивающей эту ссылку.


3 Термины и определения


В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ Р 52001, ГОСТ Р ИСО 5725-1.

4 Требования безопасности проведения работ


При проведении измерений необходимо соблюдать требования пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019*, требования безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.
________________
* Вероятно, ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ Р 12.1.019-2009. - Примечание изготовителя базы данных.

5 Отбор пробы


Отбор пробы - по ГОСТ 28886.

6 Сущность метода


Метод основан на реакции окисления полифенольных соединений водно-спиртового экстракта прополиса реактивом Фолина-Чокальтеу и последующим фотометрированием образующейся "сини" при длине волны 765 нм. В качестве внутреннего стандарта используют галловую кислоту.

7 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

7.1 Спектрофотометр, снабженный светофильтром с максимумом пропускания при длине волны 800 нм и кюветами с четырьмя прозрачными стенками и длиной оптического пути 10 мм.

7.2 Весы по ГОСТ Р 53228 с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более ±0,1 мг.

7.3 Термостат, водяная баня или другое устройство, позволяющее производить равномерный нагрев до температуры 100 °С.

7.4 Электроплитка по ГОСТ 14919.

7.5 Часы механические настенные 2-го класса точности по ГОСТ 3309 или электронно-механические по ГОСТ 27752.

7.6 Холодильник ХШ-1-400-29/32 ХС по ГОСТ 25336.

7.7 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.8 Цилиндры мерные 1-50(500, 1000)-2 по ГОСТ 1770.

7.9 Колбы мерные 1(2)-100(500, 1000)-2(ПМ) по ГОСТ 1770.

7.10 Пипетки 1-2-1-1(2, 5, 10, 25) по ГОСТ 29227.

7.11 Колбы Кн 1(2)-100(750)-14/23(29/32), К-1(2)-1000-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

7.12 Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

7.13 Натрий вольфрамовокислый 2-водный по ГОСТ 18289, х.ч.

7.14 Натрий молибденовокислый 2-водный по ГОСТ 10931, х.ч.

7.15 Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч.

7.16 Бром по ГОСТ 4109, х.ч.

7.17 Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, х.ч.

7.18 Натрий углекислый по ГОСТ 83, х.ч.

7.19 Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ Р 51652, "люкс".

7.20 Галловая кислота, безводная, с содержанием основного вещества не менее 98%.

7.21 Склянка из темного стекла со шлифом.

7.22 Фолина-Чокальтеу фенольный реагент.

7.23 Литий сернокислый, х.ч.

Допускается использование других средств измерений, вспомогательного оборудования по метрологическим, техническим характеристикам не хуже указанных в настоящем стандарте.

Допускается использование других реактивов по качеству и чистоте не ниже вышеуказанных.

8 Подготовка к испытаниям

8.1 Приготовление водного раствора этилового спирта с массовой долей 70%

В цилиндр вместимостью 1000 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) по ГОСТ 1770 вносят 730 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) этилового спирта по ГОСТ Р 51652. Объем раствора доводят дистиллированной водой по ГОСТ 6709 до 1000 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой).

8.2 Приготовление водно-спиртового экстракта прополиса

В коническую колбу вместимостью 100 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) по ГОСТ 25336 вносят прополис массой (1,0±0,1) г и 30 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) водного раствора этилового спирта, приготовленного по 8.1. Выдерживают при комнатной температуре в течение 24 ч. Содержимое колбы сливают с осадка и фильтруют через бумажный складчатый фильтр по 7.12 в мерную колбу вместимостью 100 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) по ГОСТ 1770. Процедуру экстракции прополиса повторяют еще раз с таким же объемом водного раствора этилового спирта. Осадок промывают 10 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) водного раствора этилового спирта. Фильтрат доводят до метки водным раствором этилового спирта.

Водно-спиртовый экстракт прополиса хранят в темном месте при температуре не выше 25 °С.

8.3 Приготовление реактива Фолина-Чокальтеу

В круглодонной колбе вместимостью 1000 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) по ГОСТ 25336 растворяют натрий вольфрамовокислый по ГОСТ 18289 массой (50,00±0,01) г и натрий молибденовокислый по ГОСТ 10931 массой (12,25±0,01) г в 350 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) дистиллированной воды. Добавляют 25 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) ортофосфорной кислоты по ГОСТ 6552 и 50 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) концентрированной соляной кислоты по ГОСТ 3118. Колбу соединяют с обратным холодильником по ГОСТ 25336 и кипятят на водяной бане по 7.3 в течение 10 ч. Затем добавляют (75,00±0,01) г сернокислого лития по 7.23, 25 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) дистиллированной воды, перемешивают и добавляют 5 капель жидкого брома по ГОСТ 4109, перемешивают. Для удаления избытка брома кипятят 15 мин без холодильника и снова перемешивают. Охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через бумажный складчатый фильтр в мерную колбу вместимостью 500 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) и доводят до метки дистиллированной водой. Работу проводят под тягой!

Реактив хранят в склянке вместимостью 500 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) по 7.21 при температуре 4 °С не более 3 мес.

8.4 Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 20%

В конической колбе вместимостью 750 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) растворяют натрий углекислый безводный по ГОСТ 83 массой (100,00±0,01) г в 400 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) дистиллированной воды и доводят до кипения на электрической плитке по ГОСТ 14919. Охлаждают, фильтруют через бумажный складчатый фильтр в мерную колбу вместимостью 500 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) и доводят до метки дистиллированной водой.

8.5 Приготовление основного раствора галловой кислоты с массовой концентрацией 5 мг/смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)

В мерной колбе вместимостью 100 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) растворяют галловую кислоту по 7.20 массой (0,500±0,001) г в 10 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) этилового спирта. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают.

Основной раствор хранят при температуре 4 °С в течение 14 суток.

8.6 Приготовление рабочих растворов галловой кислоты

В пять мерных колб вместимостью 100 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) последовательно добавляют 1; 2; 3; 5; 10 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) основного раствора галловой кислоты, приготовленного по 8.5. Объем растворов в колбах доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают. Массовая концентрация галловой кислоты составляет 0,05; 0,1; 0,15; 0,25; 0,5 мг/смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), соответственно.

Рабочие растворы хранению не подлежат.

8.7 Построение градуировочного графика

В шесть мерных колб вместимостью 50 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) вносят по 1 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) рабочих растворов галловой кислоты, приготовленных по 8.6, и 10 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) дистиллированной воды, в каждую колбу добавляют 4 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) реактива Фолина-Чокальтеу по 7.22 или приготовленного по 8.3, 6 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) раствора натрия углекислого, приготовленного по 8.4, перемешивают и доводят до метки дистиллированной водой; в шестую колбу - контрольный раствор, добавляют 1 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) дистиллированной воды. Через 2 ч измеряют оптическую плотность растворов на спектрофотометре по 7.1 при длине волны 765 нм по отношению к контрольному раствору.

Выполняют два параллельных определения.

Для построения градуировочного графика берут среднеарифметическое значение результатов трех измерений оптической плотности каждого рабочего раствора галловой кислоты. Строят градуировочный график, откладывая на оси ординат значение массовой концентрации галловой кислоты, а на оси абсцисс - оптическую плотность.

Градуировочный график должен быть линейным.

Градуировочный график строят каждый раз перед проведением измерений.

9 Проведение испытаний

9.1 Условия измерений

Помещение лаборатории должно соответствовать санитарным правилам проектирования, оборудования, эксплуатации и содержания производственных и лабораторных помещений, предназначенных для проведения работ с веществами 1-го и 2-го классов опасности, органическими растворителями.

Аналитическая лаборатория должна быть оснащена вентиляционной системой согласно ГОСТ 12.4.021.

При выполнении измерений следует соблюдать следующие условия:

- температура окружающей среды

от 15 °С до 25 °С;

- относительная влажность воздуха при температуре 25 °С

не более 80%;

- атмосферное давление

730-760 мм рт.ст.

9.2 В мерную колбу вместимостью 50 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) вносят 1 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) водно-спиртового экстракта прополиса, объем раствора в колбе доводят до метки этиловым спиртом.

9.3 В мерную колбу вместимостью 50 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) вносят 1 смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) пробы, приготовленной по 9.2, и далее проводят испытания по 8.7.

10 Обработка и представление результатов испытаний

10.1 По градуировочному графику находят значение массовой концентрации галловой кислоты в растворе прополиса (ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)), мг/смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой).

10.2 Массовую концентрацию полифенолов ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), г/кг в прополисе в пересчете на галловую кислоту, вычисляют по формуле

ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), (1)


где ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) - массовая концентрация галловой кислоты, найденная по градуировочному графику, мг/смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой);

100 - объем разведения, смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой);

50 - объем разведения, смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой);

1 - масса пробы прополиса, г;

1 - аликвота пробы, смГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой);

1000 - коэффициент пересчета г в кг.

10.3 За результат испытаний принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений, полученных в условиях повторяемости, если абсолютное расхождение между параллельными определениями не превышает предела повторяемости ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) по ГОСТ Р ИСО 5725-6. Значение предела повторяемости ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) приведено в таблице 1.

Таблица 1

Диапазон измерений массовой концентрации
ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), г/кг

Предел повторяемости ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) при ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)0,95, г/кг

Критический диапазон при трех измерениях
ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), г/кг

Предел воспроизводи-
мости ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) при ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)0,95, г/кг

Границы абсолютной погрешности при ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)0,95
ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), г/кг

От 1,0 до 10,0 включ.

0,1ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)

0,12ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)

0,16ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)

0,25ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)


10.4 При превышении предела повторяемости ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) целесообразно провести дополнительное определение и получить еще один результат. Если при этом абсолютное расхождение (ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)) результатов трех определений не превышает значения критического диапазона ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), то в качестве окончательного результата принимают среднеарифметическое значение результатов трех определений. Значение критического диапазона ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) приведено в таблице 1.

При невыполнении этого условия проводят повторные испытания.

10.5 Абсолютное расхождение между результатами испытаний, полученными в двух лабораториях в условиях воспроизводимости, не должно превышать предела воспроизводимости ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) по ГОСТ Р ИСО 5725-6. При выполнении этого условия приемлемы оба результата испытания, и в качестве окончательного результата может быть использовано их среднеарифметическое значение. Значение предела воспроизводимости ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) приведено в таблице 1.

10.6 Результат испытаний, округленный до первого десятичного знака, в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой), г/кг, при ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)0,95,


где ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) - среднеарифметическое значение содержания полифенолов, г/кг;


ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) - границы абсолютной погрешности результатов определений, г/кг.

10.7 Границы абсолютной погрешности результатов испытаний, полученных согласно данному методу, при доверительной вероятности ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)0,95 ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой) г/кг.

_____________________________________________________________________

УДК 638.135:006.354 ОКС 65.140

Ключевые слова: прополис, полифенольные соединения, 70%-ный водно-спиртовыи экстракт прополиса, метрологические характеристики

_____________________________________________________________________




Электронный текст документа
подготовлен АО "Кодекс" и сверен по:
официальное издание
М.: Стандартинформ, 2014




Редакция документа с учетом
изменений и дополнений подготовлена
АО "Кодекс"

ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)

Название документа: ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)

Номер документа: 55488-2013

Вид документа: ГОСТ Р

Принявший орган: Росстандарт

Статус: Действующий

Опубликован: официальное издание

М.: Стандартинформ, 2014 год

Фактическая дата официального опубликования стандарта - май 2014 года (информация с сайта http://www.gost.ru/ по состоянию на 16.05.2014)

Дата принятия: 28 июня 2013

Дата начала действия: 01 января 2015
Дата редакции: 01 мая 2015
ГОСТ Р 55488-2013 Прополис. Метод определения полифенолов (с Поправкой)
Данный документ представлен в виде сканер копии, которую вы можете скачать в формате или
Информация о данном документе содержится в профессиональных справочных системах «Кодекс» и «Техэксперт»
Узнать больше о системах