ГОСТ Р 55329-2012 Картофель семенной. Приемка и методы анализа

     7 Методы определения скрытой вирусной и бактериальной инфекции семенного картофеля

7.1 Метод иммуноферментного анализа (ИФА)

7.1.1 Метод иммуноферментного анализа (ИФА) применяют для определения скрытой зараженности вирусами ХВК, SBK, МВК, YBK, ВСЛК по ГОСТ Р 53136 и бактериями (возбудителями черной ножки и кольцевой гнили картофеля) исходных клонов, отобранных в полевых условиях (базовые клоны), микрорастений, листовых проб с посадок первого полевого поколения и клубневых проб супер-суперэлитного семенного картофеля.

Послеуборочное тестирование клубней проводят в осенне-зимний период на растениях, выращенных из индексов (глазок клубня с прилегающей тканью), для тестирования вирусов. Тестирование бактерий проводят из сегментов, срезанных с верхушки пуповинной части клубня.

7.1.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, материалы, посуда и реактивы для ИФА

Фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность растворов в лунках плоскодонного планшета для ИФА при соответствующей длине волны.

Термостат суховоздушный (или твердотельный, термостат-термошейкер) для планшетов, поддерживающий температуру (37±1) °С.

Весы аналитические по ГОСТ 53228* с точностью до 0,001 г (±0,0005 г).

________________

* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: ГОСТ Р 53228-2008. - Примечание изготовителя базы данных.

Пипетки полуавтоматические одноканальные с переменной вместимостью со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,002-0,02 см, 0,05-0,2 см, 0,2-1,0 см.

Пипетки полуавтоматические многоканальные с переменной вместимостью со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объем жидкости 0,05-0,25 см.

Шейкер для планшетов.

Мешалка магнитная.

Посуда мерная вместимостью 1; 0,5; 0,35; 0,25; 0,1; 0,05; 0,01 дм по ГОСТ 1770.

Микропробирки полипропиленовые конические с крышкой вместимостью 1,5 см.

Центрифуга настольная для пробирок вместимостью 1,5 см, с ускорением до 10000 g.

Ступки фарфоровые вместимостью 25-50 см с пестиком.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Перчатки резиновые.

Диагностические ИФА-наборы для определения вирусных (ХВК, SBK, МВК, YBK, ВСЛК) и бактериальных (возбудителей черной ножки и кольцевой гнили) фитопатогенов картофеля с порогом чувствительности для вирусов - 10-50 нг/см, возбудителей бактериозов - 10-10 клеток/см.

Воронки стеклянные диаметром 10 см по ГОСТ 25336.

Холодильники с камерами комбинированные или отдельные, поддерживающими температуру от плюс 2 °С до 8 °С и не выше минус 16 °С (для хранения анализируемого материала).

Таймер с точностью измерений 1 мин.

7.1.3 Анализ проводят в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к диагностическим наборам ИФА. По результатам анализа оформляют протокол испытания.

7.2 Метод иммунохроматографического анализа (ИХА)

7.2.1 Метод иммунохроматографического анализа (ИХА) применяют для определения скрытой зараженности вирусными патогенами ХВК, SBK, МВК, YBK, ВСЛК клонов, отобранных в полевых условиях (базовые клоны), и при проверке в поле отдельных растений с недостаточно четким проявлением симптомов.

Экспресс-диагностику вирусных фитопатогенов картофеля с использованием метода ИХА проводят во внелабораторных условиях и непосредственно в поле.