• Текст документа
  • Статус
Действующий


MP 1.2.0025-11


МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ


1.2. ГИГИЕНА, ТОКСИКОЛОГИЯ, САНИТАРИЯ

Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo


Дата введения: с момента утверждения

1. РАЗРАБОТАНЫ ФГУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в г.Москве" (Н.В.Завьялов, Е.Л.Скворцова); ОАО Завод экологической техники и эко-питания "ДИОД", г.Москва (В.П.Тихонов, Т.В.Шевченко, И.А.Родина, Е.Ю.Белянкина, К.Л.Плигина); ООО "СП Минимакс", г.Санкт-Петербург (М.Б.Гирина).

2. УТВЕРЖДЕНЫ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко и введены в действие 28 июня 2011 г.

3. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.

1. Область применения

1.1. Методические рекомендации предназначены для токсикологических исследований и испытаний парфюмерно-косметической (ПК) продукции, средств гигиены полости рта, а также сырья для их производства, в т.ч. полученных с применением нанотехнологий или содержащих наноматериалы.

1.2. Методические рекомендации могут быть использованы для оценки раздражающего действия слизистой оболочки глаза вновь разрабатываемой и серийно выпускаемой продукции. Данный метод может применяться в качестве самостоятельного экспресс-метода или в сочетании с другими токсикологическими методами.

1.3. Методические рекомендации предназначены для специалистов органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы научно-исследовательскими организациями гигиенического профиля, медицинскими учебными заведениями и иными организациями, аккредитованными в установленном порядке.

2. Введение

В батарею токсикологических испытаний для оценки безопасности продукции входит исследование раздражающего действия на слизистую оболочку глаза. Для этой цели традиционно используется тест Драйза на лабораторных животных (Draize et al., 1944), являющийся одним из самых болезненных тестов. Возможной альтернативной заменой тесту Драйза является ХЕТ-КАМ-тест (НЕТ-САМ - hen's egg test at the chorio-allontoic membrane), в котором проводится визуальная оценка состояния сосудов хориоаллантоисной оболочки (ХАО) куриного эмбриона. Однако визуальная оценка не позволяет точно и объективно интерпретировать результаты исследования.

Дополнение стандартного ХЕТ-САМ теста методом высокочастотной допплерографии позволяет определять количественные характеристики изменения скорости кровотока в сосудах ХАО, которые отражают выраженность раздражающего действия.

Метод высокочастотной ультразвуковой допплерографии использует эффект изменения частоты сигнала отраженного движущегося объекта на величину, пропорциональную скорости движения отражателя, открытый в 1842 г. Допплером. При отсутствии движения исследуемой среды допплеровского сигнала не существует, т.к. ультразвуковая волна проходит сквозь ткани без отражения, что делает данный метод исследования движущихся структур наиболее объективным.

Данные методические рекомендации содержат порядок проведения оценки раздражающего действия с применением метода высокочастотной допплерографии на сосудах ХАО куриного эмбриона ex vivo. Преимуществом настоящего метода являются простота, высокая чувствительность, объективная цифровая оценка результатов, повышающая их достоверность, воспроизводимость, а также экономичность, быстрота получения результатов. Кроме того, система отвечает современным этическим требованиям, согласно которым следует ограничивать использование млекопитающих в эксперименте.

3. Принцип метода

Основой данного метода исследования является ХЕТ-КАМ тест, применяемый для оценки раздражающего действия веществ на сосудах ХАО куриного эмбриона. Во время проведения исследования раствор тестируемого вещества наносят на ХАО. При возникновении раздражающего действия происходит сужение кровеносных сосудов без остановки или с временной остановкой тока крови, тромбоз, кровоизлияния и т.п., что, в свою очередь, вызывает изменение скорости кровотока. Модификация ХЕТ-КАМ теста с использованием прибора "Минимакс-Допплер-К" позволяет провести количественную оценку скорости кровотока при возникновении раздражающего действия.

Ультразвуковой сигнал, отраженный от кровотока, поступает на приемный элемент датчика (частотой 25 МГц), далее этот сигнал усиливается, фильтруется и проходит в компьютерную часть прибора, где обрабатывается по специальной программе (Minimax Doppler v.1.7) и выдается на экран монитора в виде допплерограмм с цветным спектром. Также автоматически вычисляются количественные параметры скорости кровотока: линейная скорость кровотока МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo (см/с), объемная скорость кровотока МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo (мл/с), средневзвешенная скорость кровотока по кривой средней скорости МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo (см/с). Показатели скорости кровотока (МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo и МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo) коррелируют с линейной скоростью кровотока МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo. Таким образом, для изучения влияния исследуемых веществ достаточно оценки одного из параметров - линейной скорости кровотока (МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo).

Изменение линейной скорости кровотока является показателем выраженности местно раздражающего действия исследуемого вещества на сосуды ХАО.

4. Оборудование, материалы и реактивы

Допплерограф ультразвуковой компьютеризированный для исследования скорости кровотока ММ-Д-К "Минимакс-Допплер-К", оснащенный датчиком с частотой 25 МГц или с аналогичными характеристиками

Термостат лабораторный, позволяющий поддерживать температуру (38,0±0,5) °С

Подставка

Встряхиватель лабораторный типа Вортекс или с аналогичными характеристиками

ТУ 64-1-1081-73*

________________
* ТУ, упомянутые здесь и далее по тексту, являются авторской разработкой. За дополнительной информацией обратитесь по ссылке. - Примечание изготовителя базы данных.

Термометр лабораторный 0-55 °С

ГОСТ 8.279-78

Магнитная мешалка

ТУ 25-11-834-73

Весы аналитические (предел допустимой погрешности не более 0,01 мг)

ГОСТ 24104-2001*

_______________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ Р 53228-2008. - Примечание изготовителя базы данных.

Колбы, цилиндры стеклянные мерные

ГОСТ 1770-74

Микропробирки пропиленовые конические объемом 0,5 и 1,5 смМР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo с крышкой

Штатив для микропробирок вместимостью 0,5 и 1,5 смМР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo

Наконечники одноразовые для дозаторов переменного объема в штативах

Дозаторы автоматические переменного объема

ТУ 9452-002-33189998-2002

Часы сигнальные

ТУ 25-07-57

Пинцеты медицинские

ГОСТ 21241-89

Шпатели металлические

Доступ к полной версии этого документа ограничен

Ознакомиться с документом вы можете, заказав бесплатную демонстрацию систем «Кодекс» и «Техэксперт».

Что вы получите:

После завершения процесса оплаты вы получите доступ к полному тексту документа, возможность сохранить его в формате .pdf, а также копию документа на свой e-mail. На мобильный телефон придет подтверждение оплаты.

При возникновении проблем свяжитесь с нами по адресу uwt@kodeks.ru

МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo

Название документа: МР 1.2.0025-11 Оценка раздражающего действия методом ультразвуковой допплерографии на сосудах хориоаллантоисной оболочки куриного эмбриона ex vivo

Номер документа: 1.2.0025-11

Вид документа: МР (Методические рекомендации)

Принявший орган: Главный государственный санитарный врач РФ

Статус: Действующий

Опубликован: М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2011 год

официальное издание

Дата принятия: 28 июня 2011

Дата начала действия: 28 июня 2011
Информация о данном документе содержится в профессиональных справочных системах «Кодекс» и «Техэксперт»
Узнать больше о системах