Портал docs.cntd.ru скоро обновится, чтобы стать еще лучше и удобнее.
Попробовать новую версию
  • Текст документа
  • Статус
Оглавление
Поиск в тексте
Действующий


Р 4.2.2643-10

РУКОВОДСТВО

3.5. ДЕЗИНФЕКТОЛОГИЯ

МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИСПЫТАНИЙ ДЕЗИНФЕКЦИОННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ОЦЕНКИ ИХ ЭФФЕКТИВНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ



Дата введения 2010-06-02

1. РАЗРАБОТАНЫ Федеральным государственным учреждением науки "НИИ дезинфектологии" Роспотребнадзора и кафедрой дезинфектологии ММА им. И.М.Сеченова (М.Г.Шандала, Н.Ф.Соколова, Л.Г.Пантелеева, И.М.Абрамова, С.А.Рославцева, М.И.Шутова, Е.Н.Богданова, А.И.Фролова, А.Н.Сукиасян, В.М.Лубошникова, Э.А.Новикова, Л.С.Федорова, И.М.Цвирова, Н.Н.Левчук, А.С.Белова, Л.И.Анисимова, Л.И.Колычева, Г.Н.Мельникова, В.В.Дьяков, М.Н.Костина, Н.И.Шашина, О.Ю.Еремина, Е.И.Баканова, Л.С.Путинцева, Н.А.Хрусталева, Ю.В.Лопатина, В.В.Олифер, М.А.Алексеев, О.М.Германт, И.В.Ибрагимхалилова, С.В.Рябов, М.М.Мальцева, Г.Н.Заева, Г.П.Панкратова, Т.З.Рысина, Р.П.Родионова, А.П.Степнов, О.И.Березовский); Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Л.С.Бойко, О.В.Романченко); ФГУН 48 НИИМ МО РФ - Центром военно-технических проблем биологической защиты (В.В.Канищев); Научно-исследовательским центром бытовой химии (Т.А.Перегуда), ООО "Суперсан-МК" (М.В.Кунашев); Институтом медицинской паразитологии тропической медицины им. Е.И.Марциновского ММА им. И.М.Сеченова (В.П.Сергиев, Л.А.Ганнушкина); кафедрой тропической медицины и паразитарных болезней МПФ ППО ММА им. И.М.Сеченова (Е.А.Черникова); ГУ НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН (Д.К.Львов, Н.Н.Носик, П.Г.Дерябин); ГУ институтом полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова РАМН (М.И.Михайлов, Н.А.Замятина, К.К.Кюрегян, Р.М.Элбакян).

2. РЕКОМЕНДОВАНЫ К УТВЕРЖДЕНИЮ Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 24 декабря 2009 г. N 4).

3. УТВЕРЖДЕНЫ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Г.Г.Онищенко 1 июня 2010 г.

4. ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ со 2 июня 2010 г.

5. ВВЕДЕНЫ ВЗАМЕН "Методических рекомендаций по определению вирулицидной активности препаратов" (от 6.09.1973 N 1119-73), "Инструкции по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств" (от 6 мая 1968 г. N 739-68), Методических указаний "Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности", 1998 г.

1. Область применения


1.1. Настоящее руководство (далее - руководство) устанавливает единые методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их антимикробной, инсектицидной, акарицидной, репеллентной и родентицидной активности, эффективности и безопасности при применении в быту, в лечебно-профилактических организациях и на других объектах для обеспечения безопасности жизни и здоровья людей, животных и неповреждения объектов внешней среды.

1.2. Настоящее руководство предназначено для организаций, учреждений, предприятий, аккредитованных испытательных центров лабораторий, органов по сертификации дезинфекционных средств, аккредитованных в системе аккредитации ГОСТ Р, специалистов, осуществляющих исследования дезинфицирующих, стерилизующих, дезинсекционных, дератизационных средств, а также их субстанций (действующих веществ) в процессе их разработки, производства, применения, регистрационных и сертификационных испытаний, производственного контроля и надзора [4, 5].

1.3. Руководство разработано на основе Федерального закона от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" [1], Федерального закона от 10.01.2002 N 23001 "Об охране окружающей среды"* [2], Федерального закона "Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан" от 22.06.1993 N 5487-1** [3], Постановления Правительства от 04.04.2001 N 262 "О государственной регистрации отдельных видов продукции, представляющих потенциальную опасность для человека, а также отдельных видов продукции, впервые ввозимых на территорию Российской Федерации" [7], а также "Положения о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании", утвержденного постановлением Правительства Российской Федерации от 24 июля 2000 г. N 554 [6], и других нормативных и методических показателей, приведенных в разделе 2 "Нормативные ссылки".
______________
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: Федеральный закон от 10.01.2002 N 7-ФЗ "Об охране окружающей среды", здесь и далее по тексту;
** На территории Российской Федерации документ не действует. Действует Федеральный закон от 21.11.2011 N 323-ФЗ "Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации", здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.

2. Нормативные ссылки


1. Федеральный закон от 30.03.1999 г. N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" (Собрание законодательства Российской Федерации, 1999, 314, ст.1650; 2002, N 1 ч.1, ст.2; 2003, N 2, ст.167; N 27 (ч.1), ст.2007; 2004, N 35, ст.3607; 2005, N 19, ст.1752; 2006, N 1, ст.10; 2007, N 1, ст.29; N 27, ст.3213; N 46, ст.5554; N 49, ст.6070).

2. Федеральный закон от 10.01.2002 N 23001 "Об охране окружающей среды"*.
______________
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: Федеральный закон от 10.01.2002 N 7-ФЗ "Об охране окружающей среды". - Примечание изготовителя базы данных.

3. "Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан" от 22 июня 1993 г. N 5487-1* (с изменениями от 2 марта 1998 г., 20 декабря 1999 г., 2 декабря 2000 г., 10 января, 27 февраля, 30 июня 2003 г., 29 июня, 22 августа, 1, 29 декабря 2004 г., 7 марта, 21, 31 декабря 2005 г., 2 февраля 2006 г.).

4. Федеральный закон от 16.09.1998 N 158-ФЗ "О лицензировании отдельных видов деятельности"*.
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует Федеральный закон от 04.05.2011 N 99-ФЗ "О лицензировании отдельных видов деятельности". - Примечание изготовителя базы данных.

5. Федеральный закон от 10.06.1993 N 5151-1 "О сертификации продукции и услуг"*.
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует Федеральный закон от 27.12.2002 N 184-ФЗ "О техническом регулировании". - Примечание изготовителя базы данных.

6. "Положение о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании", утвержденное постановлением Правительства Российской Федерации от 24 июля 2000 г. N 554 (Собрание законодательства Российской Федерации, 2000, N 31, ст.3295).

7. Постановление Правительства от 04.04.2001 N 262 "О государственной регистрации отдельных видов продукции, представляющих потенциальную опасность для человека, а также отдельных видов продукции, впервые ввозимых на территорию Российской Федерации".

8. Приказ Минздрава СССР от 30.12.1983 N 1509 "О дальнейших мерах по совершенствованию порядка оформления разрешения к медицинскому применению и передачи для промышленного производства новых лекарственных средств".

9. Приказ Минздрава России от 20.07.1998 N 217 "О гигиенической оценке производства, поставки и реализации продукции и товаров"*.
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.

10. Приказ Минздрава России от 10.11.2002 N 344 "О государственной регистрации дезинфицирующих, дезинсекционных и дератизационных средств для применения в быту, в лечебно-профилактических учреждениях и на других объектах для обеспечения безопасности и здоровья людей".

11. Постановление Госстандарта России от 30.07.2002 N 64 "Номенклатура продукции, в отношении которой законодательными актами Российской Федерации предусмотрена обязательная сертификация"*.
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует Постановление Правительства Российской Федерации от 1 декабря 2009 года N 982 "Об утверждении единого перечня продукции, подлежащей обязательной сертификации, и единого перечня продукции, подтверждение соответствия которой осуществляется в форме принятия декларации о соответствия" , здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.

12. СП 3.1/3.2.558-96* "Общие требования по профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний".
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действуют СП 3.1/3.2.1379-03. - Примечание изготовителя базы данных.

13. СП 3.5.3.1129-02 "Санитарно-эпидемиологические требования к проведению дератизации".

14. СП 3.5.1378-03 "Санитарно-эпидемиологические требования к организации и осуществлению дезинфекционной деятельности".

15. СП 1.3.1285-03 "Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)".

16. СП 3.1.1275-03 "Профилактика инфекционных заболеваний при эндоскопических манипуляциях".

17. СП 1.3.2322-08 "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней" с дополнениями и изменениями (СП 1.3.2518-09).

18. СанПиН 1.2.681-97 "Гигиенические требования к производству и безопасности парфюмерно-косметической продукции".

19. СанПиН 2.1.7.728-99* "Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений".
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действуют СанПиН 2.1.7.2790-10. - Примечание изготовителя базы данных.

20. СанПиН 2.1.4.1175-02 "Гигиенические требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Санитарная охрана источников".

21. Нормативные показатели безопасности и эффективности дезинфекционных средств, подлежащих контролю при проведении обязательной сертификации. 1998 г., N 01-12/75-97.

22. СанПиН 2.1.2.1188-03 "Плавательные бассейны. Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды. Контроль качества".

23. Нормативные показатели эффективности и безопасности дезинфекционных средств, утвержденные 08.03.2004.

24. ГОСТ 12.1.007-76 "ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности".

25. ГОСТ 22567.8-77 "Средства моющие синтетические. Методы определения силиката натрия".

26. ГОСТ 8728-77* "Диметилфталат. Технические условия".
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ 8728-88. - Примечание изготовителя базы данных.

27. ГОСТ 13081-77 "Фосфид цинка. Технические условия".

28. ГОСТ 27283-87 "Средства индивидуальные химические для обеззараживания воды от бактериологических средств".

29. ГОСТ 177-88 "Водорода перекись. Технические условия".

30. ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны".

31. ГОСТ 29188.0-91 "Изделия парфюмерно-косметические. Правила приемки, отбор проб, методы органолептических исследований".

32. ГОСТ 29188.6-91 "Изделия парфюмерно-косметические. Газохроматографический метод определения этилового спирта".

33. ГОСТ Р 50550-93 "Товары бытовой химии. Метод определения показателя активности водородных ионов рН".

34. ГОСТ 22567.5-93 "Средства моющие синтетические и вещества поверхностно-активные. Методы определения концентрации водородных ионов рН".

35. ГОСТ Р 50551-93 "Товары бытовой химии. Метод определения активного хлора".

36. ГОСТ 18995.1-73 "Продукты химические жидкие. Методы определения плотности".

37. ГОСТ 18995.2-73 "Продукты химические жидкие. Методы определения показателя преломления".

38. ГОСТ 18995.4-73 "Продукты химические органические. Методы определения интервала температуры плавления".

39. ГОСТ Р 51022-97 "Методы определения анионного поверхностно-активного вещества".

40. ГОСТ Р 51018-97 "Методы определения неионогенного поверхностно-активного вещества".

41. Ратиндан. Фармакопейная статья ФС 42-330-79.

42. Определение температуры плавления. Государственная фармакопея СССР. XI изд., вып.1. С.16.

43. Определение плотности. Государственная фармакопея СССР. XI изд. вып.1. С.24.

44. Определение показателя преломления рефрактометрии. Государственная фармакопея СССР. XI изд., вып.1. С.29.

45. Определение вязкости жидкостей. Государственная фармакопея СССР. XI изд., вып.1. С.87.

46. Определение рН. Государственная фармакопея СССР. XI изд., вып.1. С.113.

47. ОСТ 42-21-2-85 "Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского назначения. Методы, средства, режимы". М., 1985 г.

48. Стандарт Европейского Комитета по стандартизации NEN-EN 14476.

49. Государственная фармакопея СССР. XI изд., вып.1. С.183-186.

50. ГОСТ Р 51021-97 "Методы определения смываемости с посуды".

51. Инструкция по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств*. Утв. МЗ СССР 06 мая 1968 г., N 739-68.
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует настоящее руководство. - Примечание изготовителя базы данных.

52. Методические указания по оценке дезинфицирующих средств, предназначенных для обеззараживания различных объектов и санитарной обработки людей. Утв. МЗ СССР 20 августа 1970 г., N 859-70.

53. Методические указания по определению эффективности препаратов для борьбы с молью. Утв. МЗ СССР 12.06.1977.

54. Методические указания по гигиенической оценке одежды и обуви из полимерных материалов. М., 1977. 47 с.

55. Методические указания по изучению токсичности препаратов санитарно-гигиенического и бытового назначения в аэрозольных баллонах. М., 1980 г.

56. МУ 2163-80 "Методические указания к постановке исследований для обоснования санитарных стандартов вредных веществ в воздухе рабочей зоны". М., 1980.

57. Методические указания по первичному отбору новых акарицидов и сравнительному изучению их активности против сарко-подобных клещей от 23.07.1982. Утв. ВАСХНИЛ.

58. Методические указания по определению устойчивости культур микроорганизмов, контаминирующих изделия медицинского назначения в условиях производства и эксплуатации, к стерилизующим агентам. Утв. МЗ СССР 29 марта 1985 г., N 28-6/7.

59. Методические указания "Токсикологическая оценка педикулицидов" от 20.06.1985 N 26-6/6.

60. Временные методические указания по обоснованию предельно допустимых концентраций ПДК загрязняющих веществ в атмосферном воздухе населенных мест от 15.06.1988, N 4681-88.

61. Методические указания по использованию культуры диплоидных клеток человека, рекомендуемых для токсиколого-гигиенических исследований. Утв. МЗ СССР 18.09.1991. 20 с.

62. Методические указания по оценке активности хемостерилянтов и регуляторов развития насекомых. МУ N 01-19/06-11 от 03.02.1995.

63. Гигиеническая оценка условий труда при применении пестицидов. Методические указания от 20.11.1995, N 01-19/140-17.

64. Методические указания по лабораторной оценке воздействия соединений на синантропных тараканов. Утв. ГКСЭН РФ от 09.02.1995 N 01-19/17-11.

65. МУ 1.1.578-96 "Требования к постановке экспериментальных исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздухе рабочей зоны и атмосферы". М., 1997.

66. Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности*. Утв. МЗ РФ, 1998.
_________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует настоящее руководство. - Примечание изготовителя базы данных.

67. МУ 3.1.1027-01 "Сбор, учет и подготовка к лабораторному исследованию кровососущих членистоногих - переносчиков возбудителей природно-очаговых инфекций".

68. Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения. МУ N 287-113 от 30.12.1998.

69. МУ 1.2.1105-02 "Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств". Утв. МЗ России, 10.02.2002.

70. Методические указания по лабораторной оценке антимикробной активности текстильных материалов, содержащих антимикробные препараты. МУ от 18.11.1983 N 28-6/32.

71. МУ 3.1.1029-01 "Отлов, учет и прогноз численности мелких млекопитающих и птиц в природных очагах инфекций". М., 2002.

72. МУ 3.5.2.1759-03 "Методы определения эффективности инсектицидов, акарицидов, регуляторов развития и репеллентов, используемых в медицинской дезинсекции".

73. МУ 3.5.1937-04 "Очистка, дезинфекция и стерилизация эндоскопов и инструментов к ним".

74. МУ 3.5.2435-09 "Методы изучения и оценки спороцидной активности дезинфицирующих и стерилизующих средств".

75. МУ 3.5.2431-08 "Методические указания по изучению и оценке вирулицидной активности дезинфицирующих средств".

76. Сборник руководящих методических материалов по токсиколого-гигиеническим исследованиям полимерных материалов и изделий на их основе медицинского назначения. Утв. МЗ СССР, 1987 г. С.85.

77. Методические указания "Оценка воздействия вредных химических соединений на кожные покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнения кожи" от 01.11.1979 N 2102-79.

78. ГОСТ 9.055-75 "Ткани шерстяные. Методы лабораторных испытаний на устойчивость к повреждению молью". М., 1975.

79. Приказ Минздрава СССР от 06.04.1973 "Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник вивариев".

80. Приказ Минздрава СССР от 10.10.1983 "Об утверждении нормативов затрат кормов для лабораторных животных в учреждениях здравоохранения СССР".

81. МУК 4.2.1018-01 "Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды". М.: Минздрав России, 2001.

82. СП 3.1.3.2.52-08* "Профилактика клещевого вирусного энцефалита".
______________
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: СП 3.1.3.2352-08. - Примечание изготовителя базы данных.

83. Методические рекомендации по отбору и изучению биологической активности и токсичности репеллентов. М., 1987.

84. Р 1.1.003-96 "Общие требования к построению, изложению и оформлению нормативных и методических документов системы государственного санитарно-эпидемиологического нормирования".

85. Методические указания по определению зоокумарина в тканях и крови животных, в приманках и препарате пенокумарин хооматографическими и спектрофотометрическими методами N 1550-76.

3. Общие положения


Одними из важнейших элементов санитарно-эпидемиологического благополучия населения страны, составляющими ее национальную безопасность, являются организация и неуклонное проведение комплексных мер по неспецифической профилактике и борьбе с возникновением и распространением случаев инфекционных, в т.ч. внутрибольничных, инфекций, а также паразитарных болезней с помощью дезинфектологических средств прерывания путей передачи возбудителей инфекций через объекты внешней среды.

В комплексы профилактических и противоэпидемических мер по борьбе с упомянутыми инфекциями входят дезинфектологические технологии, включающие дезинфицирующие, стерилизующие, дезинсекционные и дератизационные средства.

Дезинфектологические средства обеспечивают гибель, устранение или инактивацию на/в объектах внешней среды возбудителей болезней и их переносчиков (членистоногих и грызунов), т.е. являются биоцидными агентами и поэтому могут являться потенциально опасными также для людей, животных, обрабатываемых объектов и окружающей среды.

Безопасность для людей в связи с проведением дезинфекционных мероприятий требует, прежде всего, обеспечения высокой эффективности соответствующей целевой технологии. Именно этим может и должно быть гарантировано предупреждение возможного неблагоприятного побочного эффекта - токсического воздействия самих дезинфекционных средств на людей и животных, повреждения обрабатываемых объектов и загрязнения окружающей среды.

В настоящее время при разработке, производстве, проведении регистрационных и сертификационных испытаний разрешается применение, хранение дезинфекционных средств, использование максимально безопасных химико-аналитических, микробиологических, энтомологических, родентологических методов, регламентированных официальными обязательными нормативно-методическими документами.

Унификация методов исследований и критериев оценки эффективности и безопасности дезинфицирующих, стерилизующих, инсектицидных, акарицидных, родентицидных, репеллентных средств необходима для обеспечения единства требований и сравнимости результатов оценки дезинфекционных средств различного состава, данных экспертизы при их государственной регистрации, сертификации средств разных производителей, а также при контроле качества дезинфекционных средств в системе Роспотребнадзора Российской Федерации.

На основе анализа, обобщения и унификации отечественных методов исследований и критериев оценки эффективности и безопасности дезинфекционных и стерилизационных средств, а также гармонизации их с зарубежными стандартами подготовлено руководство "Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности".

Данное руководство оформлено в соответствии с требованиями руководства "Общие требования к построению, изложению и оформлению нормативных и методических документов системы государственного санитарно-эпидемиологического нормирования" Р 1.1.1001. - Р 1.1.1005.* 1996 г. [84] и на основе принятого в нашей стране порядка изучения дезинфекционных средств в целях государственной регистрации и сертификации. Оно состоит из восьми разделов:
______________
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать: Р 1.1.001-Р 1.1.005. - Примечание изготовителя базы данных.

1. Область применения.

2. Нормативные ссылки.

3. Общие положения.

4. Химико-аналитические методы исследований дезинфекционных средств.

5. Микробиологические методы исследований и критерии оценки эффективности дезинфицирующих и стерилизующих средств.

6. Энтомологические методы исследований и критерии оценки эффективности дезинсекционных средств.

7. Родентологические методы исследований и критерии оценки эффективности дератизационных средств.

8. Методы исследований и критерии оценки токсичности и безопасности дезинфекционных средств.

4. Химико-аналитические методы исследований дезинфекционных средств

4.1. Общие положения


Химические исследования являются важнейшей составляющей исследований и испытаний при создании, государственной регистрации, производстве, применении и сертификации дезинфекционных средств.

При создании дезинфекционных средств химические исследования включают:

- синтез действующего вещества;

- разработку рецептуры средства;

- разработку методов анализа действующих веществ и средств;

- установление срока годности действующих веществ и средств.

При государственной регистрации дезинфекционных средств проводят химико-аналитические исследования с целью:

- установления соответствия представляемых на регистрацию образцов дезинфекционных средств требованиям нормативной документации;

- определения количеств средства в воздухе и на обрабатываемых изделиях (санитарно-химические исследования) в случае использования в средствах летучих и плохо смываемых компонентов, представляющих потенциальную опасность при их использовании.

При производстве и применении дезинфекционных средств осуществляют контроль их качества согласно требованиям нормативной документации с использованием методов химико-аналитических исследований. При использовании дезинфицирующих средств в пищевой промышленности для обработки оборудования, кроме контроля качества самих дезинфицирующих средств, химическими методами контролируют также рабочие растворы средств и смывные воды с обрабатываемого оборудования.

При сертификационных испытаниях дезинфекционных средств химико-аналитические испытания являются основным способом подтверждения соответствия выпускаемого средства требованиям нормативной документации, т. е. соответствия выпускаемого средства зарегистрированному.

Дезинфекционные средства представляют собой составы в различных агрегатных состояниях: жидком, твердом и газообразном, а также в виде разных форм применения.

В состав дезинфекционных средств входят действующие вещества из разных классов химических соединений. Часто эти средства наряду с действующими веществами содержат функциональные добавки (моющие компоненты, синергисты, антикоррозионные добавки, растворители, регуляторы рН, красители, отдушки и пр.), придающие им дополнительные полезные свойства.

Поэтому для оценки качества дезинфекционных средств, помимо обязательного количественного определения действующих веществ, необходимо оценивать также косвенные интегральные физико-химические показатели качества, характеризующие многокомпонентные дезинфекционные средства в целом. Особенно характерно и обоснованно определение физико-химических показателей для дезинфицирующих средств. Эти показатели в совокупности в определенном приближении могут служить для дополнительной идентификации каждого конкретного дезинфицирующего средства.

Порядок определения показателей качества дезинфекционных средств следующий: сначала оценивают физико-химические показатели и только после полного соответствия этих показателей требованиям нормативной документации переходят к количественному анализу действующих веществ.

Такой порядок проведения химико-аналитических исследований дезинфекционных средств обусловлен тем, что при нем осуществляется переход от менее сложных и трудоемких в исполнении измерений, каковыми является определение физико-химических параметров, к более сложным процедурам количественного определения действующих веществ. Это позволяет обнаружить несоответствие средства требованиям нормативной документации уже на этапе измерений физико-химических параметров без проведения длительных исследований по количественному определению действующих веществ.

Контроль качества дезинфекционных средств химическими методами проводится с целью оценки соответствия средства требованиям нормативной документации и, следовательно, рецептуре средства. Вследствие этого, учитывая важную контролирующую функцию химических испытаний дезинфекционных средств, необходимо иметь методическую базу, позволяющую получать достоверные результаты при их аналитических исследованиях.

4.1.1. Методы определения физико-химических показателей дезинфекционных средств

К числу определяемых общих для всех средств показателей относятся внешний вид, включающий агрегатное состояние и цвет, а также запах. Эти показатели определяют органолептически.

Кроме того, для характеристики жидких дезинфекционных средств используют такие физико-химические показатели, как водородный показатель, называемый также показателем активности, или показателем концентрации водородных ионов рН самого средства или его водных растворов; плотность при 20 °С; показатель преломления при 20 °С; относительную или удельную вязкость. Для порошкообразных индивидуальных веществ (субстанций) определяют температуру плавления и рН их водных растворов. Таблетированные формы дезинфицирующих средств испытывают на распадаемость и/или растворимость.

При этом если указанные выше показатели качества (кроме водородного показателя) являются всего лишь интегральными характеристиками многокомпонентных рецептур, величина водородного показателя рН очень существенна для характеристики дезинфекционных средств, т.к. активность некоторых действующих веществ в значительной мере зависит от величины этого показателя. В то же самое время следует иметь в виду, что величиной рН не следует характеризовать средства с высоким содержанием органических растворителей, в частности, для рецептур с высоким содержанием спиртов величина рН является условной и ее не измеряют.

В связи с вышеизложенным перечень тестируемых физико-химических параметров определяется конкретно для каждого средства с учетом его агрегатного состояния и состава.

Органолептическую оценку, включающую визуальное определение внешнего вида и определение запаха обонянием, можно проводить в соответствии с ГОСТ 27025-86* [31]. В случае избрания других условий оценки внешнего вида и запаха, эти условия (посуда и освещение - при определении внешнего вида и особые условия определения запаха) должны быть указаны в нормативной документации.
_______________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.


Распадаемость и растворимость таблетированных форм дезинфицирующих средств определяют по времени распадения и растворения их в определенном объеме воды. Условия определения указанных показателей обычно устанавливают разработчики средств, при этом желательно, чтобы они были приближены к условиям применения этих средств.

Измерение физико-химических параметров - водородного показателя, плотности, показателя преломления, относительной или удельной вязкости, температуры плавления - проводят в соответствии с действующими ГОСТами на методы определений и Государственной фармакопеей СССР XI издания. В частности, водородный показатель определяют потенциометрически [33, 34, 46], плотность при 200С* измеряют с помощью ареометра или пикнометра [36, 43], показатель преломления при 200С* - рефрактометрически [37, 42], температуру плавления - термометрически [42, 44], вязкость - вискозиметрически [45].
_______________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

4.1.2. Методы количественного определения действующих веществ в дезинфекционных средствах

Без контроля качества выпускаемой продукции - приемосдаточных и сертификационных испытаний на соответствие нормативной документации - не может быть использовано ни одно дезинфекционное средство. При этом обязательным условием оценки качества дезинфекционных средств является количественное определение действующих веществ, обусловливающих их активность и токсичность.

Вследствие этого нормативная документация на дезинфекционные средства (технические условия на отечественную и спецификации на зарубежную продукцию) должна в обязательном порядке включать нормы на содержание действующих веществ. Кроме того, представляемые зарубежными фирмами спецификации должны сопровождаться описаниями методик анализа действующих веществ.

Поскольку в качестве действующих веществ в дезинфекционных средствах применяются вещества из разных классов химических соединений, для количественного определения действующих веществ используются разнообразные методы химического анализа: гравиметрические, титриметрические, фотоколориметрические, спектрофотометрические, методы газовой - газо-адсорбционной и газо-жидкостной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии и др.

Методы и конкретные методики, которые могут быть использованы для количественного определения действующих веществ в средствах указанного назначения, многочисленны. Все они разные и потому не всегда поддаются унификации. В связи с этим ниже приводим систематизированный и обобщенный материал по методам анализа действующих веществ из различных классов химических соединений с описанием некоторых методик, наиболее применяемых для анализа дезинфекционных средств. Приведенные методики могут оказаться неприменимыми для многокомпонентных рецептур, содержащих неиндифферентные к конкретным методам ингредиенты. В таких случаях следует путем химических исследований выяснить причины искажающего действия компонентов на результаты анализов и устранить их в рамках существующих методик или разработать новые методы анализа.

Для анализа действующих веществ в дезинфекционных средствах могут быть использованы также другие, не приведенные ниже методики анализа, обеспечивающие достаточную точность, воспроизводимость и сходимость результатов.

В нижеследующих главах приведено описание методов анализа действующих веществ в дезинфицирующих, стерилизующих средствах, средствах для предстерилизационной очистки, дезинсекционных (инсектицидных, акарицидных, инсектоакарицидных и репеллентных) и дератизационных средствах.

Приводимые ниже методы - это наиболее часто применяемые для контроля качества дезинфекционных средств методы анализа, описанные в химико-аналитических разделах инструкций по их применению.

4.2. Методы количественного определения действующих веществ в дезинфицирующих, стерилизующих средствах и средствах для предстерилизационной очистки


В дезинфицирующих и стерилизующих средствах действующими веществами в основном являются:

- галоидактивные (хлор-, бром- и йодактивные соединения);

- кислородактивные соединения (перекись водорода, ее комплексы с солями, надуксусная кислота, озон);

- альдегиды (глутаровый альдегид, глиоксаль, формальдегид, янтарный альдегид, ортофталевый альдегид);

- четвертичные аммониевые соли (алкилдиметилбензиламмоний хлорид, дидецилдиметиламмоний хлорид и т.п. из ряда катионных ПАВ);

- производные гуанидина (соли полигексаметиленгуанидина, полигексаметиленбигуанидина и хлоргексидин биглюконат);

- третичный алкиламин - N,N-бис3-аминопропилдодециламин;

- низшие жирные спирты (этиловый, изопропиловый и н-пропиловый);

- фенольные соединения [2-бифенилол, 2-бензил-4-хлорфенол, 5-хлор-2-гидроксидифенилметан, 5-хлор-2-(2,4-дихлорфенокси)фенол] и др.;

- кислоты органические и неорганические;

- щелочи;

- метасиликат натрия и др.

В состав средств для предстерилизационной очистки входят моющие компоненты, содержание которых в ряде случаев также контролируется. Это вещества из класса анионных, неионогенных и катионных ПАВ, щелочи, соли щелочных металлов (в частности, метасиликат натрия), ферменты и др.

Для количественного определения действующих веществ, входящих в состав дезинфицирующих, стерилизующих средств и средств для предстерилизационной очистки, в настоящее время наиболее часто применяют описанные ниже методы анализа.

4.2.1. Методы определения галоидактивных соединений хлорактивных, бромактивных и йодактивных

Анализ галоидактивных соединений (хлорактивных, бромактивных и йодактивных) основан на определении активных галоидов (активного хлора, активного брома и активного йода соответственно).

Из этого класса в качестве действующих веществ дезинфицирующих средств в основном используют хлорактивные и йодактивные соединения.

Определение хлорактивных соединений. Анализ хлорактивных соединений проводят с количественным определением активного хлора методом йодометрического титрования.

Сущность метода заключается в титровании серноватистокислым натрием (тиосульфатом натрия) свободного йода, выделяющегося при взаимодействии содержащих активный хлор соединений с йодистоводородной кислотой, образующейся из йодистого калия в кислой среде [35].

Выполнение анализа. К навеске средства или аликвоте раствора навески средства, содержащим около 35 мг активного хлора, прибавляют 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 10%-го раствора йодистого калия, 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 10%-го раствора серной кислоты, перемешивая после добавления каждого реактива, закрывают колбу пробкой и выдерживают в темном месте 3 мин.

Выделившийся йод титруют 0,1 н раствором тиосульфата натрия до светло-желтой окраски, прибавляют 1-2 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,5%-го раствора крахмала и продолжают титровать до исчезновения синей окраски раствора.

Обработка результатов. Массовую долю активного хлора Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,003545 - масса активного хлора, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.


Определение бромактивных соединений. Анализ бромактивных соединений проводят с количественным определением активного брома методом йодометрического титрования.

Выполнение анализа. По описанной для хлорактивных соединений методике анализируют навеску или аликвоту раствора навески, содержащие около 80 мг активного брома.

Обработка результатов. Массовую долю активного брома Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,00799 - масса активного брома, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

Определение йодактивных соединений. Для анализа йодактивных соединений также используют метод йодометрического титрования. Сущность метода заключается в титровании активного йода раствором тиосульфата натрия.

Выполнение анализа. Навеску средства, содержащую около 130 мг активного йода, вносят в титровальную колбу и доводят объем дистиллированной водой до 30 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности. Полученный раствор йодофора титруют 0,1 н раствором тиосульфата натрия в присутствии индикатора - 2 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,5%-го раствора крахмала), добавляемого при переходе окраски в светло-желтый цвет. Иногда титрование йодактивных соединений ведут в отсутствии крахмала до обесцвечивания раствора.

Обработка результатов. Массовую долю активного йода Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;


0,01269 - масса активного йода, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

4.2.2. Методы определения перекисных соединений (перекиси водорода, ее комплексов с солями, надуксусной кислоты и озона)

Определение активного кислорода. Часто перекисные соединения анализируются на содержание активного кислорода.

Для количественного определения активного кислорода используют метод йодометрического титрования [35].

Сущность метода заключается в титровании раствором тиосульфата натрия свободного йода, выделяющегося при взаимодействии содержащих активный кислород соединений с йодистоводородной кислотой, образующейся из йодистого калия в кислой среде.

Выполнение анализа. Навеску средства, содержащую около 8 мг активного кислорода, титруют в условиях, описанных в п.2.1, для йодометрического титрования хлорактивных соединений [35].

Обработка результатов. Массовую долю активного кислорода Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,0008 - масса активного кислорода, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

Методы определения перекиси водорода. Для анализа перекиси водорода могут быть использованы следующие объемные методы - перманганатометрическое, йодометрическое или периметрическое титрование. В литературе описан целый ряд других методов анализа перекиси водорода (фотоколориметрический, спектрофотометрический, полярографический и пр.).

Наиболее применяемым из указанных выше методов является метод перманганатометрического титрования, описанный в ГОСТе на перекись водорода [29].

Выполнение анализа. Навеску средства, содержащую около 25 мг перекиси водорода, помещают в коническую колбу вместимостью 250 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, содержащую 25 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности дистиллированной воды и 20 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора серной кислоты (разбавление 1:4 по объему), перемешивают и титруют 0,1 н раствором марганцовокислого калия до розовой окраски, не исчезающей в течение минуты.

Параллельно проводят контрольный опыт в тех же условиях и с тем же количеством реактивов, но без добавления перекиси водорода.

Обработка результатов. Массовую долю перекиси водорода Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора марганцовокислого калия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиKMnOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование анализируемой пробы, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора марганцовокислого калия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиKMnOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на контрольное титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,0017 - масса перекиси водорода, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиKMnOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - поправочный коэффициент раствора марганцовокислого калия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиKMnOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

Методы определения надуксусной кислоты. Надуксусная (перок-соуксусная) кислота образуется при взаимодействии уксусной кислоты с перекисью водорода. Средства на ее основе получаются смешиванием этих компонентов, поэтому они практически всегда содержат перекись водорода.

Основными методами анализа систем перекись водорода-надуксусная кислота являются методы последовательного перманганатометрически-йодометрического и цериметрически-йодометрического титрования компонентов в одной и той же анализируемой пробе. Сначала перманганатометрическим или периметрическим титрованием определяют перекись водорода, после чего проводят йодометрическое определение надуксусной кислоты. Для удаления кислорода, выделяющегося при перманганатометрическом и цериметрическом титровании перекиси водорода, к кислому титруемому раствору прибавляют карбонаты натрия. Выделяющийся при этом углекислый газ уносит с собой растворенный кислород.

Выполнение анализа. К навеске средства, содержащей перекись водорода и около 15 мг надуксусной кислоты, прибавляют 90 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 10%-го раствора серной кислоты и проводят титрование перекиси водорода 0,1 н раствором марганцовокислого калия до светло-розового окрашивания, не исчезающего в течение минуты. К оттитрованной пробе прибавляют 1 г карбоната или бикарбоната натрия, колбу взбалтывают в течение 2 мин, после чего прибавляют 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 10%-го раствора йодида калия и выдерживают 10 мин в темном месте.

Выделившийся йод титруют 0,1 н водным раствором тиосульфата натрия до светло-желтой окраски, прибавляют 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 1%-го водного раствора крахмала и продолжают титровать до обесцвечивания раствора.

Обработка результатов. Массовую долю перекиси водорода в смеси ее с надуксусной кислотой вычисляют по формуле, приведенной выше в подразделе "Методы определения перекиси водорода".

Массовую долю надуксусной кислоты Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора тиосульфата натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;


0,0038 - масса надуксусной кислоты, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - поправочный коэффициент раствора тиосульфата натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

Методы определения озона. Наиболее доступны и применяемы в настоящее время методы количественного определения озона с помощью газоанализаторов.

Для анализа озона в жидких средах используют измеритель концентрации озона ИКО-3.

Принцип действия измерителя заключается в фотоколориметрическом определении озона по собственной полосе поглощения при длине волны 253,7 нм.

Диапазон измеряемой концентрации растворенного озона от 0,1 до 30 мг/л.

Выполнение измерений проводят согласно инструкции по применению прибора.

Для анализа озона в воздухе могут быть использованы газоанализаторы озона - измеритель концентрации озона в газе ИКО-1, оптический газоанализатор озона "Циклон-5.51" и хемилюминесцентный газоанализатор озона модели "3.02П-Р".

Принцип действия ИКО-1 и оптического газоанализатора заключается в фотоколориметрическом определении озона по собственной полосе поглощения при длине волны 253,7 нм.

Диапазон измеряемых концентраций озона прибором ИКО-1 - от 1 до 150 мг/л, газоанализатором "Циклон-5.51" - от 0 до 100 мг/мР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.

Принцип действия газоанализатора озона модели "3.02П-Р" - в эффекте гетерогенной хемилюминесценции, возникающей в результате экзотермической реакции озона с окисляемыми химическими веществами композиции. Интенсивность свечения композиции пропорциональна концентрации озона в газовой смеси, измеряется и преобразуется в цифровой сигнал, отображаемый на мониторе анализатора.

Диапазон измеряемых концентраций - 0-500 мкг/мР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.

Выполнение измерений указанными газоанализаторами озона проводят согласно руководствам по их эксплуатации.

Альдегиды, входящие в состав дезинфицирующих средств, анализируют в основном следующими методами: объемными (титриметрическими) - бисульфитным (2 варианта), сульфитным и с использованием гидроксиламина и гидроксиламина солянокислого. В последние годы для их анализа стали использовать методы ГЖХ и ВЭЖХ, которые приводятся в инструкциях по применению дезинфицирующих средств.

Сущность бисульфитного метода заключается в образовании бисульфитного производного при взаимодействии альдегидов с бисульфитом натрия с последующим определением альдегидов методом йодометрического титрования. В первом классическом варианте метода используется обратное титрование прибавляемого избытка йода раствором тиосульфата натрия. Второй вариант предусматривает прямое титрование раствором йода.

В основе сульфитного метода - образование при взаимодействии альдегидов с сульфитом натрия гидроокиси натрия, титруемой растворами серной или соляной кислот.

При применении в анализе свободного гидроксиламина в спиртовой среде происходит оксимирование, и содержание альдегида определяется разностью объемов соляной кислоты, израсходованных на титрование в контрольном опыте и при титровании анализируемой пробы.

Сущность метода с использованием гидроксиламина солянокислого заключается в том, что при взаимодействии альдегидов с ним образуются альдоксимы с выделением эквивалентного количества соляной кислоты, которая титруется раствором гидроокиси натрия, либо потенциометрически до рН в интервале от 3 до 4, либо с индикатором бромфеноловым синим.

Ниже приводится в обобщенном виде наиболее часто применяемый метод количественного определения альдегидов с использованием гидроксиламина солянокислого на примере глутарового альдегида.

Выполнение анализа. Навеску или аликвоту навески средства, содержащие около 250 мг глутарового альдегида, вносят в коническую колбу с притертой пробкой, прибавляют 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности дистиллированной воды и 0,1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1%-го водного раствора бромфенолового синего.

В случае кислой реакции полученного раствора (раствор в присутствии индикатора окрашивается в желтый цвет) прибавляют 0,5 н раствор гидроокиси натрия до появления синего окрашивания. В случае щелочной реакции раствора (раствор окрашивается в синий цвет) прибавляют 0,5 н раствор соляной кислоты до светло-желтого окрашивания и затем 0,5 н раствор гидроокиси натрия до появления синего окрашивания. Затем вносят 25 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 7%-го водного раствора гидроксиламина солянокислого, закрывают колбу пробкой, оставляют на 20-30 мин при комнатной температуре, после чего образовавшийся раствор желтого цвета титруют 0,5 н раствором гидроокиси натрия до появления синего окрашивания.

Обработка результатов. Массовую долю глутарового альдегида Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора гидроокиси натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNaOH=0,5 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,5 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,0025 - масса глутарового альдегида, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора тиосульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNaOH=0,5 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,5 н), г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - поправочный коэффициент раствора гидроокиси натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNaOH=0,5 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,5 н);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

4.2.4.* Методы определения четвертичных аммониевых солей

_______________
* Нумерация соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

Анализ четвертичных аммониевых солей (ЧАС) из ряда катионных ПАВ в дезинфицирующих средствах проводят с использованием методов двухфазного и аргентометрического титрования, фотоколориметрического, спектрофотометрического и других методов.

В большинстве случаев для анализа ЧАС применяют методики анализа, основанные на методе двухфазного титрования.

Существует много вариантов метода двухфазного титрования ЧАС, отличающихся по величине рН титруемого раствора и по используемым индикаторам. Для анализа дезинфицирующих средств применяют щелочное и кислотное титрования с использованием индикаторов бромфенолового синего, метиленового голубого, смешанных индикаторов метиленового голубого и эозина Н, а также димидиум бромида и дисульфина голубого.

В основе метода количественного определения ЧАС двухфазным титрованием лежит взаимодействие катионоактивных ЧАС с анионоактивным додецилсульфатом натрия.

Указанные варианты двухфазного титрования позволяют количественно определять ЧАС с большой степенью точности. Они описаны в технических условиях и инструкциях по применению дезинфицирующих средств, содержащих ЧАС.

Ниже приведена методика анализа алкилдиметилбензиламмоний хлорида методом двухфазного титрования в щелочной среде с использованием индикатора бромфенолового синего.

Приготовление щелочного буферного раствора с рН 11. 50 г сульфата натрия и 3,5 г карбоната натрия растворяют в 500 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности дистиллированной воды.

Выполнение анализа. В цилиндр или коническую колбу вносят навеску или аликвоту раствора навески средства, содержащие около 15 мг алкилдиметилбензиламмоний хлорида, 30 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности буферного раствора с рН 11, 20 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности хлороформа и 8-12 капель 0,1%-го водного раствора индикатора бромфенолового синего. Титруют 0,004 н. раствором додецилсульфата натрия с интенсивным встряхиванием в закрытой емкости до появления отчетливого фиолетового окрашивания в верхней водной фазе.

Обработка результатов. Массовую долю алкилдиметил-бензиламмоний хлорида Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора додецилсульфата натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(CР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOSOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNa)=0,004 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,004 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,0038 - масса алкилдиметилбензиламмоний хлорида, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора додецилсульфата натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(CР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOSOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNa)=0,004 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,004 н), г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, при средней молекулярной массе ЧАС 357, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - поправочный коэффициент раствора додецилсульфата натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности(NaР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиSР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиOР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·5HР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиO)=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

Данный метод не избирателен в присутствии ПГМГ.

4.2.5. Методы определения производных гуанидина (солей полигексаметиленгуанидина гидрохлорида и хлоргексидина биглюконата)

Методы определения полигексаметиленгуанидин гидрохлорида и полигексаметиленгуанидин фосфата. В настоящее время для анализа солей полигексаметиленгуанидина в дезинфицирующих средствах часто используют фотоколориметрический метод с использованием красителя эозина Н. Для анализа солей полигексаметиленгуанидина в составе дезинфицирующих средств разработан также метод двухфазного титрования.

Разные модификации этих методов описаны в инструкциях по применению средств, содержащих соли полигексаметиленгуанидина.

Ниже приведен один из вариантов фотоколориметрической методики анализа полигексаметиленгуанидин гидрохлорида ПГМГ.

Данная методика может быть использована только при отсутствии в составе средства других азотсодержащих органических соединений (ЧАС, аминов и др.).

Сущность метода заключается в фотометрическом определении оптической плотности ионных ассоциатов, образуемых в растворах при взаимодействии ПГМГ с эозином Н.

Приготовление буферного раствора. Готовят два раствора:

Раствор 1 - 0,1 н водный раствор соляной кислоты с использованием фиксанала.

Раствор 2 - 0,75 г глицина и 0,59 г хлористого натрия растворяют в мерной колбе вместимостью 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности с доведением объема дистиллированной водой до метки.

Для приготовления буферного раствора в мерную колбу вместимостью 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности вносят 92,5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора 2 и объем жидкости доводят до метки раствором 1. Значение рН буферного раствора должно быть 3,5±0,1, что необходимо контролировать с помощью рН-метра.

Построение градуировочного графика. График строят в интервале концентраций от 0,4 до 1,6 мкг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности. Для этого в мерные колбы вместимостью 25 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности вносят 1, 2, 3 и 4 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора, содержащего 10 мкг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности стандартного образца ПГМГ, и доводят объемы во всех колбах до 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности прибавлением соответственно 9, 8, 7 и 6 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности дистиллированной воды. Затем прибавляют 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,05%-го водного раствора эозина Н, 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности глицинового буферного раствора с рН 3,5 и доводят объем дистиллированной водой до метки. После перемешивания растворы фотометрируют относительно образца сравнения при длине волны 540 нм в кюветах с толщиной поглощающего слоя 50 мм.

Образец сравнения готовят внесением в мерную колбу вместимостью 25 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности дистиллированной воды, 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,05%-го раствора эозина Н, 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности буферного раствора с доведением объема дистиллированной водой до метки.

Выполнение анализа. Навеску средства, содержащую 20-30 мг ПГМГ, разводят или растворяют в мерной колбе вместимостью 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности с доведением объема дистиллированной водой до метки.

1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности приготовленного раствора разводят дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности до метки. Берут 10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора второго разведения, вносят в мерную колбу вместимостью 25 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и далее прибавляют раствор эозина Н, буферный раствор и проводят определение оптической плотности в указанных выше для построения градуировочного графика условиях.

Обработка результатов. Массовую долю ПГМГ Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - концентрация ПГМГ, обнаруженная по градуировочному графику в анализируемой пробе, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора анализируемой пробы, равный 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - кратность разведения раствора анализируемой пробы, равная 250 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;*
_______________

* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.


Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

Методы определения полигексаметиленбигуанидина гидрохлорида. Полигексаметиленбигуанидин гидрохлорид, называемый бигуанидом, олигомером бигуанида или полигексаметиленбигуанидом, может быть количественно определен фотоколориметрически по методике, описанной выше для солей полигексаметиленгуанидина.

Кроме того, для его анализа может быть использован спектрофотометрический метод с проведением измерений при длине волны 233-237 нм.

Методы определения хлоргексидина биглюконата. Количественное определение хлоргексидина биглюконата в дезинфицирующих средствах проводят с использованием следующих методов: метода безводного титрования хлорной кислотой, фотоколориметрического метода, основанного на окрашивании хлоргексидина биглюконата гипобромитом натрия, спектрофотометрического метода и метода ВЭЖХ. Описание последних двух методов дается в ряде инструкций по применению дезинфицирующих средств.

Приводим описание спектрофотометрического метода анализа хлоргексидина биглюконата.

Выполнение анализа. Навеску средства, содержащую около 1 мг хлоргексидина биглюконата, помещают в мерную колбу вместимостью 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, объем доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 253 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 1 см.

В качестве раствора сравнения используют дистиллированную воду.

Обработка результатов. Массовую долю хлоргексидина биглюконата Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - оптическая плотность испытуемого раствора;

330 - удельный показатель поглощения хлоргексидин биглюконата;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

4.2.6. Методы определения третичного алкиламина - N,N-бис3-аминопропилдодециламина

Для количественного определения указанного третичного алкиламина в дезинфицирующих средствах используют метод кислотно-основного титрования, в т.ч. потенциометрическое титрование в спиртовой среде. Кроме того, могут быть использованы метод неводного титрования хлорной кислотой в присутствии индикатора кристаллического фиолетового и метод ГЖХ.

В случае отсутствия в средствах кислых и щелочных компонентов анализ третичного амина проводят описанным ниже методом кислотно-основного титрования в водной среде.

Сущность метода заключается в титровании амина раствором соляной кислоты, с которой амин реагирует с образованием соответствующей соли.

Выполнение анализа. В титровальную колбу вносят навеску средства, содержащую около 100 мг третичного амина, доводят объем дистиллированной водой до 30 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, вносят 1,0 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1% водного раствора индикатора бромтимолового синего и титруют 0,1 н раствором соляной кислоты до перехода синей окраски в желтую.

Обработка результатов. Массовую долю N,N-бис(3-аминопропил)-додециламина (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора соляной кислоты концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHCl=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,00998 - масса N,N-бис3-аминопропилдодециламина, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора соляной кислоты концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHCl=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - поправочный коэффициент раствора соляной кислоты Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHCl=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

4.2.7. Методы определения низших жирных спиртов этилового, изопропилового и н-пропилового

Для анализа низших жирных спиртов каждого в отдельности и их смесей используют газохроматографические методы, в основе которых лежит метод, описанный для парфюмерно-косметических изделий [32].

Количественная оценка спиртов - методом "внутреннего эталона", в качестве которого для этилового и изопропилового спиртов может быть использован н-пропиловый спирт, для н-пропилового спирта - изопропиловый или этиловый спирт.

Средства измерений. Хроматограф лабораторный газовый с пламенно-ионизационным детектором; колонка из нержавеющей стали длиной 200 см и внутренним диаметром 0,3 см, насадка-полисорб-1 с частицами размером 0,1-0,3 мм.

Условия хроматографирования

Газ-носитель

азот

Температура термостата

30 °С

Температура испарителя

200 °С

Температура детектора

200 °С

Предел измерения по току, А

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности

Объемный расход газа-носителя, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности/мин

40

Объемный расход водорода, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности/мин

60

Объемный расход воздуха, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности/мин

300

Скорость движения ленты самописца, мм/ч

240

Объем пробы

(0,6-1,0) смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.


Определение калибровочного коэффициента. Готовят две искусственные смеси взвешиванием равных количеств анализируемого спирта и внутреннего эталона. Каждую из них хроматографируют 10 раз.

Относительный калибровочный коэффициент рассчитывают по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массы определяемого спирта и внутреннего эталона с учетом чистоты, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площади пиков определяемого спирта и внутреннего эталона, ммР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.

Выполнение анализа. К анализируемому образцу прибавляют внутренний эталон в количестве, примерно равном определяемому компоненту. Готовят две пробы анализируемого образца и каждую из них хроматографируют 3 раза.

Обработка результатов. Массовую долю спирта Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемого образца, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса внутреннего эталона с учетом чистоты, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площадь пика определяемого спирта, ммР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площадь пика внутреннего эталона, ммР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - относительный калибровочный коэффициент.

Для количественной оценки спиртов применяют также метод абсолютной градуировки.

4.2.8. Метод определения соединений фенольного ряда [2-бифенилола, 2-бензил-4-хлорфенола, 5-хлор-2-гидроксидифенил-метана, 5-хлор-2-2,4-дихлорфеноксифенола] и др.

Для определения о-фенилфенола, о-бензил-р-хлорфенола, 2-фенокси-этанола, 2-феноксипропанола, 5-хлор-2(2,4-дихлорфенокси)фенола триклозана в дезинфицирующих средствах могут быть применены спектрофотометрические и хроматографические методы в зависимости от состава и концентраций ДВ, а также вспомогательных веществ рецептурного состава средства.

Спектрофотометрические методы определения фенольных соединений проводят с прямым определением вещества по собственному поглощению или в виде окрашенных комплексов.

Спектрофотометрический метод определения фенольных соединений по собственному поглощению основан на измерении оптической плотности раствора средства при длине волны 260-290 нм относительно растворителя с применением градуировочного графика или молярных и удельных коэффициентов погашения.

Метод может быть применён для серийного анализа в условиях производства.

Метод не избирателен в присутствии компонентов рецептурного состава средства, поглощающих в указанной области длин волн, несколько фенольных соединений при совместном присутствии определяются суммарно.

Подготовка пробы к анализу зависит от рецептурного состава средства.

Так при определении о-фенилфенола по собственному поглощению в дезинфицирующем средстве на основе водного раствора пропилового и этилового спиртов пробу готовят разбавлением средства в этиловом спирте [21] и измеряют оптическую плотность при длине волны 286 нм, раствор сравнения - этиловый спирт.

При определении триклозана по собственному поглощению в антибактериальном туалетном мыле подготовка пробы включает экстракционное извлечение триклозана гексаном [22] для устранения мешающего влияния компонентов рецептурного состава, измерение оптической плотности проводят при длине волны 286 нм, раствор сравнения - гексан.

В случае совместного присутствия в дезинфицирующем средстве наряду с фенольными соединениями другого ДВ, характеризующегося значительно меньшими, чем у фенольных ДВ коэффициентами погашения, например 2-феноксипропанола и катионных ПАВ с ароматическими циклами, применяют большое разбавление исследуемого раствора (от 1:100 до 1:5000) [1].

Спектрофотометрическое определение триклозана в антибактериальном мыле может быть проведено по поглощению окрашенных продуктов его взаимодействия с 4-аминоантипирином в присутствии гексацианоферрата калия при Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности490 нм [21]. При этом градуировочные смеси для построения градуировочного графика необходимо готовить путем добавления известных количеств триклозана в водный раствор такого мыла, не содержащего триклозан.

При использовании градуировочного графика в координатах "оптическая плотность - содержание вещества в аликвотной части раствора, мкг" массовую долю определяемого ДВ (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, %) вычисляют по формуле общего вида:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - содержание ДВ в аликвотной части раствора, найденное по градуировочному графику, мг;

10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - фактор пересчета из мг в г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора средства или экстракта, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая на анализ, г.

При использовании значений молярных (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) или удельных (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) коэффициентов погашения массовую долю определяемого ДВ Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, % вычисляют по формуле общего вида:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - оптическая плотность анализируемого раствора при длине волны Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, нм;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - молярная масса определяемого вещества ДВ, г/моль;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора или экстракта, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем фотометрируемого раствора, л;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - молярный коэффициент (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности), г/мольР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностисм, или удельный коэффициент (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) погашения для определяемого вещества ДВ при длине волны Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая для анализа, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем отобранной аликвотной части раствора или экстракта, л;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - толщина поглощающего слоя кюветы, см.

В [19, 21] приведены оценочные значения молярных коэффициентов погашения некоторых фенольных соединений при длине волны измерения Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, л/моль·см: о-фенилфенол Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности11000; о-бензил-р-хлорфенол Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности5300; 5-хлор-2(2,4-дихлорфенокси)-фенол Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности4500; 2-феноксипропанол Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2000.

Приборы, реактивы и растворы. Для выполнения анализа применяют спектрофотометр СФ-26, СФ-46; электрофотоколориметр типа КФК-2, стандартную стеклянную мерную посуду, весы аналитические; примененный растворитель, реактивы для получения окрашенных соединений.

Хроматографические методы определения фенольных соединений. Проблемы анализа фенольных соединений, в т.ч. раздельного определения нескольких фенольных соединений при совместном присутствии, успешно решаются методами ГЖХ с применением пламенно-ионизационного детектирования и ВЭЖХ с применением спектрофотометрического детектирования. Современные хроматографы, снабженные программой управления, сбора и обработки хроматографических данных на базе персонального компьютера, позволяют достаточно быстро подбирать оптимальные условия анализа, гибко изменять программу температурных условий хроматографирования или создавать градиентный режим элюирования, проводить обработку хроматограмм в расширенном диапазоне концентраций определяемых веществ.

При анализе фенольных соединений методом ВЭЖХ применяют хроматографические колонки для обращенно-фазной ВЭЖХ типа Zorbax ODS, Zorbax Eclipse - XDB C8 3,5 мкм, Nucleosil 100 10 C18, LiChrospher 100 RP 18 5 мкм, Intersil ODS-2 и др. В качестве подвижной фазы наиболее часто используют: для изократического хроматографирования - растворы в соотношении по объему метанол:вода (90:10), ацетонитрил:вода (35:65), ацетонитрил:0,2%-й водный раствор ортофосфорной кислоты (68:32); для градиентного хроматографирования элюенты - метанол и 0,2%-й водный раствор хлорной кислоты, ацетонитрил и 1%-й водный раствор уксусной кислоты, ацетонитрил и 0,2%-й водный раствор ортофосфорной кислоты и др.

Для разделения фенольных соединений в ГЖХ применяют насадочные стандартные колонки длиной 1 м, внутренним диаметром 0,2-0,4 мм, в качестве неподвижной фазы используют СКТФ и силиконы SE-30 и ХЕ-60, при содержании 3-5% к весу твердого носителя - силанизированного хроматона N-AW-DMCS и инертона AW-DMCS, зернением 0,20-0,25 мм, для анализа 2-феноксипропанола и 2-феноксиэтанола известно использование в качестве сорбента также карбосфера, пропитанного 0,1% AT-100 и др.

Разделение смеси действующих веществ 4-хлор-3-метилфенола и о-фенилфенола и глутарового альдегида получено на капиллярной колонке (50 мР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности0,32 мм) с неподвижной фазой СР Sil 5 СВ, толщиной слоя 1,2 мкм в режиме программирования температуры от 100 до 250 °С при скорости нагрева 10 °С/мин; время удерживания глутарового альдегида составило 6,4 мин, 4-хлор-3-метилфенола 13,4 мин и о-фенилфенола 16,8 мин.

Выбор режима хроматографирования - изотермического или программирования температуры - зависит от содержания, состава ДВ, а также вспомогательных компонентов рецептурного состава дезинфицирующего средства.

Количественную оценку определяемого вещества проводят с использованием абсолютной градуировки, которая целесообразна для выборочного единичного анализа, или с применением внутреннего эталона, рекомендуемого при выполнении массовых рутинных анализов, например, в условиях производственного контроля.

Газохроматографическое определение 2-феноксиэтанола в кожном антисептике в виде геля [23] проводят с применением пламенно-ионизационного детектирования, изотермического хроматографирования раствора пробы после разрушения структуры геля и использованием абсолютной градуировки или внутреннего эталона, в качестве которого применяют 1-тетрадеканол (спирт тетрадециловый).

Приборы, реактивы и растворы. Газовый хроматограф, снабженный пламенно-ионизационным детектором, стандартной колонкой (1 мР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности3 мм), заполненной силанизированным хроматоном N-AW-DMCS с 5% неподвижной фазы ХЕ-60; стандартная стеклянная мерная посуда; микрошприц типа МШ вместимостью 1 мкл; спирт этиловый ректификованный с объемной долей не менее 96%; аналитический стандарт 2-феноксиэтанола; 1-тетрадеканол; газ-носитель - азот, водород из баллона, воздух от компрессора.

Выполнение анализа. К 50 г анализируемого средства добавляют около 0,25 г хлористого натрия, смесь перемешивают и образовавшийся раствор отфильтровывают через бумажный фильтр. Около 20 г фильтрата взвешивают с точностью до четвертого десятичного знака, добавляют 5 мл раствора тетрадецилового спирта и после перемешивания вводят в хроматограф.

Градуировочные смеси и анализируемую пробу хроматографируют при следующих условиях: расход газов - азот 45 мл/мин, водород 30 мл/мин, воздух 300 мл/мин; температура колонки (140±3) °С, испарителя 250 °С; объем вводимой дозы 1 мкл.

Приготовление градуировочных смесей с внутренним эталоном. Для определения градуировочного коэффициента 2-феноксиэтанола по веществу - внутреннему эталону готовят три градуировочные смеси и раствор вещества-эталона: 0,14, 0,17 и 0,20 г 2-феноксиэтанола растворяют в 20 г этилового спирта; 4 г тетрадецилового спирта растворяют в 100 мл этилового спирта в мерной колбе. Результаты взвешиваний записывают с точностью до четвертого десятичного знака. К каждой градуировочной смеси 2-феноксиэтанола добавляют по 5 мл раствора тетрадецилового спирта, тщательно перемешивают и вводят в хроматограф не менее трех раз. Из каждой хроматограммы определяют площадь хроматографических пиков 2-феноксиэтанола, тетрадецилового спирта в градуировочной смеси и вычисляют градуировочный коэффициент Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, *


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса 2-феноксиэтанола в градуировочной смеси, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса вещества-эталона в 5 мл раствора тетрадецилового спирта, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности* - площади пиков 2-феноксиэтанола и вещества-эталона.
______________

* Формула и экспликация к ней соответствуют оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.


За градуировочный коэффициент (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) принимают среднее арифметическое результатов всех определений, расхождения которых от средней величины не превышают 20%.

Обработка результатов. Массовую долю 2-феноксиэтанола в средстве Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, % вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - градуировочный коэффициент 2-феноксиэтанола;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площади пиков 2-феноксиэтанола и вещества-эталона в анализируемой пробе;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая на анализ, и масса вещества-эталона в 5 мл раствора тетрадецилового спирта, г.

Газохроматографическое определение о-фенилфенола и о-бензил-р-хлорфенола, 3-метил-4-хлорфенола с применением пламенно-ионизационного детектирования, хроматографирования в режиме программирования температуры и использованием абсолютной градуировки.

Приборы, реактивы и растворы. Газовый хроматограф, снабженный пламенно-ионизационным детектором, стандартной колонкой (1 мР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности3 мм), заполненной силанизированным хроматоном N-AW-DMCS с 5% неподвижной фазы ХЕ-60; стандартная стеклянная мерная посуда; микрошприц типа МШ вместимостью 1 мкл; ацетон; аналитические стандарты о-фенилфенола и о-бензил-р-хлорфенола; азот из баллона, водород из баллона, воздух от компрессора.

Выполнение анализа [24]. Около 3,3 г средства, взвешенного с точностью до четвертого десятичного знака, растворяют в ацетоне в мерной колбе вместимостью 25 мл и после перемешивания вводят в хроматограф.

Градуировочные смеси и анализируемую пробу хроматографируют при следующих условиях. Расход газов: азот 30-40 мл/мин, водород 25-30 мл/мин, воздух 250-300 мл/мин; температура испарителя и детектора 250 °С; температура колонки начальная 70 °С, нагрев со скоростью 15 °С/мин до 190 °С; объем вводимой дозы 1 мкл. Порядок выхода определяемых веществ: о-бензил-р-хлорфенол, о-фенилфенол.

Градуировочные смеси готовят с массовой концентрацией по 4-4,5 мг/мл о-фенилфенола и о-бензил-р-хлорфенола в ацетоне.

Обработка результатов. Массовую долю определяемого вещества в средстве Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, % вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площади хроматографических пиков определяемого вещества в анализируемой пробе и градуировочной смеси;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая концентрация аналитического стандарта определяемого вещества в градуировочной смеси, мг/мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая доля основного вещества в аналитическом стандарте, %;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора пробы, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая на анализ, мг.

4.2.9. Метод определения кислот и щелочей

Количественное определение кислот и щелочей проводят методом кислотно-основного титрования с использованием индикаторов кислотно-основного титрования, из которых наиболее часто применяются метиловый оранжевый, фенолфталеин, метиловый красный, бромфеноловый синий и др.

Приводится обобщенный метод количественного определения кислот на примере серной кислоты.

Сущность метода - в проведении реакции нейтрализации серной кислоты щелочью путем титрования раствором гидроокиси натрия в присутствии индикаторов кислотно-основного титрования.

Выполнение анализа. Навеску средства, содержащую около 50 мг серной кислоты, помещают в коническую колбу, прибавляют дистиллированную воду до 30 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, необходимый объем раствора индикатора и титруют 0,1 н раствором гидроокиси натрия до соответствующего перехода окраски индикатора.

Обработка результатов. Массовую долю серной кислоты Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,

где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора гидроксида натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNaOH=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,0049 - масса серной кислоты, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора гидроокиси натрия концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNaOH=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - поправочный коэффициент раствора гидроокиси натрия концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиNaOH=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

Приводится обобщенный метод количественного определения щелочей на примере гидроокиси натрия.

Сущность метода в проведении реакции нейтрализации гидроокиси натрия кислотой путем титрования 0,1 н водным раствором соляной кислоты в присутствии индикаторов кислотно-основного титрования.

Выполнение анализа. Навеску средства, содержащую около 40 мг щелочи, помещают в коническую колбу, прибавляют дистиллированную воду до 30 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, необходимый объем раствора индикатора и титруют 0,1 н раствором соляной кислоты до соответствующего перехода окраски индикатора.

Обработка результатов. Массовую долю гидроокиси натрия Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,

где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора соляной кислоты концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHCl=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (0,1 н), израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

0,0040 - масса гидроокиси натрия, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности раствора соляной кислоты концентрации точно Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHCl=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н, г/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - поправочный коэффициент раствора соляной кислоты концентрации Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиHCl=0,1 моль/дмР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 н;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

4.2.10. Методы анализа анионных и неионогенных ПАВ

Количественное определение анионных ПАВ проводят с использованием метода двухфазного титрования в присутствии смешанного индикатора метиленового голубого и эозина БА или эозина Н, а также фотоколориметрическим методом, основанным на образовании окрашенного комплекса с азуром 1 с фотоколориметрическим измерением оптической плотности его хлороформного экстракта, согласно ГОСТам на указанные методы [39].

Для анализа неионогенных ПАВ (оксиэтилированных высших спиртов и алкилфенолов) может быть использован метод, сущность которого в осаждении неионогенного ПАВ избытком фосфорномолибденовой кислоты и последующим потенциометрическим титрованием ее избытка раствором диантипирилметана с катодно-поляризованным платиновым электродом [40].

4.2.11. Методы анализа метасиликата натрия

Анализ метасиликата натрия проводят фотоколориметрическим методом, основанным на образовании окрашенного комплекса с молибденовокислым аммонием и гравиметрическим методом, сущность которого в осаждении кремниевой кислоты с определением ее массы. Описание этих методов приводится в ГОСТах на методы анализа силиката натрия [25].

4.3. Методы исследования дезинсекционных средств


Дезинсекционные средства включают инсектицидные, акарицидные, инсектоакарицидные и репеллентные средства.

В инсектицидных средствах в качестве действующих веществ ДВ используют пиретроиды, фосфорорганические соединения ФОС, карбаматы, регуляторы развития насекомых и некоторые вещества из других классов химических соединений в основном сложного химического строения, например, фипронил, тиаметоксам, имидаклоприд, гидраметилнон.

В акарицидных и инсектоакарицидных средствах в качестве ДВ применяют пиретроиды и фосфорорганические соединения.

В репеллентных средствах действующими веществами в основном являются диметилфталат, N,N-диэтил-м-толуамид ДЭТА и этил-3-N-бутил-ацетамино-пропионат ИР3535.

Формами применения дезинсекционных средств являются: жидкие (лосьоны, эмульсии, шампуни, концентраты эмульсий, растворы в беспропеллентных аэрозольных упаковках БАУ); твёрдые (смачивающиеся порошки, дусты, карандаши, таблетки, шашки); гели; кремы; аэрозольные баллоны, электрофумигирующие средства (пластины, спирали, жидкости); свечи; а также бумага, ткани, салфетки, пропитанные инсектицидными составами, и др.

К основным показателям качества дезинсекционных средств, контролируемым при регистрации и сертификации, относятся: внешний вид, определяемый визуально, запах, оцениваемый органолептически, и массовая доля ДВ; к дополнительным при характеристике водно-спиртовых лосьонов и шампуней - показатель активности водородных ионов рН, определяемый потенциометрически по ГОСТ Р 50550-93 [33].

Для идентификации и количественного определения ДВ в дезинсекционных средствах используются методы газо-жидкостной хроматографии ГЖХ, высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЭЖХ и спектрофотометрический.

Универсальным и наиболее доступным методом анализа ДВ в дезинсекционных средствах является метод ГЖХ, поскольку его можно использовать для количественного определения практически всех применяемых ДВ (за исключением имидаклоприда, гидраметилнона, определяемых методом ВЭЖХ, и азаметифоса, тиаметоксама, определяемых спектрофотометрическим методом).

Преимуществом метода ГЖХ является возможность эффективно разделять смеси ДВ в одном средстве, что затруднено при анализе спектрофотометрическим методом. Метод ГЖХ обладает высокой чувствительностью (0,01-0,05 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности), что позволяет определять самые низкие концентрации ДВ в различных формах применения.

Погрешность метода определения ДВ методом ГЖХ не превышает 5% относительных.

4.3.1. Метод газо-жидкостной хроматографии ГЖХ для идентификации и количественного определения действующих веществ в дезинсекционных средствах

Определение массовой доли ДВ включает следующие операции: подготовку анализируемой пробы (часто приходится выделять ДВ из некоторых форм применения методом экстракции); идентификацию и количественное определение ДВ методом ГЖХ.

Способы подготовки пробы при анализе различных форм применения. Способы подготовки пробы при анализе ДВ зависят от вида форм применения дезинсекционных средств. В случае безводных жидких форм, в которых растворителями являются органические растворители, или концентрированных водных растворов пробу готовят простым разведением средства. В случае же разбавленных жидких водных растворов, эмульсий, порошков и других твердых форм применения обязательной начальной стадией анализа является выделение ДВ путем экстракции его из анализируемых средств органическими растворителями. При этом степень извлечения ДВ зависит от состава средства - массовой доли ДВ и сопутствующих компонентов. Чем сложнее состав средства и чем ниже концентрация в нём ДВ, тем коэффициент извлечения их ниже.

Способы выделения ДВ из различных форм применения дезинсекционных средств приведены в табл.4.1.

Таблица 4.1

Способы выделения действующих веществ из различных форм применения

Форма применения

Действующее вещество, %

Способ подготовки анализируемой пробы

1

2

3

1. Концентраты эмульсии к.э.

- перметрин - 5-25;

- циперметрин - 25;

- альфа-циперметрин - 10;

- фенотрин -10;

- дельтаметрин - 2,5;

- фентион - 25;

- хлорпирифос - 48;

- малатион - 50-57;

- пропоксур - 20

Разведение концентрата эмульсии полярным или неполярным растворителем до необходимой концентрации

2. Водно-спиртовые лосьоны:

Разведение лосьона полярным растворителем, удаление следов воды прокалённым осушителем

- педикулицид;

- перметрин - 0,5;

- антимольный спиртовой раствор в БАУ;

- перметрин - 0,55;

- репеллентный спиртовой раствор в БАУ

- ИР3535 - 12,0

3. Смачивающийся порошок

- альфациперметрин - 5,0;

- фентион - 40,0;

- азаметифос - 50,0

Экстракция неполярным растворителем при перемешивании на магнитной мешалке в течение 1-3 ч;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности90-95%

4. Твёрдые формы:

- таблетки, шашки;

- дусты;

- мелок, карандаш

- перметрин - 13,0 таблетка, шашка;

- перметрин - 0,25 дуст;

- ДЭТА-17,5 (карандаш);

- альфа-циперметрин - 0,3 карандаш

Измельчение, экстракция неполярным растворителем при перемешивании на магнитной мешалке в течение 1-3 ч;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности90-95%

5. Аэрозольные баллоны

- пралле - 0,32;

- альфа-циперметрин - 0,20;

- пропеллент УВП-50;

- цифенотрин - 0,2;

- тетраметрин - 0,1;

- УВП - 60,0 [40]

Удаление углеводородного пропеллента УВП методом испарения, разведение состава соответствующим растворителем до необходимой концентрации;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности85-90%

6. Гели, пасты

- хлорпирифос - 0,6, гель;

- ДЭТА - 17,5, крем-гель;

- пропоксур - 2,0, приманка

Экстракция неполярным растворителем; удаление следов воды прокалённым осушителем;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности80-85%

7. Ткани, импрегнированные составом перметрина

- бумага, пропитанная хлорпирифосом

- перметрин - 0,5;

- хлорпирифос - 0,6

Экстракция неполярным растворителем;

экстракция неполярным растворителем



Идентификация и количественное определение действующих веществ методом газожидкостной хроматографии. Сущность метода заключается в разделении смеси веществ на хроматографической колонке. Входным сигналом хроматографа является концентрация или масса определяемого компонента на входе в хроматограф.

Выходным сигналом хроматографа являются: амплитуда в максимуме хроматографического пика (высота пика) или площадь хроматографического пика и время удерживания определяемого компонента. По времени удерживания ДВ осуществляется его идентификация; по высоте хроматографического пика или площади рассчитываются концентрация и массовая доля ДВ.

Средства измерения:

- хроматографы лабораторные разных марок (ЛXM-80, "Цвет", "Кристалл" или другой аналогичный) с пламенно-ионизационным детектором ПИД;

- аналитическая колонка (металлическая или стеклянная) длиной 100 или 200 см и внутренним диаметром 0,3 см;

- наполнитель - хроматон N-AW-HMDS с 5% SE-30 или хромосорб W-HP с 3% OV-210.

Выполнение анализа. Анализ дезинсекционного средства включает следующие операции:

- приготовление градуировочных растворов точной концентрации (0,5-2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) для градуировки хроматографа (построение графика зависимости высоты площади хроматографического пика от концентрации ДВ);

- приготовление раствора анализируемой пробы (разведением или экстракцией средства);

- хроматографирование анализируемого раствора параллельно с градуировочным раствором определённой концентрации в аналогичных условиях.

Условия хроматографирования:

Скорость газа-носителя азота, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности/мин

30-35

Скорость водорода, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности/мин

30-35

Скорость воздуха, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности/мин

300

Чувствительность шкалы электрометра

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности А

Концентрация анализируемого и стандартного растворов, мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности

0,5-2,0

Температура колонки, °С*

170-260

Температура детектора, °С

190-270

Температура испарителя, °С

190-280

________________
* Температурные интервалы заданы для всех инсектицидов.


На хроматограммах измеряются высоты или площади хроматографических пиков.

Обработка результатов анализа - раздел 4.3.2.

4.3.2. Метод ГЖХ для определения пиретроидов

В настоящее время известны около 18 пиретроидов, используемых в качестве ДВ в составе различных дезинсекционных средств. Распределение пиретроидов по назначению: в качестве педикулицидов используют фенотрин и перметрин (0,3-0,5%); инсектоакарицидов - циперметрин и альфа-циперметрин (0,20-0,25%); инсектицидов с высоким "нокдаун-эффектом" в составе аэрозольных баллонов - тетраметрин (0,1-1,0%) и имипротрин (0,1-0,2%) в сочетании с другими пиретроидами (перметрин, циперметрин, фенотрин, цифенотрин) или ФОС сумитрин; электрофумигирующих средств - изомеры аллетрина (биоаллетрин, эсбиотрин) и праллетрин (10-20 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности); в противомольных средствах - вапортрин, перметрин.

Из пиретроидов отобраны 11 (табл.4.2.3) наиболее востребованных, для 10 из которых зарегистрированы субстанции (технические продукты).

В качестве примера использования метода ГЖХ для количественного определения пиретроидов приведён анализ технического продукта перметрина.

Массовую долю перметрина определяют методом ГЖХ с использованием пламенно-ионизационного детектирования и количественной оценки перметрина методом абсолютной градуировки по стандартному образцу ГСО 7715-99.

Для анализа используют аналитический газовый хроматограф, снабженный ПИД, металлической колонкой длиной 100 см и диаметром 0,3 см, заполненной силанизированным хроматоном N-AW-DMCS 0,20-0,25, пропитанным 5% неподвижной фазы SE-30.

С целью определения зависимости высоты (площади) хроматографических пиков от концентрации анализируемых растворов разово готовят и хроматографируют рабочие градуировочные растворы с концентрацией ДВ 0,5; 1,0; 1,5 и 2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в четыреххлористом углероде.

После установления линейной зависимости в изучаемой области концентраций анализ перметрина технического проводят следующим образом.

Выполнение анализа. Анализируемый раствор готовят растворением 0,25 г технического продукта в четыреххлористом углероде в мерной колбе вместимостью 50 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности с последующим разведением аликвоты полученного раствора в 5 раз тем же растворителем.

Приготовленный анализируемый раствор вводят в хроматограф не менее 3 раз параллельно с рабочим градуировочным концентрации 1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.

Условия хроматографирования:

Температура колонки, °С

250

Температура детектора, °С

260

Температура испарителя, °С

260

Чувствительность шкалы электрометра

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности А

Объём вводимой пробы, мкл

1

Время удерживания перметрина

3 мин 30 с


Обработка результатов. Массовую долю перметрина Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах рассчитывают по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,

где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - высоты хроматографических пиков перметрина в анализируемом и рабочем градуировочном растворах, мм;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - концентрация перметрина в градуировочном растворе, мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объём анализируемого раствора, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса навески субстанции (перметрина технического), мг;

За результат анализа принимают среднее арифметическое значение из 3 определений, абсолютное расхождение между которыми не превышает 0,5%.

Ниже в табл.4.2 представлен метод анализа различных форм применения пиретроидов в обобщённом виде. При этом для каждого пиретроида приведены наиболее распространённые формы применения, условия их хроматографирования, метод количественной оценки (абсолютная градуировка с использованием стандартного образца определяемого вещества или метод "внутреннего эталона"), растворитель для разведения или экстракции ДВ из дезинсекционного средства и коэффициент извлечения ДВ.

Таблица 4.2

Газохроматографический метод определения пиретроидов в различных формах применения

Название ДВ, формы применения

Способ приготовления анализируемой пробы

Условия хроматографирования

1

2

3

1. ПЕРМЕТРИН

3-Феноксибензил
(1RS)-цис,транс-3-(2,
2-дихлорвинил)-2,2-диметил-
цикло-пропанкар-боксилат

- Субстанция "Перметрин технический"

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

не менее 92,0% (соотношение цис-транс-изомеров 25:75)

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 250 °С;

температура детектора - 260 °С;

температура испарителя - 260 °С;

время удерживания перметрина - 3 мин 30 с

Формы применения:

- Педикулицидные лосьоны

перметрин - 0,5%

Разбавление полярным растворителем до необходимой концентрации, удаление следов воды прокалённым осушителем

- Педикулицидные шампуни

перметрин - 0,3%

Экстракция гептаном, удаление следов воды прокалённым осушителем

- Концентраты эмульсий

перметрин - 5-25%

Разведение неполярным растворителем до определённой концентрации

- Мыло

перметрин - 0,5%

Экстракция гептаном

- Аэрозольные баллоны

перметрин - 0,2%

Удаление пропеллента путём испарения, разведение состава неполярным растворителем до необходимой концентрации

- Таблетки, шашки

перметрин -13,0%

Экстракция неполярным растворителем

- Растворы,

БАУ перметрин - 0,55%

Разведение полярным растворителем до необходимой концентрации, удаление следов воды прокалённым осушителем

- Кремы

перметрин - 1,0%

Экстракция смесью полярного и неполярного растворителей в соотношении 1:4, удаление следов воды прокалённым осушителем

2. ЦИПЕРМЕТРИН

Альфа-циано-3-феноксибензил 1RS-
цис, транс-3-(2,2-дихлорвинил)-2,2-ди-
метилциклопропан-карбоксилат

- Субстанция "Циперметрин технический", не менее 95,0% (соотношение цис-, транс-изомеров 50:50)

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 250 °С;

температура детектора - 260 °С;

температура испарителя - 260 °С;

время удерживания циперметрина - 4 мин 30 с

Формы применения:

- Концентраты эмульсий 25,0% к.э. циперметрина

Разбавление полярным растворителем до необходимой концентрации, удаление следов воды прокалённым осушителем

- Смачивающийся порошок

циперметрин - 2,9%;

малатион - 14,0%

Экстракция неполярным растворителем

Твёрдые формы:

дуст (циперметрин - 0,24%),

меловой карандаш - циперметрин - 0,24%

Экстракция неполярным растворителем

- Аэрозольные баллоны

циперметрин - 0,1%;

имипротрин - 0,08%;

МГК 264 - 0,8%;

УВП - 50,0%

Удаление пропеллента путём испарения, разведение состава неполярным растворителем до необходимой концентрации

- Гели

циперметрин - 0,1%

Экстракция неполярным растворителем

3. АЛЬФА-ЦИПЕРМЕТРИН

(сумма 2 цисизомеров циперметрина)

- Субстанция

"Альфа-циперметрин технический", не менее 95,0%

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 250 °С;

температура детектора - 260 °С;

температура испарителя - 260 °С;

время удерживания альфа-циперметрина - 4 мин 30 с

Формы применения:

- Аэрозольные баллоны

альфа-циперметрин - 0,15%;

перметрин - 0,2%

Удаление пропеллента путём испарения, разведение состава неполярным растворителем

- Растворы, БАУ альфа-циперметрин - 0,22%

Разбавление полярным растворителем до необходимой концентрации, удаление следов воды прокалённым осушителем

Гели

альфа-циперметрин - 0,2%

Экстракция неполярным растворителем

4. ДЕЛЬТАМЕТРИН

S-альфа-циано-3-феноксибензил
(1R, 3R)-3-(2,2-дибромвинил)-2,2-(ди-
метил)-циклопропан-карбоксилат

- Субстанция, содержащая не менее 98,0% основного вещества

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 250 °С;

температура детектора - 260 °С;

температура испарителя - 260 °С;

время удерживания дельтаметрина - 6 мин 30 с

Формы применения:

- Концентраты эмульсий

дельтаметрин - 2,5%

Экстракция неполярным растворителем

Твёрдые формы:

- Дуст

дельтаметрин - 0,025%;

фентион - 0,40%;

мелокдельтаметрин - 0,1%;

зетациперметрин - 0,05%

Экстракция неполярным растворителем

- Аэрозольные баллоны

дельтаметрин - 0,02%

Удаление пропеллента путём испарения, экстракция из состава неполярным растворителем, удаление следов воды прокалённым осушителем

5. ЭСБИОТРИН

1RS-Аллил-2-метил-4-оксо-цикло-
пент-2-енил-(1R,3R)-2,2-диметил-3-
(2-метил-проп-1-енил)-циклопропан-
карбоксилат

- Субстанция

"Эсбиотрин", суммарное содержание ДВ в техническом продукте не менее 93,0%

Растворение в полярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки или методом "внутреннего эталона" по дибутилфталату;

растворитель - ацетон;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 200 °С;

температура детектора - 250 °С;

температура испарителя - 250 °С;

время удерживания эсбиотрина - 2 мин 20 с

Формы применения:

Электрофумигирующие средства:

- Электрофумигатор жидкостной

эсбиотрин - 3,0%

Разведение полярным растворителем

- Электрофумигатор с пластинами от комаров

эсбиотрин - 20,0 мг/на пластину

Измельчение, экстракция полярным растворителем

- Свеча

эсбиотрин - 0,16%

Экстракция полярным растворителем

6. ПРАЛЛЕТРИН ЭТОК

S-2-метил-4-оксо-3-проп-2-
инил-циклопент-2-енил-1R-2,2-диме-
диметил-3-(2-метил-проп-1-енил)-цик-
лопропанкар-боксилат

- Субстанция ЭТОК с содержанием действующего вещества в техническом продукте не менее 93,0%

Растворение в полярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки или методом внутреннего эталона по дибутилфталату;

растворитель - ацетон;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 200 °С;

температура детектора - 250 °С;

температура испарителя - 250 °С;

время удерживания праллетрина - 2 мин 20 с

Формы применения:

- Электрофумигирующее средство в форме пластины; содержание праллетрина - 10 мг на пластину

Измельчение пластины, экстракция полярным растворителем

7. НЕОПИНАМИН ФОРТЕ (d-TETPA-МЕТРИН)

3,4,5,6-Тетрагидро-фталимидометил-1R-цис,
транс-хризантемат

- Субстанция содержит минимум 92,0% активных d-транс-изомеров

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки или методом "внутреннего эталона" по дибутилфталату;

растворитель - ацетон;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 250 °С;

температура детектора - 270 °С;

температура испарителя - 260 °С;

время удерживания тетраметрина - 2 мин 30 с;

программирование температуры от 200 до 250 °С

Формы применения:

- Аэрозольные баллоны (для летающих и ползающих насекомых)

перметрин - 0,2%;

циперметрин - 0,2%;

тетраметрин - 0,2%;

ППБ - 1,0%;

УВП - 40,0%

Удаление пропеллента путем испарения, разведение состава неполярным растворителем

Твёрдые формы:

- Дуст

тетраметрин - 0,05%;

перметрин - 0,45%;

фенвалерат - 0,15%

Экстракция неполярным растворителем

8. ПРАЛЛЕ (50,0% ИМИПРОТРИН)

[2,5-Диоко-3-(2-пропинил)-1-имидазоли-
динил]-метил 1RS-цис, транс-хризантемат

- Субстанция ПРАЛЛЕ (50% имипротрин)

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка методом абсолютной градуировки или методом "внутреннего эталона" по дифенилфталату;

растворитель - ацетон;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 190-260 °С;

температура детектора - 260 °С;

температура испарителя - 260 °С;

время удерживания имипротрина - 2 мин 15 с

Формы применения:

Аэрозольные баллоны:

- Инсектицидное средство

имипротрин - 0,1%;

d-цифенотрин - 0,3%;

УВП - 40,0%

Удаление пропеллента путем испарения, разведение состава полярным растворителем

- Акаридидное средство

пралле - 0,32%;

альфациперметрин - 0,2%;

УВП - 50%

Удаление пропеллента путем испарения, разведение состава полярным растворителем

9. ГОКИЛАТ-S ЦИФЕНОТРИН

RS-Альфа-циано-3-феноксибензил-
1R-цис,транс-хризантемат

- Субстанция

ГОКИЛАТ-S ЦИФЕНОТРИН - технический продукт с содержанием основного вещества - 96,0%

Растворение в полярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка методом абсолютной градуировки;

растворитель - четыреххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности; температура колонки, детектора и испарителя - 250 °С;

время удерживания цифенотрина - 2 мин 30 с

Формы применения:

Аэрозольные баллоны

- Инсектицидное средство

цифенотрин - 0,2%;

d-тетраметрин - 0,1%;

УВП - 60,0%

Удаление пропеллента путем испарения, разведение неполярным растворителем

- Концентрат эмульсии

цифенотрин - 10%

Разведение неполярным растворителем до необходимой концентрации

10. d-ФЕНОТРИН СУМИТРИН

3-Феноксибензил-1RS-цис,тpaнc-2,2-диме-
тил-3-(2,2-диметил-винил)-циклопро-
панкарбоксилат

- Технический продукт с содержанием основного вещества 93,7%

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки или методом "внутреннего эталона" по диоктилфталату;

растворитель - четырёххлористый углерод; Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 230 °С;

температура детектора - 250 °С;

температура испарителя - 250 °С;

время удерживания d-фенотрина - 4 мин 15 с

Формы применения:

Аэрозольные баллоны:

Инсектицидное средство

d-фенотрина - 0,15%;

d-тетраметрин - 0,15%

Удаление пропеллента путем испарения, разведение неполярным растворителем

Ловушки:

- Инсектицидное средство, ловушка от муравьев

фенотрин - 0,1%;

аттрактант - 98,6%

Экстракция неполярным растворителем

- Концентрат эмульсии

фенотрин - 10,0%

Разведение неполярным растворителем до нужной концентрации

11. ВАПОРТРИН ЭМПЕНТРИН

RS-1-Этинил-2-метилпент-2-енил-
1R-цис, транс-хризантемат

- Субстанция вапортрина

технический продукт с содержанием основного вещества не менее 93,0%

Растворение в полярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - ацетон;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности1,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 170 °С;

температура детектора - 250 °С;

температура испарителя - 250 °С;

время удерживания вапортрина - 2 мин 10 с

Формы применения:

- Инсектицидное средство в виде бумажных пластин, пропитанных раствором вапортрина;

вапортрин - 8,6%

Экстракция полярным растворителем

- Инсектицидное средство от мух в виде жидкости с содержанием вапортрина

вапортрин - 2,8%

Разведение полярным растворителем


4.3.3. Методы определения фосфорорганических соединений

Основными фосфорорганическими соединениями, используемыми в качестве ДВ в составе различных инсектицидов и акароинсектицидов в настоящее время, являются: хлорпирифос, хлорофос, малатион карбофос, фентион сульфидофос, сумитион (фенитротион), диазинон и азаметифос.

В качестве субстанций зарегистрированы: хлорофос, хлорпирифос и фентион технический сульфидофос.

Анализ хлорофоса осуществляют методом ВЭЖХ, анализ азаметифоса проводится спектрофотометрическим методом при длине волны 295 нм.

Остальные пять фосфорорганических соединений определяют методом ГЖХ/ПИД при температуре колонки 190-210 °С, температуре испарителя и детектора 200-230 °С.

В качестве внутреннего стандарта используют дибутилфталат или дифенил.

В табл.4.3 представлены методы количественного определения фосфорорганических соединений в обобщённом виде для различных форм применения.

Таблица 4.3

Методы определения фосфорорганических соединений

Действующие вещества, препаративные формы

Способ подготовки анализируемой пробы

Условия хроматографирования

1

2

3

1. ХЛОРПИРИ-ФОСО, О-Диэтил-О-(3,5,6-трихлор-
2-пиридинил)-тиофосфат

- Технический продукт субстанция с содержанием основного продукта 97,0%

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четыреххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 180 °С;

температура детектора - 190 °С;

температура испарителя - 210 °С;

время удерживания хлорпирифоса - 3 мин 40 с

Формы применения:

- Концентрат эмульсии (хлорпирифос - 20%) в форме микрокапсулированной суспензии

Разбавление смесью ацетонитрила и четыреххлористого углерода (2:3), удаление следов воды прокалённым осушителем

- 48,0% к.э. хлорпирифоса

Разбавление неполярным растворителем

- Гели

гель от тараканов

хлорпирифос - 0,6%

Экстракция смесью полярного и неполярного растворителей (1:1), удаление следов воды прокалённым осушителем

- Инсектицидное средство в виде гелеобразной пасты хлорпирифос - 0,5%

Экстракция полярным растворителем

- Приманки, ловушки-приманки от тараканов

хлорпирифос - 0,6%;

Экстракция смесью полярного и неполярного растворителей (1:1)

бумага от моли, хлорпирифос - 2,9%;

Экстракция полярным растворителем

порошок-приманка хлорпирифос - 2,0%;

Экстракция неполярным растворителем

антимоль, хлорпирифос - 0,6 г на ленту

Экстракция неполярным растворителем

2. ФЕНТИОН (Сульфидофос) О,О-Диметил-О-(4-метил-
тио-м-толил)-тиофосфат

Технический продукт субстанция "Фентион технический" с содержанием основного вещества не менее 90%

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности; температура колонки - 190 °С;

температура детектора - 250 °С;

температура испарителя - 250 °С;

время удерживания фентиона - 2 мин 50 с

Формы применения:

- Концентраты эмульсий

25% к.э. фентиона

Разбавление неполярным растворителем

- Смачивающийся порошок

40% с.п. фентиона

Экстракция неполярным растворителем

- Гели

Средство инсектицидное в форме геля

фентион - 0,24%

альфа-циперметрин - 0,03%

Экстракция неполярным растворителем

- Твёрдые формы

дуст фентион - 0,4%;

дельтаметрин - 0,025%

Экстракция неполярным растворителем

3. ХЛОРОФОС

О,О-Диметил-(1-окси-2,2,2-трихло-
рэтил)-фосфонат

- Технический продукт субстанция с содержанием хлорофоса 98,0%

Разбавление элюентом: метанол - 0,3% водный раствор ортофосфорной кислоты 55:45

Метод ВЭЖХ с УФ-детектированием при длине волны - 220 нм;

сорбент - IP, элюент - метанол-ортофосфорная кислота 55:45;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки

Инсектицидное средство

хлорофос - 80,0% с.п.

Экстракция элюентом

4. МАЛАТИОН КАРБОФОС

О,О-Диметил-S-[1,2-ди(этоксикарбо-
нил)этилдитио]-фосфат

Формы применения:

- Концентраты эмульсий

малатион - 57% к.э.;

малатион - 10,0%;

циперметрин - 20,0%;

- малатион - 50,0% к.э.

Разбавление неполярным растворителем

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 190 °С;

температура детектора - 200 °С;

температура испарителя - 220 °С;

время удерживания малатиона - 2 мин 30 с

Твёрдые формы

таблетка малатион - 8,0%;

альфа-циперметрин - 20%

Экстракция неполярным растворителем

- Инсектицидное средство в виде порошка

малатион - 14,0%,

циперметрин - 2,9%

Экстракция неполярным растворителем

5. ДИАЗИНОН

О,О-Диэтил-О-(2-изопропил-(4-ме-
тил-пиримидил-6)-тиофосфат

Гели, ловушки:

исектицидное средство в форме таблетки

диазинон - 6,0%

Экстракция неполярным растворителем

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четыреххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 170 °С;

температура детектора - 200 °С;

температура испарителя - 220 °С;

время удерживания диазинона - 2 мин 10 с

- Инсектицидное средство в форме геля

диазинон - 0,2%;

хлорпирифос - 0,3%

Экстракция неполярным растворителем

- Инсектицидное средство в форме гель-пасты

диазинон - 0,3%;

альфациперметрин - 0,05%

Экстракция неполярным растворителем

- Инсектицидное средство форме геля

диазинон - 0,225%;

циперметрин - 0,075%

Экстракция полярным растворителем

6. ФЕНИТРОТИОН СУМИТИОН

О,О-Диметил-О-(4-ни-
тро-м-толил)-тиофосфат

Формы применения:

Аэрозольные баллоны:

- Аэрозольный баллон для нелетающих насекомых

фенитротион - 1,0%;

тетраметрин- 0,1%;

УВП - 55%

Удаление пропеллента путем испарения, разбавление неполярным растворителем

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четыреххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности; температура колонки - 200 °С;

температура детектора - 250 °С;

температура испарителя - 250 °С;

время удерживания фенитротиона - 2 мин 30 с

- Аэрозольный баллон для летающих насекомых

тетраметрин - 0,075%;

перметрин - 0,04%;

фенитротион - 0,3%;

синергист-пиперонилбутоксид

ППБ - 0,3%;

УВП-бутан - 67,5%

Удаление пропеллента путем испарения, разбавление неполярным растворителем

7. АЗАМЕТИФОС

О,О-диметил-S-(2-оксо-6-хлор-пиридо-
оксазолил-3-метил)-тиофосфат

- Инсектицидное средство "Альфакрон 50% с.п."

Экстракция неполярным растворителем

- Инсектицидное средство в форме порошка

альфакрон - 0,4% или азаметифос - 0,2%

Экстракция неполярным растворителем

Приманка для мух в виде пластины азаметифос - 1,0 мг на пластину

Экстракция неполярным растворителем

Спектрофотометрический метод (длина волны - 295 нм)



Подробно условия хроматографирования при использовании метода ГЖХ приведены в п.4.3.2.


4.3.4. Метод ГЖХ для определения карбаматов

За последние 5 лет нашли применение средства с двумя ДВ из класса карбаматов - метомилом и пропоксуром.

В нижеследующей табл.4.4 приведены методики количественного определения указанных ДВ в средствах на основе карбаматов.

Таблица 4.4

Методики определения карбаматов

Действующие вещества, формы применения

Способ подготовки анализируемой пробы

Условия хроматографирования

1

2

3

1. МЕТОМИЛ

1-Метилтиоацеталь-дегида О-(N-Meтил-карбамоил)оксим

- Технический продукт

Субстанция "Метомил" с содержанием основного вещества не менее 98,0%

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 100 °С;

температура детектора - 200 °С;

температура испарителя - 200 °С;

время удерживания метомила - 2 мин 20 с

- Приманка от мух

Инсектицидное средство в виде гранулированной приманки для мух

метомил - 1,0%

Экстракция неполярным растворителем

2. ПРОПОКСУР

О-(2-Изопропокси-карбонилпро-
пен-1-ил-2)-О-метил-N-этиламидо-
тио-фосфат

- Концентрат эмульсии (Пропоксур, 20% к.э.)

Разведение полярным растворителем

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности; температура колонки - 180 °С;

температура детектора - 230 °С;

температура испарителя - 230 °С;

время удерживания пропоксура - 2 мин 20 с

- Приманка для уничтожения тараканов (пропоксур - 2,0%)

Экстракция полярным растворителем



Подробно условия хроматографирования приведены в п.4.3.2.


4.3.5. Метод ГЖХ для определения регулятора размножения тараканов - S-гидропрена

Метод ГЖХ для определения регулятора размножения тараканов - S-гидропрена представлен в табл.4.5.

Таблица 4.5

Метод ГЖХ для определения регулятора размножения тараканов S-гидропрена

Действующие вещества, формы применения

Способ подготовки анализируемой пробы

Условия хроматографирования

S-Гидропрен

- Средство инсектицидное

регулятор размножения тараканов "S-Гидропрен" с содержанием основного вещества не менее 99,1%

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - гексан;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 200 °С;

температура детектора - 250 °С;

температура испарителя - 250 °С;

время удерживания S-гидропрена - 3 мин 5 с



Подробно условия хроматографирования приведены в п.4.3.2.


4.3.6. Методы идентификации и количественного определения действующих веществ в репеллентных средствах

Основными репеллентами, широко применяемыми в сфере медицинской дезинсекции, являются диметилфталат ДМФ, N,N-диэтил-мета-толуамид ДЭТА, N-гексилоксиметилкапролактам акреп, этил-3-N-бутилацетамино-пропионат (репеллент ИР3535), 1-(1-метилпропокси-карбонил)-2-(2-гидроксиэтилен)-пиперидин (КБР).

Основные формы применения - аэрозольные баллоны, растворы в беспропеллентной упаковке БАУ, лосьоны, эмульсии, кремы, карандаши, салфетки.

Наиболее востребованным репеллентом является ДЭТА. В составе аэрозольных баллонов, предназначенных для уничтожения кровососущих насекомых, его содержание - 10,0-20,0%, в составе аэрозольных баллонов, предназначенных для защиты от клещей - 30-32%. Часто ДЭТА комбинируют с другими репеллентами, например, в составе лосьонов с ДМФ, в сочетании с репеллентом ИР3535 в спреях или в сочетании с альфа-циперметрином в акароинсектицидных средствах в форме аэрозольных баллонов.

Акреп - репеллент отечественного производства - используется для изготовления эмульсий, как правило, в сочетании с ДМФ.

В качестве субстанций в настоящее время зарегистрированы репеллент ИР3535 производства фирмы "Мерк" Германия и ДЭТА производства фирмы "МакЛафлин Гормли Кинг" США.

Анализ всех репеллентов осуществляют методом ГЖХ на хроматографе с ПИД и количественной оценкой ДВ методом абсолютной градуировки или методом "внутреннего эталона" по дипропилфталату или по дифенилу.

Основная задача при анализе различных репеллентных средств заключается в количественном выделении ДВ из препаративной формы путём подбора оптимальных условий выделения: растворителя для экстракции ДВ, времени экстракции, температурного режима. Наименьший коэффициент извлечения (85-90%) достигается при анализе кремов, что обусловлено их сложным составом.

В табл.4.6 представлен анализ репеллентов в обобщённом виде для различных препаративных форм. Для каждого репеллента приведены наиболее распространённые формы применения, ДВ в препаративной форме, условия хроматографирования, растворитель для экстракции и коэффициент извлечения ДВ.

Таблица 4.6

Газохроматографический метод анализа репеллентов в различных формах применения

Название ДВ, формы применения

Способ подготовки анализируемой пробы

Условия хроматографирования

1

2

3

1. ДМФ

Диметилфталат

Формы применения:

- Репеллентное средство

лосьон (ДМФ - 30%)

Разведение этиловым спиртом

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки [18] или методом "внутреннего эталона" по дециловому спирту;


растворитель - этиловый спирт;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности; температура колонки -160 °С;

температура детектора - 170 °С;

температура испарителя - 160 °С;

время удерживания ДМФ - 2 мин 30 с

- Репеллентное средство в виде водно-спиртового раствора в БАУ

ДЭТА - 14,0%;

ДМФ - 9,0%

Разведение этиловым спиртом

- Репеллентное средство в форме эмульсии

ДМФ - 20,0%;

акреп - 20,0%

Разведение этиловым спиртом

Количественная оценка методом "внутреннего эталона" по дипропилфталату;

время удерживания ДМФ - 3 мин 30 с;

время удерживания акрепа - 5 мин 55 с

2. ДЭТА

N,N-диэтил-мета-толуамид

Формы применения:

Репеллентное средство в аэрозольной упаковке

ДЭТА - 25,0%

Удаление пропеллента путем испарения, разбавление состава растворителем

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки или методом "внутреннего эталона" по дибутилфталату;

растворитель - этиловый спирт;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности; температура колонки - 170 °С;

температура детектора - 180 °С;

температура испарителя - 190 °С;

время удерживания ДЭТА - 3 мин 30 с

- Инсектицидно-репеллентное средство в аэрозольной упаковке

ДЭТА 15,0%;

альфа-циперметрин - 0,18%

- Инсектоакарицидное средство (ДЭТА - 30,0%) в форме аэрозольного баллона

Удаление пропеллента путем испарения, разбавление состава растворителем

- Репеллентное средство в форме водно-спиртового раствора БАУ ДЭТА - 10,0%

Разведение полярным растворителем

- Репеллентное средство в виде карандаша

ДЭТА - 17,5%

Экстракция полярным растворителем

- Средство репеллентное в виде карандаша

ДЭТА - 15,0%

Экстракция этиловым спиртом

- Репеллентное средство в виде крем-геля

ДЭТА - 17,5%

Экстракция смесью ацетон:четырёххлористый углерод (1:1)

3. ИР3535

Этил-3-(N-бутил-
ацетамидо)-пропионат

Субстанция "ИР 3535" - технический продукт, содержащий не менее 98,0% основного вещества

Растворение в неполярном растворителе

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - четырёххлористый углерод;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 150 °С;

температура детектора - 210 °С;

температура испарителя - 210 °С;

время удерживания ИР3535 - 2 мин 30 с

Формы применения:

- Репеллентное средство антикомариный спрей для детей, в форме БАУ

ИР3535 - 12,0%

Разбавление этиловым спиртом

- Репеллентное средство антикомариный спрей для взрослых

ИР3535 - 4,0%;

ДЭТА - 5,0%;

гександиол - 5,0%

Разбавление этиловым спиртом

Температура колонки - 130-160 °С;

температура детектора и испарителя - 230 °С;

время удерживания:

гександиола - 2 мин 20 с;

ДЭТА - 6 мин 23 с;

ИР 3535 - 6 мин 45 с

4. КБР

1-Пиперидинкарбоновая кислота,2-(2-гидроксиэ-
тил)-1-метилпропиловый эфир

Формы применения:

Лосьоны:

- Репеллентное средство лосьон в форме водно-спиртового раствора БАУ

КБР - 20,0%

Разведение этиловым спиртом

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки;

растворитель - этиловый спирт;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 160 °С;

температура детектора - 200 °С;

температура испарителя - 200 °С;

время удерживания КБР - 3 мин 50 с

- Репеллентное средство молочко для защиты от летающих насекомых в форме эмульсии

КБР - 10,0%

Разведение этиловым спиртом

Крем:

- Репеллентное средство крем для защиты от летающих насекомых

КБР - 10,0%

Разведение этиловым спиртом

5. АКРЕП

N-(Гексилоксиме-
тил)-капролактам

Формы применения:

Репеллентное средство в форме эмульсии

акреп - 22,0%;

ДМФ - 18,0%

Экстракция неполярным растворителем

Метод ГЖХ с ПИД;

количественная оценка - методом абсолютной градуировки или методом "внутреннего эталона" по дипропилфталату или по дифенилу;

растворитель - этиловый спирт;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2,0 мг/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

температура колонки - 160-190 °С;

температура детектора - 230 °С;

температура испарителя - 230 °С;

время удерживания акрепа - 5 мин 55 с

Метод "внутреннего эталона" по дифенилфталату

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности- 0,90-0,95



Подробно условия хроматографирования приведены в п.4.3.2.


4.4. Методы исследований дератизационных средств


В средствах для медицинской дератизации применяют действующие вещества ДВ различной химической природы и различного механизма действия. В настоящее время в России зарегистрированы родентицидные ДВ, представляющие собой яды острого типа действия и яды пролонгированного действия - антикоагулянты индандионового и кумаринового ряда.

Острые яды, такие как фосфид цинка, глифтор и нафтилтио-мочевина, имеют ограниченное применение. Наибольшее применение получили ДВ пролонгированного действия - антикоагулянты индандионового (дифенацин, этилфенацин, изопропилфенацин, хлорфасинон) и кумаринового ряда (зоокумарин и его натриевая соль, бромадиолон, бродифакум, дифетиалон, дифенакум, куматетралил).

Дератизационные средства выпускают в различных препаративных формах: в виде ДВ (индивидуальных и смесевых) с содержанием основного вещества от 30 до 99,8%, жидких и диспергированных твердых порошки концентратов с содержанием ДВ от 0,25 до 2,5%, а также в виде отравленных приманок на пищевой основе с содержанием ДВ от 0,0025 до 3%.

Специфическими требованиями к выпускаемым препаративным формам дератизационных средств являются обязательное добавление интенсивных красителей и горечи (бензоат натрия, битрекс), которые обеспечивают отличие отравленных приманок от пищевых продуктов и предохраняют от случайного отравления на этапах производства и применения дератизационных средств. Исключение составляют фосфид цинка и 1-нафтилтиомочевина, собственная окраска которых не требует дополнительного предупредительного окрашивания.

Основными показателями, которые позволяют идентифицировать средство, являются внешний вид, цвет и содержание ДВ. Внешний вид и цвет определяют визуально. Выбор метода определения ДВ зависит от его физико-химических свойств и уровня содержания, а также состава инертных компонентов в рецептуре средства.

Разнообразие физико-химических свойств ДВ, применяемых в дератизационных средствах, обусловливает возможность применения различных методов их определения: химических - титрование, и физико-химических инструментальных методов - спектрофотометрия, газовая хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография.

4.4.1. Методы определения фосфида цинка в дератизационных субстанциях и средствах

Фосфид цинка ZnР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиPР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности представляет собой порошок темно-серого цвета. Действующим веществом является фосфин (фосфористый водород) - РНР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, выделяющийся при гидролизном расщеплении фосфида цинка. В качестве примесей технический фосфид цинка может содержать металлический цинк, оксиды цинка и оксиды железа.

Анализ ДВ в техническом продукте фосфида цинка проводят объемным волюмометрическим методом [27] или титриметрическим методом. Указанные методы применимы для анализа фосфида цинка и в препаративных формах дератизационных средств.

Поскольку ратицидная активность фосфида цинка определяется именно токсичностью фосфина, образующегося при кислотном гидролизе фосфида цинка, его определение является предпочтительным для оценки качества дератизационного средства.

Объемный волюмометрический метод определения фосфида цинка основан на кислотном гидролизе фосфида цинка и измерении объема выделившегося фосфина с применением водного раствора сернокислой меди.

Содержание ДВ может быть охарактеризовано по фосфидному фосфору или по фосфидному цинку, которые вычисляют по результатам измерения объема фосфина.

Метод избирателен, примеси в техническом продукте и другие компоненты рецептурного состава в дератизационных средствах не мешают определению.

Приборы, реактивы и растворы. Специальный прибор для измерения объема выделившегося фосфина, в котором последовательно соединены капельная воронка вместимостью 50 мл, круглодонная колба вместимостью 25-30 мл, измерительная ячейка вместимостью 100 мл, снабженная водяной рубашкой и уравнительным сосудом с затворной жидкостью - раствором хлористого натрия; поглотительный сосуд с раствором сернокислой меди; весы аналитические; 20%-й раствор соляной кислоты; 5%-й раствор сернокислой меди - поглотительная жидкость; насыщенный раствор хлористого натрия - затворная жидкость; азот газообразный; вода дистиллированная.

Выполнение анализа. Масса средства для анализа берется из расчета 20-80 мг фосфидного фосфора или 80-400 мг фосфидного цинка в пробе. Анализируемую пробу средства, взвешенную в граммах с точностью до четвертого десятичного знака (около 0,15 г фосфида цинка или около 4 г зерновой приманки), помещают в круглодонную колбу, присоединяют к коммуникациям прибора и, заполнив измерительную бюретку затворной жидкостью, продувают слабым потоком азота в течение двух минут, после чего в капельницу при закрытом кране наливают около 20 мл раствора соляной кислоты. Затем по каплям подают раствор в круглодонную колбу, содержащую анализируемое средство, для разложения фосфида цинка. Постепенно нагревают содержимое колбы до кипения. По окончании реакции газ, оставшийся в колбе, вытесняют в измерительную бюретку насыщенным раствором хлористого натрия. После охлаждения газа в бюретке замеряют его объём. Затем с помощью прибора проводят поглощение фосфина раствором сернокислой меди. Объём выделившегося фосфина определяют по разности объёма газа до и после его поглощения.

Обработка результатов. Измеренный объём фосфина приводят к нормальным условиям (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, мл) по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, *


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем фосфина, измеренный в опыте, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - атмосферное давление, Па (мм рт.ст.);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - упругость водяных паров над насыщенным раствором хлористого натрия, Па (мм рт.ст.);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - нормальное атмосферное давление, равное 10325 Па (760 мм рт.ст.);

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - температура газа, °С.

_______________
* Формула и экспликация к ней соответствуют оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.


Массовую долю фосфина в средстве (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где 0,001518 - масса фосфина, содержащаяся в 1 мл газообразного фосфина, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая для анализа, г.

Для того чтобы вычислить массовую долю фосфидного фосфора в техническом продукте, измеренный объем фосфина пересчитывают на фосфидный фосфор (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) в процентах по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где 0,001318 - масса фосфидного фосфора, содержащаяся в 1 мл газообразного фосфина, г.

Массовую долю фосфидного цинка (Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) в процентах вычисляют из соотношения:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где 4,16 - масса фосфида цинка, соответствующая 1 г фосфидного фосфора, определяемая из отношения молекулярной массы фосфида цинка к массе двух атомов фосфора 258,06 г/2Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности31 г.

Титриметрический метод определения фосфидного цинка в техническом продукте субстанции [27] основан на раздельном титровании общего и свободного металлического цинка. Содержание фосфидного цинка определяют по разности полученных результатов.

Приборы, реактивы и растворы. Весы аналитические; бюретка и стеклянная мерная посуда; точно 0,1 н раствор тиосульфата натрия; 10%-й раствор йодистого калия; 1 М раствор гидроокиси натрия; аммиачно-хлоридный буфер с рН 10,0-10,5; 0,1 М раствор уксусной кислоты; 2 М раствор серной кислоты; 0,1 М раствор сернокислой меди; точно 0,1 н раствор трилона Б; 1%-й раствор крахмала индикатор; эриохром черный Т индикатор.

Выполнение анализа.

Определение металлического цинка.


В мерную колбу вместимостью 25 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности вносят навеску фосфида цинка массой 0,1 г, взвешенную с точностью до 0,0002 г, или эквивалентное количество отравленной приманки. Приливают 5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 М раствора сульфата меди. Смесь оставляют на 30 мин, периодически встряхивая. Затем раствор отфильтровывают через бумажный фильтр, осадок промывают на фильтре дважды по 5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности дистиллированной воды, приливают к фильтрату 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 М уксусной кислоты, 5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 10%-го раствора йодистого калия. Выделившийся йод титруют 0,1 н раствором тиосульфата натрия до слабо-желтой окраски. Аналогично титруют 5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 М раствора сульфата меди после прибавления 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 0,1 М уксусной кислоты и 5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 10%-го раствора йодистого калия холостую пробу.

Обработка результатов. Массовую долю металлического цинка в средстве Zn, % вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, *

_________________
* Формула и экспликация к ней соответствуют оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

где 0,00327 - масса цинка, соответствующая 1 мл точно 0,1 н раствора тиосульфата натрия, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем 0,1 н раствора тиосульфата натрия, израсходованный на титрование холостой пробы, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем 0,1 н раствора тиосульфата натрия, израсходованный на титрование холостой пробы, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая на анализ, г.

Определение массовой доли основного вещества. К навеске технического образца фосфида цинка массой 0,1 г, взвешенной с точностью до 0,0002 г, или к эквивалентному количеству отравленной приманки прибавляют 5-10 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 5 М серной кислоты, 25 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности дистиллированной воды и кипятят в течение 15 мин. Смесь охлаждают и нейтрализуют 1 М раствором гидроксида натрия до рН 3-5, приливают 5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности аммиачно-хлоридного буфера с рН 10-10,5 и титруют раствором трилона Б с применением индикатора эриохрома черного Т до перехода окраски от красно-фиолетовой до синей.

Обработка результатов. Содержание фосфидного цинка в средстве (ZnР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиPР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) в процентах определяют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где 0,00863 - масса ZnР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиPР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, соответствующая 1 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности точно 0,1 н раствора трилона Б, г;

Zn - массовая доля металлического цинка в пробе, определенная при титровании тиосульфатом натрия, %;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем 0,1 н раствора трилона Б, израсходованный на титрование, смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая на анализ, г;

(VР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности0,00863Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности100/m) - суммарное содержание фосфидного и металлического цинка, найденное при титровании тиосульфатом натрия, %.

4.4.2. Методы определения 1-1-нафтил-2-тиомочевины в дератизационных субстанциях и средствах

4.4.2.1. Спектрофотометрические методы определения 1-1-нафтил- 2-тиомочевины

Определение 1-1-нафтил-2-тиомочевины НТМ спектрофотометрическим методом по собственному поглощению в ультрафиолетовой области спектра основано на измерении оптической плотности растворов НТМ при длине волны в диапазоне 280-300 нм.

Определению могут мешать вещества, поглощающие в указанном волновом диапазоне. Метод может использоваться при серийном анализе в условиях производства.

Приборы и реактивы. Для выполнения анализа применяется спектрофотометр СФ-26, СФ-46 или другой марки; стандартная стеклянная мерная посуда; весы аналитические; этиловый спирт 96%.

Выполнение анализа. Подготовка пробы к спектрофотометрическому измерению включает растворение технического продукта в этиловом спирте для последующего фотометрирования. Из препаративной формы средства в виде приманки проводят извлечение ДВ 96% этиловым спиртом при повышенной температуре (60 °С) в течение 15 мин. Оптическую плотность приготовленного раствора измеряют при длине волны 285 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют экстракт, полученный в таких же условиях из "холостой" пробы (не содержащей НТМ).

Обработка результатов. Массовую долю ДВ в средстве Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - оптическая плотность раствора;

202,3 - молекулярная масса НТМ;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - кратность разведения экстракта;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем экстракта, л;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности8400 - значение молекулярного коэффициента поглощения НТМ при 285 нм, л/моль·см;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - толщина поглощающего слоя, см.

Применение справочного значения молярного коэффициента поглощения НТМ при длине волны 285 нм позволяет исключить построение калибровочного графика.

Для определения НТМ в дератизационных средствах применяют также спектрофотометрический метод, основанный на измерении оптической плотности раствора азосоединения, образующегося при взаимодействии НТМ и сульфанилата диазония, при длине волны 490 нм.

Метод избирателен.

Приборы, реактивы и растворы. Для выполнения анализа применяется спектрофотометр СФ-26, СФ-46 или электрофотоколориметр КФК-2; стандартная стеклянная мерная посуда, весы аналитические; этиловый спирт 96%, аналитический стандарт НТМ; раствор сульфанилата диазония с массовой концентрацией 5 мг/мл; 0,1М раствор соляной кислоты; 0,1М раствор натрия гидроокиси.

Выполнение анализа. При анализе дератизационного средства в виде приманки ДВ извлекают 96% этиловым спиртом при повышенной температуре (60 °С) и вносят в аликвоту экстракта реактивы, необходимые для получения азосоединения: раствор НТМ с концентрацией 0,1 мг/мл; раствор сульфанилата диазония с концентрацией 5 мг/мл и 0,1 М раствор соляной кислоты. Смесь выдерживают в течение 5 мин, затем добавляют 0,1 М раствор гидроокиси натрия и фотометрируют при длине волны 490 нм относительно "холостого" раствора калибровочного графика. Для построения калибровочного графика готовят калибровочные растворы азосоединения, эквивалентные содержанию в пробе 20, 40 и 60 мкг НТМ.

Обработка результатов. Массовую долю действующего вещества Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле, используя калибровочный график:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,

где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - содержание НТМ в аликвоте, найденное по калибровочному графику, мкг;

10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - коэффициент пересчета из мкг в г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - кратность разведения пробы;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая на анализ, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - толщина поглощающего слоя, см.

4.4.2.2. Хроматографический метод определения 1-1-нафтил-2-тиомочевины

Анализ НТМ в зерновой приманке проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением спектрофотометрического детектирования, градиентного режима хроматографирования и использованием абсолютной градуировки.

Метод избирателен, компоненты рецептурного состава средства не мешают определению.

Приборы, реактивы и растворы. Аналитический жидкостный хроматограф, снабженный спектрофотометрическим детектором, градиентной системой, инжектором с дозирующей петлей 5-10 мкл, программой обработки хроматографических данных на базе персонального компьютера; весы аналитические; магнитная мешалка; ротационный испаритель; стандартная стеклянная мерная посуда; НТМ - аналитический стандарт; рабочая градуировочная смесь НТМ в ацетонитриле с массовой концентрацией 0,1 мг/мл; ацетонитрил градации для жидкостной хроматографии; хлористый метилен ч.д.а.; вода бидистиллированная.

Выполнение анализа. Подготовка пробы к анализу предусматривает извлечение ДВ из средства хлористым метиленом в течение 4 ч с помощью магнитной мешалки. Из отфильтрованного экстракта под разрежением отгоняют растворитель, сухой остаток растворяют в ацетонитриле и хроматографируют. Предварительно хроматографируют рабочую градуировочную смесь. Из полученных хроматограмм определяют удерживаемый объём и площади хроматографических пиков НТМ в градуировочной смеси и в анализируемом растворе.

Хроматографирование проводят на колонке для обращенно-фазной хроматографии типа ACCUBOND ODS 5 мкм. В качестве элюентов используют ацетонитрил и воду. Градиент по ацетонитрилу от 40 до 100%. Длина волны измерений 290 нм.

Обработка результатов. Массовую долю НТМ в средстве Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площади хроматографических пиков определяемого вещества в анализируемой пробе и рабочей градуировочной смеси;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая концентрация аналитического стандарта определяемого вещества в рабочей градуировочной смеси;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая доля основного вещества в аналитическом стандарте, %;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем анализируемого раствора, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая на анализ, мг.

4.4.3. Методы определения индандионов в дератизационных субстанциях и средствах

Особенности химико-аналитических исследований дератизационных ДВ субстанций для производства препаративных форм определяются их составом: содержанием основного вещества, уровнем примесей и содержанием технологических добавок. Для анализа применяют титрование раствором гидроокиси натрия, спектрофотометрические методы с прямым фотометрированием определяемого вещества и в виде окрашенных комплексов, высокоэффективную жидкостную хроматографию со спектрофотометрическим детектированием в ультрафиолетовой области спектра.

4.4.3.1. Титриметрический метод определения дифенацина, этилфенацина и изопропилфенацина

Определение содержания ДВ в субстанциях дифенацина, этилфенацина и изопропилфенацина и концентратах титриметрическим методом [41] основано на титровании индандиона раствором гидроокиси натрия в среде органического растворителя (диоксан, этанол, ацетон) с добавлением индикатора (бромтимоловый синий, феноловый красный) или с применением потенциометрических измерений.

Метод не избирателен, определению могут мешать вещества, титруемые гидроокисью натрия, в связи с этим метод не применим для определения действующего вещества в таких технических продуктах как трифенацин, тетрафенацин.

Метод может быть рекомендован для рутинных анализов в условиях производства.

Приборы, реактивы и растворы. Весы аналитические; бюретка вместимостью 25 мл; стандартная стеклянная мерная посуда; диоксан; 0,1 М раствор гидроокиси натрия; спиртовый раствор бромтимолового синего индикатор; иономер универсальный ЭВ-74 со стеклянным и каломельным электродами.

Выполнение анализа. Анализируемую пробу растворяют в диоксане и титруют с помощью раствора гидроокиси натрия в присутствии индикатора бромтимолового синего с визуальным или потенциометрическим определением конца титрования.

Обработка результатов. Массовую долю определяемого вещества Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по известной формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем точно 0,1 М раствора гидроокиси натрия, израсходованный на титрование пробы, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса определяемого вещества, соответствующая 1 мл точно 0,1 М раствора гидроокиси натрия, г/мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г.

4.4.3.2. Спектрофотометрические методы определения дифенацина, этилфенацина и изопропилфенацина

Определение дифенацина, этилфенацина, изопропилфенацина, хлорфасинона в дератизационных субстанциях (технический продукт, жидкие и диспергированные твердые концентраты) и в препаративных формах проводят спектрофотометрическим методом с прямым определением вещества или в виде окрашенных комплексов.

Спектрофотометрический метод прямого определения изопропилфенацина основан на измерении оптической плотности индан-1,3-диона, в растворе органического растворителя при длине волны 325 и 340 нм относительно растворителя с применением градуировочного графика или молярных коэффициентов поглощения.

Метод избирателен в отсутствии компонентов рецептурного состава средства, поглощающих в указанной области длин волн. Не избирателен в присутствии нескольких веществ индандионового ряда, которые определяются суммарно.

Метод может быть применён для серийного анализа в условиях производства.

Приборы, реактивы и растворы. Для проведения анализа используют спектрофотометр типа СФ-46; стеклянную мерную посуду; этиловый спирт.

Выполнение анализа. Подготовка пробы к анализу заключается в выделении ДВ в раствор. Способ выделения определяемого вещества зависит от рецептурного состава средства. Технический продукт растворяют; из концентратов и приманок ДВ извлекают жидкостной экстракцией с применением этилового спирта и фотометрируют на спектрофотометре при двух длинах волн.

Обработка результатов. Содержание индан-1,3-диона определяют, используя калибровочный график в координатах: оптическая плотность - содержание вещества, мг.

При использовании значений молярных коэффициентов поглощения определяемого индан-1,3-диона содержание ДВ Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности*


Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности* - разница оптической плотности анализируемого раствора при разных длинах волн;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - молекулярная масса определяемого индан-1,3-диона, г/моль;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора или экстракта, л;

1,10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - разность молярных коэффициентов поглощения индан-1,3-диона при 325 и 340 нм, л/моль·см;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - толщина поглощающего слоя, см.

__________________
* Формула и экспликация к ней соответствуют оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.


Спектрофотометрический метод определения дифенацина, этилфенацина и изопропилфенацина в виде окрашенных комплексов основан на образовании водорастворимых окрашенных комплексов ионов железа III с индандионами и измерении их оптической плотности при длине волны 490 нм с применением калибровочного графика или молярных коэффициентов поглощения.

Метод избирателен в отношении традиционно применяемых красителей и других экстрагируемых компонентов рецептурного состава средства. Не избирателен в присутствии нескольких веществ индандионового ряда, которые определяются суммарно.

Метод может быть применён для серийного анализа в условиях производства.

Приборы, реактивы и растворы. Для проведения анализа используют электрофотоколориметр типа КФК или спектрофотометр типа СФ-46; стеклянную мерную посуду; диоксан; 6%-й раствор железа треххлористого.

Выполнение анализа. Подготовка пробы к анализу заключается в выделении ДВ в раствор. Способ выделения определяемого вещества зависит от рецептурного состава средства. Технический продукт растворяют; из концентратов и приманок действующие вещества извлекают жидкостной экстракцией с применением диоксана.

Навеску технического продукта из расчета получения молярной концентрации раствора 2-4·10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности М растворяют в смешивающемся с водой растворителе (диоксан, ацетон) с добавлением небольшого количества воды (до 5%) и 6%-го водного раствора FeClР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности·6НР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасностиО. Оптимальная концентрация Felll 2·10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности М. Раствор фотометрируют при 490 нм. Содержание определяемого индан-1,3-диона вычисляют, используя калибровочный график или молярный коэффициент поглощения комплекса определяемого индан-1,3-диона с железом.

Обработка результатов. Содержание индан-1,3-диона определяют, используя калибровочный график в координатах: оптическая плотность - содержание вещества, мг.

При использовании значений молярных коэффициентов поглощения комплекса определяемого индан-1,3-диона с железом содержание действующего вещества Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности*

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности* - разница оптической плотности анализируемого и контрольных растворов;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - молекулярная масса определяемого индандиона, г/моль;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора или экстракта, л;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - молярный коэффициент поглощения комплекса железа III с индандионом, л/моль·см;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса пробы, взятой на анализ, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - коэффициент, учитывающий разбавление фотометрируемого раствора водой и солью железа;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - толщина поглощающего слоя, см.
_________________
* Формула и экспликация к ней соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

Экспериментально установлены значения молярных коэффициентов поглощения комплекса железа III для некоторых веществ: дифенацин 1300±60; хлорфасинон 1260±80; изопропил-фенацин 1100±80; этилфенацин 960±80.

4.4.3.3. Хроматографические методы определения антикоагулянтов индандионового ряда

Определение антикоагулянтов индан-1,3-дионового ряда (дифенацин, изопропилфенацин, хлорфасинон, этилфенацин) в субстанциях (технические продукты, жидкие и порошковые концентраты) и различных препаративных формах дератизационных средств проводят методом прямой или обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии с применением спектрофотометрического детектирования. Для идентификации и хроматографических измерений антикоагулянтов индан-1,3-дионового ряда применяют спектрофотометрические детекторы на диодной матрице для измерений в области 190-400 нм и детекторы для измерений при одной длине волны. Надежность идентификации ДВ, характеризующихся близкими спектрами поглощения в ультрафиолетовой области, достигается использованием двух критериев: 1) спектр поглощения в области 190-400 нм; 2) время удерживания в заданных условиях хроматографических измерений.

При анализе технических продуктов (трифенацин, тетрафенацин), представляющих собой малоочищенную технологическую смесь, в которой содержится несколько индандионов с разным содержанием, применение диодноматричного детектора позволяет записать спектры поглощения каждого пика хроматограммы в диапазоне 190-400 нм и идентифицировать индандионы по спектрам поглощения в рабочей градуировочной смеси и испытуемой пробе.

Специфические условия подготовки пробы для анализа обусловливаются содержанием действующего вещества и свойствами ингредиентов рецептуры средства (технологические и функциональные добавки, в т.ч. натуральные пищевые аттрактанты).

Технические продукты и жидкие концентраты растворяют в растворителе, совместимом с хроматографической подвижной фазой. Из порошковых концентратов и пищевых приманок требуется выделение действующего вещества в органическую фазу с помощью экстракции. При этом из-за низкого уровня содержания ДВ в пищевых приманках на фоне сложного рецептурного состава и пищевой основы повышаются требования к селективному выделению действующего вещества и условиям эффективного хроматографического разделения компонентов пробы.

Хроматографический метод определения индандионов с применением прямофазной высокоэффективной хроматографии основан на применении УФ-детектирования, хроматографировании пробы на аминной колонке в изократическом режиме с использованием абсолютной градуировки. В качестве элюента (подвижной фазы) применяют смесь ацетонитрил: вода в соотношении 80:20 по объему.

Избирательность метода. Метод избирателен в присутствии нескольких ДВ индан-1,3-дионового ряда. Определению не мешают технологические примеси в техническом продукте.

Приборы. Аналитический жидкостный хроматограф "Стайер" или другого типа, снабженный спектрофотометрическим детектором на диодной матрице или детектором для измерений при одной длине волны в ультрафиолетовой области спектра, термостатируемой колонкой, изократической системой микронасосов, инжектором типа "Реодайн" (или другого типа) с дозирующей петлей объемом от 5 до 20 мкл, программой управления оборудованием и обработки хроматографических данных на базе персонального компьютера; хроматографическая колонка, как правило, заводского заполнения сорбентом, с соответствующей предколонкой; микрошприц вместимостью 100-250 мкл для ручного ввода пробы в инжектор и промывки инжектора; фильтрующее устройство с фильтром 0,45 мкм; ультразвуковая ванна для дегазации элюентов и подготовки пробы; общелабораторное оборудование (аналитические весы с точностью взвешивания до 0,1 мг; мерная стеклянная посуда).

Реактивы и растворы. Ацетонитрил градации для жидкостной хроматографии (210-230 нм), вода бидистиллированная или очистки супер-q на оборудовании "Миллипор". Подвижная фаза (элюент) - ацетонитрил:вода (80:20 по объему), дегазированная перед использованием с помощью ультразвуковой ванны или потока гелия. Сорбенты для прямофазной хроматографии типа сепарон SGXNHР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, лихросорб NHР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.

Выполнение анализа. Точную навеску технического продукта около 0,05-0,1 г (0,5-0,7 г жидкого концентрата) или аналитического стандарта определяемого вещества помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в 5-7 мл хлороформа, затем проводят разбавление приготовленного раствора элюентом (из расчета получения концентрации в рабочей градуировочной смеси и испытуемом растворе 0,010-0,005 мг/мл) и 4 мкл приготовленного раствора вводят в хроматограф. Условия хроматографирования: колонка типа сепарон SGXNH2* 5 мкм (150Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности3,3 мм); скорость элюента - 0,4 мл/мин; температура колонки 60 °С. Спектрофотометрические измерения проводят при длине волны 288 нм.
___________________
* Текст документа соответствует оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.

Из полученных хроматограмм рабочей градуировочной смеси определяют время удерживания и площадь хроматографического пика определяемого вещества в рабочей градуировочной смеси. По совпадению времени удерживания на хроматограммах градуировочной смеси и хроматограммах анализируемой пробы проводят идентификацию веществ и вычисляют площади их хроматографических пиков в пробе.

Обработка результатов. Вычисление массовой доли ДВ в средстве Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах с применением абсолютной градуировки проводится по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площади хроматографических пиков определяемого вещества в испытуемой пробе и рабочей градуировочной смеси;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая концентрация аналитического стандарата определяемого вещества в рабочей градуировочной смеси, мг/мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая доля основного вещества в аналитическом стандарте, %;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора пробы, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - кратность разведения раствора пробы;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса анализируемой пробы, мг.

В отсутствие стандартных образцов определяемых веществ при анализе дератизационных субстанций в виде малоочищенной технологической смеси (трифенацин, тетрафенацин) в качестве аналитического стандарта может быть принят стандарт дифенацина, имеющий квалификацию государственного стандартного образца. Массовую долю ДВ вычисляют по сумме площадей всех хроматографических пиков, характеризующихся спектрами индан-1,3-дионов.

При вычислении содержания примесей в техническом продукте может быть применен метод нормализации площадей.

Хроматографический метод определения индандионов с применением обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии основан на применении УФ-детектирования, хроматографировании пробы в градиентном режиме и использовании абсолютной градуировки.

Хроматографирование проводят на колонках, заполненных сорбентом типа сепарон С18, ультрасфер ODS партисил ODS 2; в качестве элюента используют смеси растворителей, приготавливаемые по объёму: метанол:изопропанол:0,1%-й раствор фосфорной кислоты в соотношении 65:15:20, ацетонитрил:0,2%-й раствор фосфорной кислоты в соотношении 75:25, а также применяют другие хроматографические системы сорбент-элюент для обращенно-фазной хроматографии.

Метод избирателен. Спектрофотометрическому измерению дифенацина, этилфенацина, изопропилфенацина и хлорфасинона не мешают технологические и функциональные добавки, типичные для рецептурного состава приманок: битрекс, бензоат натрия, красители. В зависимости от состава пищевой основы экспериментально подбирают условия экстракционного выделения ДВ и очистки экстракта с помощью тест-пробы.

Выполнение анализа

Подготовка пробы. В навеску зерновой приманки массой 10-20 г добавляют 100 мл органического растворителя и проводят экстрагирование с помощью ультразвуковой ванны в течение 30-50 мин. В качестве экстрагента может быть применен ацетонитрил; ацетонитрил, подкисленный уксусной кислотой (1% об.); ацетонитрил:метанол в соотношении 1:1 и др. После отстаивания отбирают аликвоту экстракта, фильтруют через фильтр 0,45 мкм и хроматографируют в градиентном режиме обращенно-фазной хроматографии.

При анализе зерновой приманки в виде парафинированного брикета может быть использована последовательная экстракция растворителями разной полярности. Сначала проводят экстракцию небольшими порциями гексана при интенсивном перемешивании на магнитной мешалке. Экстракцию повторяют несколько раз, проэкстрагированный гексаном образец подсушивают до воздушно-сухого состояния, после чего проводят экстракцию ацетонитрилом с помощью ультразвуковой ванны в течение 30 мин. В гексановый экстракт добавляют сорбент - оксид алюминия и после выдерживания в течение 20-30 мин фильтруют. Осадок на фильтре промывают ацетонитрилом, полученный фильтрат вносят в подсушенный образец и проводят экстракцию ацетонитрилом с помощью ультразвуковой ванны в течение 30 мин. После отстаивания отбирают аликвоту экстракта, фильтруют через фильтр 0,45 мкм и хроматографируют в градиентном режиме обращенно-фазной хроматографии.

Условия хроматографирования: колонка типа LUNA С18 3 мкм (150Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности3,3 мм); элюент А - ацетонитрил; элюент Б - 0,16%-й раствор фосфорной кислоты. Градиент по ацетонитрилу от 60 до 85% за 10 мин; скорость подвижной фазы 0,4 мл/мин; температура колонки - комнатная; объем хроматографируемой дозы 10 мкл. Примерное время удерживания хлорфасинона 8,9 мин, дифенацина 10,2 мин.

Идентификацию определяемого вещества проводят сравнением времени удерживания в градуировочной смеси и анализируемой пробе при одной длине волны в интервале 250-280 нм, дополнительно могут быть использованы спектры поглощения в области 190-400 нм в исследуемой пробе и градуировочной смеси.

Обработка результатов. Массовую долю ДВ в приманке Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах с применением абсолютной градуировки вычисляют с учетом фактора извлечения Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площади хроматографических пиков определяемого вещества в анализируемой пробе и рабочей градуировочной смеси;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая концентрация анализируемого стандарта определяемого вещества в рабочей градуировочной смеси, мг/мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая доля основного вещества в аналитическом стандарте, %;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора пробы, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - кратность разведения раствора пробы;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса пробы, взятая на анализ, мг;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - фактор извлечения устанавливают по контрольному образцу с известным содержанием определяемого вещества, Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности .

4.4.4. Методы определения антикоагулянтов кумаринового ряда

4.4.4.1. Спектрофотометрические методы определения зоокумарина и бромадиолона

Определение зоокумарина и бромадиолона в дератизационных средствах спектрофотометрическим методом может быть проведено по собственному поглощению в ультрафиолетовой части спектра и по измерению оптической плотности растворов натриевой соли.

Спектрофотометрический метод определения зоокумарина и бромадиолона по собственному поглощению в ультрафиолетовой части спектра основан на измерении оптической плотности раствора пробы в органическом растворителе с использованием молярного коэффициента поглощения определяемого вещества.

Приборы, реактивы и растворы. Спектрофотометр СФ-26 или другого типа; весы аналитические; ротационный испаритель; стеклянная мерная посуда; 2%-й раствор натрия гидроокиси; хлороформ; диоксан; этанол; оксид алюминия для хроматографии.

Выполнение анализа. Зоокумарин (3%) из навески порошкового средства массой около 0,1 г экстрагируют 25 мл диоксана с помощью магнитной мешалки и разбавляют диоксаном в 10 раз, после фильтрования проводят измерение оптической плотности раствора при длине волны 310 нм.

Обработка результатов. Содержание зоокумарина в средстве Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, *


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - оптические плотности анализируемого раствора и раствора "холостой" пробы средства, не содержащей зоокумарина;

308,2 - молекулярная масса зоокумарина, г/моль;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем фотометрируемого раствора, мл;

10 - кратность разведения экстракта;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - молярный коэффициент поглощения зоокумарина в диоксане, равный 14500 л/моль·см;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, г;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - толщина поглощающего слоя, см.

___________________
* Формула и экспликация к ней соответствуют оригиналу. - Примечание изготовителя базы данных.


При определении бромадиолона (0,25%) в концентрате навеску средства массой около 0,04 г растворяют в 5 мл этанола. Измерения проводят при длинах волн 320 и 340 нм. При вычислении содержания бромадиолона применяют разность молярных коэффициентов поглощения бромадиолона при 320 и 340 нм, равную 7800 л/моль·см.

Метод не избирателен в присутствии растворимых веществ рецептурного состава средства, поглощающих в указанных областях спектра. Метод может быть применен для серийных анализов в условиях производства.

Спектрофотометрический метод определения зоокумарина по поглощению его натриевой соли основан на измерении при 306-308 нм оптической плотности раствора натриевой соли зоокумарина, получаемой с помощью 2%-го раствора гидроокиси натрия.

Метод не избирателен в присутствии веществ в пробе, поглощающих при длине волны измерения 306-308 нм. Метод может быть применен для серийных анализов в условиях производства.

Выполнение анализа. При анализе технического продукта пробу растворяют в 2%-м растворе гидроокиси натрия и измеряют оптическую плотность при 306-308 нм.

При анализе препаративных форм проводят извлечение хлороформом, при необходимости - сорбционную очистку экстракта на колонке с окисью алюминия. Растворитель отгоняют и растворяют сухой остаток в 2%-м растворе гидроокиси натрия. После фильтрования измеряют оптическую плотность при 308 нм, используя в качестве раствора сравнения "холостую пробу". Количество ДВ измеряют по калибровочному графику в интервале 25, 50, 100 и 200 мкг, для построения которого применяют стандартный раствор натриевой соли зоокумарина 0,1 мг/мл.

Обработка результатов. Массовую долю зоокумарина в средстве Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах вычисляют по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,


где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - содержание зоокумарина, найденное по калибровочному графику, мкг;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора средства, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора, взятый для анализа, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, взятая для анализа, г;

10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - коэффициент пересчета мкг в г.

4.4.4.2. Хроматографические методы определения антикоагулянтов оксикумаринового ряда

Определение антикоагулянтов кумаринового ряда (бродифакума, бромадиолона, дифетиалона, зоокумарина, куматетралила, флокумафена) в субстанциях (технических продуктах, жидких и порошковых концентратах) и различных препаративных формах дератизационных средств проводят методом прямой или обращенно-фазной высокоэфективной хроматографии с применением спектрофотометрического детектирования. Для идентификации и хроматографических измерений антикоагулянтов оксикумаринового ряда применяют спектрофотометрические детекторы для измерений при одной длине волны, а также детекторы на диодной матрице для измерений в области 190-400 нм, которые позволяют повысить надежность идентификации веществ за счет использования двух критериев: 1) спектр поглощения в области 190-400 нм; 2) время удерживания в заданных условиях хроматографических измерений.

Специфические условия подготовки пробы и спектрофотометрического детектирования обуславливаются содержанием ДВ и составом ингредиентов рецептуры средства (технологические и функциональные добавки, в т.ч. натуральные пищевые аттрактанты).

Субстанции (технические продукты и жидкие концентраты) растворяют в растворителе, совместимом с хроматографической подвижной фазой. Определение ДВ проводят в условиях прямой или обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии. При анализе технического продукта определяют содержание основного вещества с использованием абсолютной градуировки или "внутреннего эталона", для количественной оценки примесей применяют метод нормализации площадей.

Из порошковых концентратов требуется выделение ДВ в органическую фазу жидкостной экстракцией.

Из пищевых приманок также извлекают ДВ с помощью жидкостной экстракции. При этом из-за низкого уровня содержания ДВ (3-10%) в пищевых приманках на фоне сложного рецептурного состава и пищевой основы повышаются требования к селективному выделению ДВ и условиям эффективного хроматографического разделения компонентов пробы.

Метод избирателен. Определению бродифакума, бромадиолона, дифетиалона, зоокумарина, куматетралила, флокумафена не мешают технологические примеси в техническом продукте.

Приборы. Аналитический жидкостный хроматограф "Стайер" или другого типа, снабженный спектрофотометрическим детектором на диодной матрице или детектором для измерений при одной длине волны в ультрафиолетовой области спектра, термостатируемой колонкой, изократической системой микронасосов, инжектором типа "Реодайн" (или другого типа) с дозирующей петлей объемом от 5 до 20 мкл, программой управления оборудованием и обработки хроматографических данных на базе персонального компьютера.

Хроматографическая колонка, как правило, заводского заполнения сорбентом, с соответствующей предколонкой. Микрошприц вместимостью 100-250 мкл для ручного ввода пробы в инжектор и промывки инжектора. Фильтрующее устройство с фильтром 0,45 мкм. Ультразвуковая ванна для дегазации элюентов и подготовки пробы. Общелабораторное оборудование (аналитические весы с точностью взвешивания до 0,1 мг, мерная стеклянная посуда).

Реактивы и растворы. Ацетонитрил градации для жидкостной хроматографии (210-230 нм); уксусная кислота х.ч.; вода бидистиллированная или очистки cynep-q на оборудовании "Миллипор". Сорбенты для прямофазной и обращенно-фазной хроматографии типа сепарон SGX NH2, лихросорб NH2, MAX RP С12, зорбакс ODS, лихросорб RP 18 и др.

Элюент (подвижная фаза) - ацетонитрил:вода в соотношении 80:20 (по объему); ацетонитрил:вода:уксусная кислота в соотношении 80:20:1 (по объему), дегазированные перед использованием с помощью ультразвуковой ванны или потока гелия.

Выполнение анализа. Точную навеску технического продукта 0,05 г или аналитического стандарта определяемого вещества растворяют в мерной колбе вместимостью 50-100 мл в соответствующем органическом растворителе (ацетонитрил, этиловый спирт и др.) с помощью ультразвуковой ванны, затем проводят последовательное разбавление исходного раствора ацетонитрилом или элюентом (из расчета получения концентрации в рабочей градуировочной смеси и испытуемом растворе 0,010-0,005 мг/мл) и хроматографируют в условиях прямофазной или обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии. Из полученных хроматограмм рабочей градуировочной смеси определяют время удерживания и площадь хроматографического пика определяемого вещества в рабочей градуировочной смеси. Из хроматограмм испытуемой пробы проводят идентификацию определяемого вещества по совпадению времени удерживания и вычисляют площадь хроматографического пика в испытуемой пробе. Применение диодноматричного детектора позволяет записать и сравнить спектры поглощения хроматографического пика определяемого вещества в диапазоне 190-400 нм в рабочей градуировочной смеси и испытуемой пробе. Близким характером спектров поглощения характеризуются зоокумарин и куматетралил, бродифакум и бромадиолон.

Условия хроматографирования при прямофазной и обращенно-фазной высокоэффективной хроматографии приведены в табл.4.7.

Таблица 4.7

Параметры

Прямофазная высокоэффективная хроматография

Обращенно-фазная высокоэффективная хроматография

Подвижная фаза

Ацетонитрил:вода

80:20

Ацетонитрил:вода:уксусная кислота

80:20:1

Скорость подвижной фазы

0,5 мл/мин

0,5 мл/мин

Колонка

Сепарон NHР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 5 мкм

(150Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности3,3 мм)

Max RP (CР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) 4 мкм

(250Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности4 мм)

Температура колонки

37 °С

37 °С

Хроматографируемая доза

20 мкл

20 мкл



В указанных условиях бродифакум и бромадиолон детектируются двумя пиками стереоизомеров. Примерное относительное время удерживания действующих веществ по основному пику бромадиолона приведено в табл.4.8.

Таблица 4.8

Действующее вещество

Прямофазная высокоэффективная хроматография

Обращенно-фазная высокоэффективная хроматография

Дифетиалон

1,5

0,7

Бродифакум

1,4

0,8

Бромадиолон

1,0

1,0

Куматетралил

0,9

1,8

Зоокумарин

0,8

2,9



Обработка результатов. Вычисление массовой доли основного вещества Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах в техническом продукте с применением абсолютной градуировки проводится по формуле:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,*

где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности* - площадь хроматографического пика определяемого вещества в анализируемой пробе и рабочей градуировочной смеси;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая концентрация анализируемого стандарта определяемого вещества в рабочей градуировочной смеси, мг/мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая доля действующего вещества в аналитическом стандарте, %;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора пробы, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - кратность разведения пробы;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса средства, мг.

_________________
* Формула и экспликация к ней соответствует оригиналу. - Примечание изготовитля базы данных.

Определение ДВ в порошковых и жидких концентратах основано на разбавлении или экстракционном извлечении ДВ, разделении компонентов пробы в хроматографической системе сорбент - подвижная жидкая фаза элюент в изократическом режиме и последующем спектрофотометрическом измерении в элюате определяемого вещества с применением абсолютной градуировки.

Метод избирателен. Спектрофотометрическому измерению бродифакума, бромадиолона, дифетиалона, зоокумарина, куматетралила, флокумафена не мешают технологические и функциональные добавки, типичные для рецептурного состава концентратов: битрекс, бензоат натрия, красители (например метиленовый голубой, красный темный) и растворители (например этиловый и пропиловый спирт, триэтиленгликоль, пропиленгликоль).

Выполнение анализа

Подготовка пробы. Масляный концентрат (около 0,1 г) растворяют в ацетонитриле в мерной колбе вместимостью 25 мл, затем 20 мл полученного раствора вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и добавляют до метки элюент (смесь ацетонитрил:вода в соотношении 80:20), после перемешивания хроматографируют.

Гелеобразный жидкий концентрат (около 0,5 г) помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в 2,5 мл диметил-формамида при периодическом перемешивании или с помощью ультразвуковой ванны, затем добавляют ацетонитрил. После отстаивания 2 мл прозрачного раствора вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и добавляют до метки элюент (смесь ацетонитрил:вода в соотношении 80:20), после перемешивания хроматографируют.

Порошковый концентрат (0,05-0,15 г) экстрагируют 50 мл ацетонитрила с помощью ультразвуковой ванны в течение 20-25 мин, затем центрифугируют и полученный раствор хроматографируют. В качестве экстрагента может быть применен также водный ацетонитрил (1:1), хлористый метилен, насыщенный муравьиной кислотой - в этом случае отгоняют экстрагент с помощью ротационного испарителя, сухой остаток растворяют в элюенте (метанол:вода:уксусная кислота в соотношении 94,2:5:0,8) и хроматографируют. При необходимости проводят сорбционную очистку экстракта от красителя на слое целита 545.

Условия хроматографирования при прямофазной и обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Для прямофазной высокоэффективной жидкостной хроматографии может быть использована хроматографическая система: аминная колонка с сорбентом типа сепарон SGX NHР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 5 мкм, лихросорб NHР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности 5 мкм - элюент ацетонитрил:вода в соотношении 80:20. Для обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии - хроматографическая система: колонка с сорбентом типа MAX RP C12, зорбакс ODS, нуклеосил С18, лихросорб RP 18 - элюент ацетонитрил:вода:уксусная кислота в соотношении 80:20:1; метанол:вода:уксусная кислота в соотношении 94,2:5:0,8 и др.

Длина волны измерений может быть применена в диапазоне от 254 до 288 нм. Скорость элюента применяется в интервале от 0,4 до 2 мл/мин, температура колонки в диапазоне 25-60 °С, объем хроматографируемой пробы 5-20 мкл.

Рабочие градуировочные смеси готовят с массовой концентрацией определяемых ДВ 0,005-0,010 мг/мл. Из полученных хроматограмм рабочей градуировочной смеси определяют время удерживания и площадь хроматографического пика вещества в рабочей градуировочной смеси. Из хроматограмм испытуемой пробы проводят идентификацию определяемого вещества по совпадению времени удерживания и вычисляют площадь хроматографического пика в анализируемой пробе. Для идентификации определяемого вещества дополнительно могут быть использованы спектры поглощения в области 190-400 нм в исследуемой пробе и градуировочной смеси.

Обработка результатов. Массовую долю ДВ в концентрате определяют по известной формуле при применении абсолютной градуировки.

Определение ДВ в дератизационных приманках основано на его экстракционном извлечении, хроматографическом разделении компонентов пробы в градиентном режиме и последующем спектрофотометрическом измерении определяемого вещества в элюате с применением абсолютной градуировки.

Метод избирателен. Спектрофотометрическому измерению бродифакума, бромадиолона, дифетиалона, зоокумарина, куматетралила, флокумафена не мешают технологические и функциональные добавки, типичные для рецептурного состава приманок: красители (например метиленовый голубой, красный темный), битрекс, бензоат натрия и растворители (например этиловый и пропиловый спирт, триэтиленгликоль, пропиленгликоль). Идентификацию определяемого вещества проводят сравнением времени удерживания при одной длине волны в интервале 250-280 нм, дополнительно могут быть использованы спектры поглощения в области 190-400 нм в исследуемой пробе и градуировочной смеси.

Выполнение анализа. Зерновые приманки. Навеску зерновой приманки массой 10-20 г экстрагируют ацетонитрилом и обрабатывают в ультразвуковой ванне в течение 30 мин. В качестве экстрагента может быть применен ацетонитрил, подкисленный уксусной кислотой (1% об.). После отстаивания отбирают аликвоту экстракта, фильтруют через фильтр 0,45 мкм и хроматографируют в градиентном режиме обращенно-фазной хроматографии. Условия хроматографирования: колонка с сорбентом нуклеосил С18 (125Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности3 мм); элюент А - ацетонитрил, элюент Б (0,16% об.) - раствор ортофосфорной кислоты. Градиент по ацетонитрилу от 40 до 75% за 10 мин; 75% изократика 5 мин; скорость подвижной фазы 0,4 мл/мин; длина волны 284 нм; объем хроматографируемой дозы 10 мкл.

Гранулированные приманки. Навеску 20-40 г измельченной гранулированной приманки помещают в коническую колбу вместимостью 500 мл, добавляют 250 мл экстрагента и интенсивно перемешивают на магнитной мешалке в течение 20 мин. В качестве экстрагента применяют хлористый метилен, насыщенный муравьиной кислотой. Затем содержимое колбы количественно переносят на фильтр с целитом и трижды промывают экстрагентом порциями по 50 мл. Фильтрат упаривают с помощью ротационного испарителя. К сухому остатку добавляют 10 мл смеси метанол:хлористый метилен (3:2) (по объему), центрифугируют и раствор вводят в хроматограф. Условия хроматографирования: колонка с сорбентом для обращенно-фазной хроматографии зорбакс ODS 5 мкн (250Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности4,6 мм); подвижная фаза метанол:вода:уксусная кислота (94,2:5:0,8); скорость 1 мл/мин; длина волны 254 нм; объем хроматографируемой дозы 10 мкл. Рабочая градуировочная смесь в растворителе - метанол:хлористый метилен (3:2) с концентрацией определяемого вещества 0,2 мг/мл.

Обработка результатов. Массовую долю ДВ в приманке Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности в процентах с применением абсолютной градуировки вычисляют по следующей формуле с учетом фактора извлечения Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности:

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности,

где Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - площади хроматографических пиков определяемого вещества в испытуемой пробе и рабочей градуировочной смеси;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая концентрация анализируемого стандарта определяемого вещества в рабочей градуировочной смеси, мг/мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - массовая доля основного вещества в аналитическом стандарте, %;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - объем раствора пробы, мл;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - кратность разведения раствора пробы;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - масса пробы, взятая на анализ, мг;

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности - фактор извлечения устанавливают по контрольному образцу с известным содержанием определяемого вещества, Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.

4.5. Библиографические данные


1. Крейнгольд С.У. Практическое руководство по химическому анализу дезинфекционных препаратов. М., 2002. 156 с.

2. Шамб У., Сеттерфилд Ч., Вентворс Р. Перекись водорода. М., 1958. С.460-468.

3. Губен-Вейль. Методы органической химии. Методы анализа. М.: Химия, 1967. С.452-462.

4. Сукиасян А.Н., Копылова А.И. Количественное определение глутарового альдегида в разбавленных водных растворах //Теория и практика дезинфекции и стерилизации: Сборник научных трудов. М., 1983. С.116-119.

5. Сукиасян А.Н., Свитова И.Р. Количественное определение надкислот в растворах, содержащих перекись водорода //Хим.-фарм. журнал. 1983. N 3. С.366-368.

6. Сукиасян А.Н., Свитова И.Р. Модификация цериметрически-йодометрического метода анализа перекисных компонентов в растворах, содержащих надкислоту и перекись водорода //Проблемы дезинфекции и стерилизации: Сб. научн. тр. М., 1980. С.115-119.

7. Газоанализатор 3.02П-Р. Руководство по эксплуатации ИРМБ. 413312.005-02 РЭ. СПб, 2001.

8. Оптический анализатор озона "Циклон-5.51". Руководство по эксплуатации ИРМБ. 413313.009 РЭ. СПб, 2001.

9. Мельников Н.Н., Новожилов К.Б., Белан С.Р. Пестициды и регуляторы роста растений: Справочник. М., 1995.

10. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Колос, 1992. Т.1, 2. N 94.

11. Гигиенические критерии состояния окружающей среды, N 94, Перметрин, ВОЗ, Женева, 1992.

12. Гигиенические критерии состояния окружающей среды, N 82, Циперметрин, ВОЗ, Женева, 1991.

13. Гигиенические критерии состояния окружающей среды, N 97, Дельтаметрин, ВОЗ, Женева, 1992.

14. Гигиенические критерии состояния окружающей среды, N 87, Аллетрины, ВОЗ, Женева, 1992.

15. Гигиенические критерии состояния окружающей среды, N 96, d-Фенотрин, ВОЗ, Женева, 1993.

16. Крейнгольд С.У. и Шестаков К.А. Методика определения фосфида цинка в техническом препарате //Дезинфекционное дело, N 2. 2003. С.23-24.

17. Хубер Л. Применение диодно-матричного детектирования в ВЭЖХ. М.: Мир, 1993. 95 с.

18. Методические указания по определению зоокумарина в тканях и крови животных, в приманках и препарате пенокумарин хроматографическими и спектрофотометрическими методами от 20.12.1976 N 1550-76 //Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Справочное. Мин. сельхоз. СССР. Гос. Комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками /Под ред. М.А.Клисенко. М.: Колос, 1983. С.227-331.

19. Крейнгольд С.У. Простые и экспрессные методы химического контроля качества дезинфекционных препаратов //Дез дело, N 4. 2002, С.37-39.

20. Крейнгольд С.У. Спектрофотометрическое определение фенолов в дезинфицирующих средствах после разделения их методом тонкослойной хроматографии//Дез дело, N 4. 2003. С.45-47.

21. Крейнгольд С.У. и Шестаков К.А. Определение триклозана в жидком туалетном антибактериальном мыле //Дез дело, N 3. 2003. С.46-47.

22. Мыло жидкое с дезинфицирующим эффектом "НИКА-СВЕЖЕСТЬ антибактериальное". ТУ 9392-023-12910434-2005. ООО НПФ "ГЕНИКС".

23. Средство дезинфицирующее "ДЕЛАСЕПТ-ГЕЛЬ" (кожный антисептик). Технические условия ТУ 9392-051-00479095-2005. ЗАО "Петроспирт".

24. Средство дезинфицирующее КЕМИ-САЙД. Технические условия. ТУ 9392-001-5671Б5159-2004. ООО "КЕМИТРЕЙД".

5. Микробиологические методы исследований и критерии оценки эффективности дезинфицирующих и стерилизующих средств


Общие положения

Современные дезинфицирующие средства ДС представляют собой индивидуальные химические соединения или композиционные составы, включающие одно или несколько действующих веществ ДВ. Кроме того, в их состав могут входить вспомогательные компоненты: стабилизаторы, ингибиторы коррозии, моющие вещества, красители, отдушки и др.

В качестве действующих веществ в ДС используют хлорактивные, кислородактивные соединения, альдегиды, четвертичные аммониевые соединения, амины, гуанидины, спирты и др.

ДС производятся в форме жидких концентратов, готовых к применению жидкостей, порошков, таблеток, гелей, спреев, салфеток, биоцидных лакокрасочных материалов и др.

ДС должны отвечать следующим требованиям [14, 21, 23, 51, 66]:

- обладать достаточной антимикробной активностью в отношении патогенных и условно патогенных видов микроорганизмов: бактерий, грибов, вирусов, а также споровых форм микроорганизмов;

- относительно низкой токсичностью для человека;

- быть экологически безопасными;

- быть стабильными при хранении;

- не иметь резкого неприятного запаха;

- хорошо растворяться в воде;

- не повреждать обрабатываемые объекты;

- иметь оптимальное соотношение стоимость-качество.

К некоторым средствам узкоцелевого назначения дополнительно предъявляют индивидуальные требования, изложенные в соответствующих главах.

ДС могут быть универсального назначения, которые рекомендуется применять для дезинфекции многих объектов при разных инфекциях, или узкоцелевого назначения, предназначенные для дезинфекции одного конкретного объекта, например, для дезинфекции стоматологических оттисков, или воздуха, или поверхностей и т.д.

Предполагаемая сфера применения ДС определяет объем микробиологических исследований, необходимых для разработки режимов обеззараживания соответствующих объектов.

Микробиологические исследования начинают только после получения результатов химико-аналитических исследований, подтверждающих соответствие средства требованиям нормативно-технической документации НТД: технических условий - на отечественные средства, спецификации - на зарубежные.

Этапы исследований дезинфицирующих веществ и дезинфицирующих средств. Микробиологические исследования включают изучение активности ДВ и изучение эффективности ДС [51, 52, 66].

При исследовании субстанций, предназначенных для производства ДС, определяют спектр антимикробного действия в экспериментах in vitro.

Исследование свойств ДС проводят в 3 этапа:

1) определение in vitro спектра антимикробной активности ДС и влияния на нее различных факторов: рН, органических веществ, температуры;

2) эффективность обеззараживания искусственно контаминированных тест-микроорганизмами объектов в лабораторных условиях с целью разработки режимов применения ДС в зависимости от концентрации ДВ, времени воздействия, характера объекта, способа обработки и других факторов;

3) испытание ДС в практических условиях для подтверждения эффективности разработанных режимов в реальных условиях применения в случаях: исследования средства, содержащего новое ДВ; нового способа применения, значительного снижения концентрации и времени воздействия по сравнению с ранее разрешенными режимами и пр.

5.1. Методы изучения и оценки бактерицидной активности дезинфицирующих средств и их субстанций


5.1.1. Тест-микроорганизмы для изучения бактерицидной активности ДС и их субстанций. Требования к тест-микроорганизмам

При изучении бактерицидной активности дезинфицирующих субстанций и ДС в качестве тест-микроорганизмов используют [66]: Escherichia coli (штамм 1257), Pseudomonas aeruginosa (штамм АТСС 27853), Salmonella typhimurium - для оценки бактерицидной активности в отношении грамотрицательных бактерий; Staphylococcus aureus (штамм 906) - для оценки бактерицидной активности в отношении грамположительных бактерий.

При сертификационных испытаниях и экспертной оценке ранее зарегистрированных ДС набор тест-микроорганизмов может быть ограничен наиболее устойчивыми представителями каждой группы.

Перечень тест-микроорганизмов, если он шире стандартного, указан в соответствующих разделах по изучению эффективности ДС при обеззараживании отдельных объектов.

Условия культивирования тест-микроорганизмов. Тест-микроорганизмы - Е. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa и S. aureus - культивируют на следующих питательных средах: казеиновом бульоне, мясо-пептонном бульоне, агаре Эндо, казеиновом агаре, мясо-пептонном агаре и т.п. при температуре 37 °С в течение 18-24 ч.

Музейные культуры указанных выше микроорганизмов хранят при температуре плюс (3±1) °С в ампулах (после лиофильной сушки) или на плотных питательных средах (посев уколом) под слоем стерильного вазелинового масла (толщина слоя 1,5-3 мм), а рабочие культуры - на скошенном агаре или в бульоне.

Тест-микроорганизмы должны иметь типичные биохимические, морфологические, тинкториальные, культуральные и ферментативные свойства, присущие данному виду [66], и обладать стандартной устойчивостью к эталонным дезинфицирующим средствам: растворам хлорамина, перекиси водорода, Катамина АБ - алкилдиметилбензиламмония хлорида АДБАХg, глутарового альдегида (табл.5.1).

Таблица 5.1

Устойчивость тест-микроорганизмов к дезинфицирующим агентам

Дезинфицирующее вещество

Концентрация раствора по ДВ, %

Время гибели тест-микроорганизмов, мин, не менее

Е. coli, шт. 1257

S. aureus, шт. 906

Хлорамин

0,020*

5

-

0,200*

-

15

АДБАХ

0,025

20

10

Глутаровый альдегид

0,030

10

-

0,060

-

10

Перекись водорода

2,000

10

-

3,000

-

25

* концентрация раствора указана по препарату.



Устойчивость тест-микроорганизмов к эталонным дезинфицирующим средствам определяют методом батистовых тест-объектов (п.5.1.2.2).

Проверку устойчивости тест-микроорганизмов проводят не реже 1 раза в месяц. При снижении резистентности культур делают их пересевы на обогащенные питательные среды до восстановления устойчивости.

5.1.1.1. Методы приготовления суспензии тест-микроорганизмов.

Определение биологической концентрации тест-микроорганизмов в бактериальной суспензии

Культуры тест-микроорганизмов подвергают контролю их качества. В частности, непосредственно перед использованием тест-культур для исследовательских целей необходимо убедиться в том, что тест-штаммы, выросшие на питательной среде, не загрязнены посторонней микрофлорой. Для оценки роста культур тест-штаммов визуально просматривают каждую пробирку и учитывают характер и массивность роста, изменение цвета питательной среды. Проводят микроскопию мазка выросших культур, окрашенных по Грамму.

Рабочую суспензию тест-культур готовят из культуры данного тест-штамма, выращенного на плотной питательной среде (МПА или казеиновый агар) при температуре 37 °С в течение 18-24 ч. Для приготовления бактериальной взвеси культуру смывают с агара стерильной питьевой водой. Полученную взвесь микробов фильтруют через ватно-марлевый фильтр и разводят стерильной питьевой водой до концентрации, соответствующей по мутности оптическому стандарту мутности (ФГУН "Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича" Роспотребнадзора) N 20 (он соответствует 2·10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности микробных тел в 1 мл).

В связи с тем что суспензия может содержать наряду с живыми мертвые микроорганизмы, необходимо определять бактериологическую концентрацию фактического количества живых клеток в приготовленной суспензии, чтобы при необходимости внести коррективы и обеспечить требуемые уровни контаминации батистовых тест-объектов жизнеспособными микроорганизмами.

Определение биологической концентрации тест-микроорганизмов выполняют методом последовательных десятикратных разведений суспензии тест-микроорганизма в стерильной питьевой воде с последующим высевом суспензии в чашки Петри с плотной питательной средой (казеиновый агар, агар Эндо, МПА). После определенного времени инкубации при соответствующей температуре проводят подсчет выросших колониеобразующих единиц КОЕ и определяют количество жизнеспособных бактерий в одном мл суспензии.

Из практики известно, что суспензия, содержащая такое количество живых микробов, при контаминации ею батистовых тест-объектов обеспечивает требуемые (порядка 1·10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности-1·10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности КОЕ/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) уровни их обсеменения живыми клетками тест-микроба.

5.1.1.2. Приготовление рабочих растворов ДС и их субстанций

Рабочие растворы ДС и их субстанций готовят непосредственно перед проведением исследований (кроме тех случаев, когда изучают стабильность рабочих растворов в процессе хранения).

При изучении средств, производимых в форме гранул, порошков, таблеток и т.п., рабочие растворы используют только после полного растворения ДВ дезинфицирующего средства (если не указано на возможность выпадения осадка).

Для оценки антимикробного действия субстанций и ДС в лабораторных условиях и исследования эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания различных объектов, растворы готовят на стерильной питьевой воде. Для этого необходимое количество сухого ДС или жидкого концентрата вносят в пробирку (колбу) и добавляют расчетное количество воды, тщательно размешивают и закрывают пробкой. Отмечают время полного растворения и внешний вид приготовленного рабочего раствора.

Температура растворов ДС должна быть в пределах плюс (20±2) °С (если по условиям эксперимента не рекомендована другая температура) независимо от температуры окружающей среды. Для поддержания требуемой температуры используют водяную баню.

При испытании ДС в практических условиях рабочие растворы готовят на нестерильной питьевой воде комнатной температуры (20±2) °С или при необходимости - умеренно повышенной температуры 45-50 °С. Навеску средства или отмеренное количество жидкого концентрата вносят в соответствующую емкость, добавляют воду, размешивают и закрывают крышкой. Работу с раствором начинают после полного растворения ДВ. Рабочие растворы из ДС в форме таблеток готовят путем добавления в отмеренный объем воды определенного числа таблеток.

Рабочие растворы субстанций и ДС готовят с соблюдением мер предосторожности. Если ДВ относится к летучим веществам и представляет опасность при ингаляционном воздействии, растворы готовят в вытяжном шкафу или в отдельном помещении, оборудованном приточно-вытяжной вентиляцией, в респираторе РУ 60М или РПГ-67, кожу рук защищают резиновыми перчатками, глаза - защитными очками.

Исследуемые ДС (перед, во время и после исследований) следует хранить в соответствии с требованиями технических условий или спецификации; при отсутствии таковых - в соответствии с СП 3.5.1378-03 [14].

5.1.2. Методы исследований и оценки результатов бактерицидной активности ДС и их субстанций in vitro

Целью исследований является определение уровня и спектра антимикробной активности ДС и их субстанций.

Субстанции, предназначенные для производства ДС, должны соответствовать следующим требованиям:

- хорошо растворяться в воде или других растворителях;

- обладать бактерицидной активностью, т.е. убивать бактерии, а не задерживать их рост;

- иметь удовлетворительные органолептические (по цвету, запаху) и физико-химические (по растворимости, биоразлагаемости и стабильности при хранении и др.) свойства.

Антимикробную активность ДС и их субстанций изучают суспензионным методом или методом батистовых тест-объектов.

5.1.2.1. Суспензионный метод

Для приготовления растворов ДС в различных концентрациях ДВ разводят или растворяют в стерильной питьевой воде, далее по 4,5 мл разливают в стерильные пробирки, в которые добавляют 0,5 мл взвеси тест-микроорганизма или бульонной культуры, содержащей 1·10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности к/мл, и тщательно перемешивают. Через определенные интервалы времени (5 мин) по 0,5 мл взвеси "тест-микроорганизм+ДВ" добавляют к 4,5 мл соответствующего нейтрализатора, снова тщательно перемешивают и оставляют на 5 мин. Затем по 0,5 мл вносят в пробирку с 4,5 мл стерильной питьевой воды, после чего 0,1 мл из этой пробы вносят в пробирки с 5 мл жидкой и на поверхность твердой питательной среды. В контрольных опытах вместо растворов ДС используют стерильную питьевую воду, а посевы делают в среду без нейтрализации или с нейтрализацией.

Температура инкубирования посевов в термостате - 37 °С, сроки учета результатов опыта - 24-48 ч. Для подтверждения снятия биоцидного действия ДВ из пробирок, в которых отсутствовал рост тест-культуры, ежедневно делают пересев по 0,5 мл в 4,5 мл новой питательной среды.

Результаты опыта оценивают по наличию или отсутствию роста микроорганизмов в жидкой и на твердой питательной среде. Сравнение проводят с контролем опыта, которым является посев тест-микроорганизмов в питательную среду без добавления ДС или субстанции.

Эффективной считают концентрацию средства, при которой трижды повторенный опыт при определенном времени воздействия дает отрицательный результат (отсутствие роста микроорганизмов) при наличии типичного роста тест-культуры в контроле.

5.1.2.2. Метод батистовых тест-объектов

Подготовка батистовых тест-объектов

Перед приготовлением батистовых тест-объектов кусок батиста погружают на 24 ч в холодную воду для удаления аплитуры, крахмала. Затем его тщательно стирают с мылом, кипятят, сушат и гладят утюгом. С помощью иглы в приготовленном куске ткани выдергивают нитки в продольном направлении на расстоянии 11 мм друг от друга, а в поперечном - на расстоянии 6 мм. По этим линиям батист разрезают ножницами на тест-объекты и по 50 штук раскладывают в чашки Петри, последние заворачивают в бумагу и стерилизуют паровым методом при 132 °С (2,0 кгс/смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности) 20 мин.

Контаминация батистовых тест-объектов

Приготовление суспензии тест-микроорганизмов (Е. coli, S. aureus, P. aeruginosa, S. typhimurium) проводят в соответствии с п.5.1.1.1. Для контаминации стерильные батистовые тест-объекты в чашке Петри заливают суспензией тест-микроорганизма из расчета 0,5 мл на 1 тест-объект, равномерно смачивая все тест-объекты. Чашку Петри закрывают крышкой и оставляют на 20 мин. Затем в асептических условиях батистовые тест-объекты, пропитанные суспензией тест-микроорганизмов, переносят на поверхность стерильной фильтровальной бумаги (2-4 слоя на дне чашки Петри), прикрывают их сверху стерильной фильтровальной бумагой и закрывают чашку Петри крышкой. Через 10 мин после удаления избытка жидкости тест-объекты переносят на поверхность сухой стерильной фильтровальной бумаги в чашке Петри и сверху прикрывают стерильным листом фильтровальной бумаги, подсушивают в термостате при 37 °С в течение 20 мин с приоткрытой крышкой.

Хранят контаминированные батистовые тест-объекты в чашках Петри в холодильнике при температуре 4 °С.

Срок хранения тест-объектов, контаминированных Е. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa - 1 сутки, S. aureus - 4 суток.

Постановка опыта. При постановке опытов в стерильную пробирку пипеткой наливают требуемый объем приготовленного дезинфицирующего раствора (из расчета 0,5 мл на каждый тест-объект) и, не касаясь краев колбы, опускают в него с помощью стерильного пинцета все тест-объекты, используемые в эксперименте (по 2 на каждую экспозицию). Легким покачиванием колбы достигают смачивания тест-объектов исследуемым раствором. Колбу помещают в водяную баню с температурой 18-20 °С и поддерживают данную температуру в течение всего эксперимента. При постоянной температуре в помещении 18-20 °С эксперименты можно проводить без использования водяной бани.

Отсчет времени воздействия эталонного раствора начинают с момента смачивания всех тест-объектов раствором. Через определенные интервалы времени (5 мин) стерильным пинцетом или платиновой петлей извлекают по 2 тест-объекта из раствора и погружают в пробирки с 5 мл стерильного раствора соответствующего нейтрализатора. Через 5 мин тест-объекты переносят в пробирку со стерильной питьевой водой, а еще через 5 мин каждый из двух тест-объектов в отдельности переносят в пробирки с жидкой питательной средой, необходимой для культивирования изучаемого тест-микроорганизма.

Контролем являются 2 тест-объекта, погруженные на весь период эксперимента в раствор нейтрализатора, и 2 тест-объекта, погруженные на этот же срок в питьевую воду, которые по окончании эксперимента переносят в питательную среду. Посевы инкубируют в термостате при температуре 37 °С. Результаты оценивают качественно по отсутствию/наличию роста тест-микроорганизма в питательном бульоне.

Критерием активности ДС и субстанций является 100% гибель тест-микроорганизмов (отсутствие роста в опытных пробах) при времени дезинфекционной выдержки S. aureus, E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa - не более 30 мин.

5.1.2.3. Методы исключения бактериостатического действия действующих веществ

Для определения микробоцидного и исключения бактериостатического действия ДВ по истечении экспозиции необходимо прекратить воздействие ДВ на тест-культуру. Это достигается путем использования следующих методов:

- применения химического нейтрализатора;

- посева в большой объем питательной среды;

- ежедневного пересева на новые питательные среды;

- биологической пробы на животных.

Применение химического нейтрализатора действующего вещества

Для нейтрализации действующего вещества, которое может быть перенесено с материалом тест-объекта при его посеве в питательную среду, используют нейтрализатор - вещество, которое устраняет, нейтрализует действие химического агента на микробную клетку, но не убивает и не задерживает рост тест-микроорганизма. Тест-объекты после воздействия химического агента промывают в нейтрализаторе или добавляют его непосредственно в питательную среду (если установлено, что вносимая концентрация нейтрализатора не убивает и не задерживает рост тест-бактерий).

В качестве нейтрализаторов ДВ из различных химических групп применяют для:

- галоидактивных (хлор-, бром- и йодактивные) и кислородактивных (перекись водорода, ее комплексы с солями, надуксусная кислота, озон) - 0,1-1,0%-е растворы тиосульфата натрия;

- четвертичных аммониевых солей (алкилдиметилбензиламмоний хлорид, дидецилдиметиламмоний хлорид и др.), производных гуанидина (полигексаметиленгуанидин гидрохлорид, хлоргексидин биглюконат и др.) - 0,1-1,0%-е растворы лаурилсульфата натрия (сульфонол) или растворы лаурилсульфата натрия с 10% обезжиренного молока или универсальный нейтрализатор (см. ниже);

- альдегидов (глутаровый альдегид, глиоксаль, формальдегид, ортофталевый альдегид) - 1,0%-й раствор пиросульфита (метабисульфита) натрия или универсальный нейтрализатор (см. ниже);

- кислот - щелочи в эквивалентном количестве;

- щелочей - кислоты в эквивалентном количестве;

- спиртов - разведение в воде до недействующей концентрации;

- композиционных средств - универсальный нейтрализатор, содержащий Твин-80 (3%), сапонин (0,3-3,0%), гистидин (0,1%), цистеин (0,1%). Если в состав композиции входят окислители, в нейтрализатор дополнительно вводят тиосульфат натрия.

Методика контроля полноты нейтрализации действующего вещества с использованием культуры бактерий. В целях сокращения времени на подбор оптимального нейтрализатора, а также объективного подтверждения того, что ДВ, входящие в состав субстанции или ДС, полностью нейтрализованы, используют культуру бактерий, чувствительную к исследуемому ДВ, например, тест-штамм Е. coli (штамм 1257) или S. aureus (штамм 906), выращенные, как описано в п.5.1.1.

Поэтому каждый случай проведения испытания ДС должен предварительно сопровождаться экспериментальным контролем эффективности нейтрализации остаточного действия ДС на микробную клетку, а также на бактерицидное и бактериостатическое действие используемой концентрации нейтрализатора.

Для контроля эффективности нейтрализатора и полноты нейтрализации ДС используют суспензионный метод, предусматривающий проведение исследования, основные операции которого и их назначение приведены на схеме 5.1 и в табл.5.2.

Схема 5.1. Проведение эксперимента по контролю эффективности нейтрализации действия ДС на Е. coli используемым нейтрализатором

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности


Схема 5.1. Проведение эксперимента по контролю эффективности нейтрализации действия ДС на Е. coli используемым нейтрализатором



Таблица 5.2

Назначение операций эксперимента по оценке эффективности нейтрализации остаточного действия ДС

N пробы

Назначение операции исследования

Процедура выполнения операции исследования

Ожидаемый результат

1

Контроль губительного действия ДС

к 9 мл суспензии тест-культуры (10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности КОЕ/мл) на дист. воде + 1 мл раствора ДС

Рост микроорганизмов должен отсутствовать

2

Контроль полноты нейтрализации ДС

к 9 мл суспензии тест-культуры (10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности КОЕ/мл) на нейтрализаторе + 1 мл раствора ДС

Примерно одинаковое количество колоний в посевах проб по 0,1 мл на плотной питательной среде

3

Контроль отсутствия антимикробного эффекта у нейтрализатора

к 9 мл суспензии тест-культуры (10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности КОЕ/мл) на нейтрализаторе + 1 мл раствора нейтрализатора

4

Референс-контроль количества бактерий (Е. coli)

к 9 мл суспензии тест-культуры (10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности КОЕ/мл) на д.в. + 1 мл дист. воды

Примечание: спустя 5 мин после постановки опыта из каждой из четырех проб производят посев смеси по 0,1 мл как минимум на 3 пробирки со скошенной питательной средой, которые инкубируют в термостате при 37 °С, по истечении 2-3 суток учитывают результаты исследований.



Критерии отбора действующих веществ (субстанций). Критерием отбора действующего вещества в качестве субстанции для создания ДС является наличие у него бактерицидной активности.

Гибель тест-микроорганизмов должна составлять 100% при времени действия мин ДС в минимальной концентрации в отношении бактерий (S. aureus, Е. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa) не более 30 мин.

5.1.2.4. Методы изучения факторов, влияющих на бактерицидную активность ДС и их субстанций

Исследования включают определение спектра антимикробного действия ДС, а при проведении углубленного изучения - дополнительно влияние различных факторов (рН, температура, органические вещества) на антимикробную активность растворов ДС. Такая необходимость возникает при изучении ДС, созданных на основе нового, ранее не изученного ДВ.

Изучение спектра антимикробной активности и влияние на активность различных факторов проводят методом батистовых тест-объектов (п.5.1.2.2), контаминированных тест-микроорганизмами.

Изучение зависимости активности ДС от присутствия органических веществ проводят при добавлении к суспензии микроорганизмов 20% инактивированной лошадиной сыворотки или сыворотки крупного рогатого скота при контаминации батистовых тест-объектов.

Для инактивации нормальной сыворотки ее прогревают на водяной бане при температуре плюс 56 °С в течение 30 мин.

Испытание бактерицидной активности ДС в присутствии органических веществ проводят с теми концентрациями, которые оказались эффективными при обеззараживании тест-объектов, контаминированных тест-микроорганизмами без добавления сыворотки.

Если активность средства при таких условиях эксперимента не снижается, концентрацию сыворотки увеличивают до 40%. При отсутствии снижения активности ДС и при добавлении 40% белка считают, что в присутствии белка активность средства не снижается.

Влияние температуры на активность исследуемого ДС изучают при обеззараживании контаминированных батистовых тест-объектов растворами средств при различных температурах растворов (от -30 до 50 °С). Для этого колбу с исследуемым раствором ДС помещают в водяную баню или холодильную камеру и устанавливают необходимую температуру. Температуру раствора доводят до желаемого уровня и опускают в него контаминированные тест-микроорганизмами батистовые тест-объекты. Далее порядок проведения опыта такой, как при изучении спектра антимикробного действия субстанций (п.5.1.2.2). Температуру поддерживают в течение заданной экспозиции. Если эффективная концентрация одинаковая при температуре растворов 18-20 °С и других значениях, то считают, что температура не влияет на активность ДС и, соответственно, если эффективная концентрация увеличивается или уменьшается, то считают, что с повышением или понижением температуры эффективность ДС снижается или повышается.

Влияние рН среды на активность исследуемого ДС изучают при обеззараживании контаминированных тест-микроорганизмами батистовых тест-объектов в растворах ДС, имеющих различное значение рН (5,6-6,0; 7,0; 8,5-9,0). Готовят ряд разведений исследуемого вещества, искусственно подкисляя или подщелачивая растворы. Для подкисления используют децинормальный раствор соляной или другой кислоты, а для подщелачивания - децинормальный раствор щелочи. Порядок проведения опыта такой же, как при оценке спектра антимикробного действия субстанций п.5.1.2.2.

Влияние факторов среды на активность ДС учитывается при разработке оптимальных режимов и применении ДС в практике.

5.1.3. Методы исследования бактерицидной эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания объектов внешней среды, контаминированных тест-микроорганизмами

Цель исследования - разработка режимов применения ДС с учетом условий их дальнейшего применения на практике для обеззараживания изделий медицинского назначения ИМН, предметов ухода за больными, игрушек, белья, поверхностей, посуды, выделений и т.п. в зависимости от вида контаминации, концентрации действующего вещества, времени воздействия, нормы расхода, характера объекта, наличия на нем органического загрязнения и его специфики, температуры, способа и кратности обработки.

5.1.3.1. Исследование бактерицидной эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания ИМН

При выборе ДС для исследований с указанной целью следует учитывать:

- назначение и кратность применения ИМН (многократного или однократного применения);

- наличие у ДС негативных свойств, например, корродирующего или фиксирующего действия и т.п., ограничивающих возможности его использования или требующих индивидуального методического подхода при исследовании;

- материал (материалы), из которого изготовлено ИМН;

- функциональные особенности изделия и условия его эксплуатации, обусловливающие особенности методики проведения эксперимента и последующих рекомендаций по технологии их обеззараживания.

Исследование эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания ИМН из различных материалов (кроме эндоскопов). В качестве тест-изделий используют стерильные инструменты и ИМН (катетеры, микропипетки, пластмассовые шпатели и др.) из различных материалов (металлов, резин, стекла, пластмасс) или имитирующие их тест-объекты. Перечень инструментов, взятых в эксперимент, должен включать не менее трех инструментов, имеющих замковые части (щипцы, ножницы, корнцанг), и не менее двух, не имеющих замковых частей (пинцеты, шпатели), а также стоматологические, в т.ч. вращающиеся, инструменты (не менее 4) - бор, бурав корневой, зеркало, диск шлифовальный. В качестве тест-изделий из резин, стекла, пластмасс используют фрагменты изделий катетеров, микропипеток, шпателей и пр.

В качестве тест-микроорганизмов используют S. aureus, P. aeruginosa. На поверхность тест-изделия (у замковых ИМН - в область замка, а при наличии каналов и полостей - также в канал изделия) с помощью пипетки наносят по 0,1 мл 1 млрд суспензии того или иного вида тест-микроорганизмов, содержащей 40% инактивированной лошадиной сыворотки. Тест-изделия подсушивают до полного высыхания. Мелкие тест-изделия погружают в указанную взвесь тест-микроорганизмов на 15 мин, затем их извлекают и подсушивают (до полного высыхания). При испытании ДС, обладающих фиксирующими свойствами, количество добавляемой сыворотки уменьшают до 5%.

Дезинфицирующие растворы готовят на стерильной питьевой воде. После подсушивания контаминированные изделия полностью погружают в раствор испытываемого ДС, заполняя им все каналы и полости изделий, избегая образования воздушных пробок. Инструменты, имеющие замковые части, погружают раскрытыми, предварительно сделав ими в растворе ДС несколько рабочих движений для лучшего проникновения раствора в труднодоступные участки изделий в области замка. Толщина слоя раствора ДС над изделиями должна быть не менее 1 см. Параллельно для контроля изделия погружают в воду.

Через определенное время (от 5 до 120 мин) изделия извлекают из дезинфицирующего раствора и марлевой салфеткой размером 5Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности, пропитанной нейтрализатором, с поверхности изделия делают смывы, затем салфетку помещают в пробирку с 10 мл того же нейтрализатора и встряхивают с бусами в течение 5-10 мин. Канал изделия промывают раствором нейтрализатора. Мелкие изделия погружают в раствор нейтрализатора на 5 мин, а затем переносят в пробирки с жидкой питательной средой. Для контроля эффективности обеззараживания смывную жидкость с поверхности изделия и из канала засевают на соответствующие питательные среды. Посевы выдерживают в термостате при температуре и времени, оптимальных для роста использованного тест-микроорганизма.

Кратность постановки эксперимента должна быть достаточной для получения статистически достоверных результатов.

Эффективным считают режим (концентрация - время - температура), обеспечивающий гибель тест-микроорганизма на всех изделиях. При наличии положительных проб эксперимент повторяют, увеличивая концентрацию или время воздействия.

Критерий эффективности обеззараживания - 100% гибель тест-микроорганизма.

Время обеззараживания ИМН, контаминированных S. aureus, P. aeruginosa, - не более 60 мин.

Исследование бактерицидной эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания эндоскопов, включая дезинфекцию высокого уровня ДВУ.

В качестве тест-объектов используют стерильные фрагменты эндоскопа или эндоскоп (гибкий - гастроскоп, жесткий - цистоскоп), а в качестве тест-микроорганизма - S. aureus.

На наружную поверхность тест-объекта наносят по 0,1 мл 1 млрд суспензии тест-микроорганизма, содержащей 5% сыворотки; через канал эндоскопа с помощью пипетки пропускают не менее 5 мл такой же суспензии. После этого эндоскоп подсушивают в течение 20 мин. Затем контаминированное изделие погружают в раствор ДС, заполняя полости и каналы эндоскопа. Через определенные интервалы времени в течение 5-60 мин изделие извлекают из раствора и делают смыв с наружной поверхности марлевой салфеткой, смоченной в растворе нейтрализатора. Канал изделия промывают нейтрализатором. Смывную жидкость засевают на соответствующие питательные среды.

Критерий эффективности обеззараживания эндоскопов - 100% гибель тест-микроорганизма. Время обеззараживания эндоскопов, контаминированных S. aureus, - не более 60 мин.

5.1.3.2. Исследование бактерицидной эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания стоматологических оттисков

ДС, предназначенное для обеззараживания стоматологических оттисков, должно иметь широкий спектр антимикробной активности, не вызывать изменений свойств и размеров оттисков, иметь короткое время дезинфекционной выдержки (не более 30 мин).

При разработке режимов обеззараживания стоматологических оттисков в качестве тест-микроорганизмов используют S. aureus, P. aeruginosa, в качестве тест-объектов - оттиски из альгинатных, силиконовых или других материалов. Для изготовления оттисков слепочную массу, полученную в соответствии с рекомендациями изготовителя, помещают в пластмассовую или металлическую ложку и делают оттиск с пластмассовых зубных протезов с моделированной десной. На оттиски наносят по 0,1 мл 1 мрлд суспензии тест-микроорганизма (с добавлением 40% инактивированной сыворотки), подсушивают их в течение 2-3 мин, затем полностью погружают в раствор ДС. При установленном фиксирующем действии ДС оттиски перед погружением в дезинфицирующий раствор промывают проточной питьевой водой. Параллельно для контроля контаминированные оттиски погружают в воду. Через определенное время (5-30 мин) оттиски извлекают из раствора и марлевой салфеткой, пропитанной нейтрализатором, делают смывы. Салфетки помещают в стерильные пробирки с бусами, содержащие 10 мл нейтрализатора, и встряхивают в течение 10 мин. Затем делают посев смывной жидкости на питательные среды для контроля эффективности обеззараживания. Критерий эффективности обеззараживания - 100%.

5.1.3.3. Исследование бактерицидной эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания предметов ухода за больными, игрушек

В качестве тест-объектов используют предметы ухода за больными (подкладные клеенки, резиновые грелки, судна, термометры, пластмассовые наконечники для клизм и др.), игрушки (пластмассовые, металлические, деревянные, резиновые, кроме мягких) или тест-объекты, их имитирующие. В качестве тест-культур используют S. aureus и Е. coli.

Перед контаминацией тест-микроорганизмами тест-объекты подвергают механической очистке - моют водой с мылом и щеткой. Для имитации загрязнения используется 40% инактивированной лошадиной сыворотки или сыворотки крупного рогатого скота. Для этого перед контаминацией объектов к суспензии тест-микроорганизмов добавляют необходимое количество сыворотки.

После подсушивания контаминированные тест-объекты располагают горизонтально и на них пипеткой наносят взвесь тест-микроорганизмов из расчета 0,5 мл 2 млрд микробной взвеси на площадь в 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности. Суспензию равномерно распределяют по поверхности тест-объектов стеклянным шпателем, подсушивают (до полного высыхания) при комнатной температуре 18-20 °С и относительной влажности воздуха 50-60%, затем обрабатывают дезинфицирующим раствором.

Обработку предметов ухода за больными и игрушек проводят способами протирания, погружения, а для крупных игрушек - способом орошения капельное.

Норму расхода дезинфицирующего раствора при обеззараживании способами протирания или орошения определяют в зависимости от способа обработки аналогично опытам по обеззараживанию поверхностей (п.5.1.3.5). Двукратное протирание или орошение проводят через 5-15 мин после первого.

При обработке способом погружения в дезинфицирующий раствор предметов ухода за больными и мелких игрушек последний должен полностью и с избытком покрывать все объекты. При погружении мелких игрушек необходимо препятствовать их всплытию.

Время обеззараживания объектов определяют в интервале от 15 до 120 мин в зависимости от вида тест-микроорганизма и наличия органического загрязнения.

Контрольные тест-объекты обрабатывают стерильной питьевой водой из того же расчета, что и опытные.

Контроль эффективности обеззараживания контаминированных тест-объектов проводят следующим образом: марлевой салфеткой (размером 5Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности), смоченной в растворе нейтрализатора соответствующего для данного ДС, тщательно протирают тест-объект и погружают ее в 10 мл этого же нейтрализатора, находящегося в пробирках с бусами. Время отмыва марлевой салфетки 10 мин при постоянном встряхивании. Отмывную жидкость сеют на 2-3 чашки по 0,2-0,5 мл в каждую на твердые питательные среды.

Посевы помещают в термостат при температуре 37 °С и учитывают результаты через 2 суток.

Критерий эффективности обеззараживания - не менее 100%.

Время обеззараживания объектов, контаминированных S. aureus, - не более 60 мин.

5.1.3.4. Исследование бактерицидной эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания белья

Эффективность обеззараживания белья ДС определяют с помощью тест-объектов, представляющих собой кусочки ткани из бязи размером 2Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности2 см. В качестве тест-культур используют S. aureus и Е. coli.

При разработке режима обеззараживания загрязненного белья к суспензии микроорганизмов перед контаминацией тест-объектов добавляют 40% инактивированной сыворотки (6 мл 2 млрд взвеси тест-культуры смешивают с 4 мл инактивированной сыворотки) или 40% фекальной эмульсии (6 мл 2 млрд взвеси тест-культуры смешивают с 4 мл фекальной эмульсии). Для приготовления фекальной эмульсии 8 г фекалий растирают в ступке с 20 мл воды. Контаминированные тест-объекты подсушивают в термостате при 37 °С в течение 20-25 мин или 1,5-2 ч при комнатной температуре до полного высыхания.

Стерильные тест-объекты пропитывают 2 млрд взвесью тест-микроорганизмов из расчета 20 мл на 10 тест-объектов и подсушивают в термостате. Далее контаминированные тест-объекты помещают в стерильные бязевые мешочки размером 5Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности8 см по 2 штуки в каждый.

При разработке режимов обеззараживания белья, не загрязненного выделениями, белье погружают в емкость с дезинфицирующим раствором из расчета 4 л раствора на 1 кг сухого белья. При разработке режимов обеззараживания белья, загрязненного выделениями, его погружают в емкость с дезинфицирующим раствором из расчета 5 л раствора на 1 кг сухого белья. Белье погружают в раствор последовательно, одну вещь за другой, следя за тем, чтобы между вещами не образовывалось воздушных полостей, препятствующих процессу дезинфекции. Мешочки с контаминированными тест-объектами распределяют между слоями белья (сверху, в середине, внизу). Через заданное время воздействия ДС (например, 15, 30, 60 мин) извлекают по 1 мешочку с каждого уровня, стерильным пинцетом вынимают тест-объекты, переносят их в раствор нейтрализатора на 5 мин, затем промывают 5 мин в стерильной питьевой воде, затем помещают в жидкие питательные среды. В контрольных опытах вместо дезинфицирующего раствора используют стерильную питьевую воду.

Критерий эффективности - 100% гибель тест-культуры.

Время обеззараживания белья без видимых загрязнений, контаминированного S. aureus, E. coli, - не более 120 мин.

Время обеззараживания белья, загрязненного выделениями и контаминированного S. aureus, Е. coli, - не более 240 мин.

5.1.3.5. Исследование бактерицидной эффективности ДС, предназначенных для обеззараживания поверхностей

Исследования проводят в зависимости от вида поверхностей, их положения (горизонтальное, вертикальное), способа и кратности обработки.

В качестве тест-поверхностей используют поверхности размером 10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности10 см из различных материалов: гладкие, шероховатые, впитывающие и невпитывающие (деревянные, оштукатуренные, поверхности, окрашенные масляной, силикатной, водоэмульсионной или клеевой краской; оклеенные обоями, поверхности из линолеумных покрытий, поверхности из окрашенного или неокрашенного металла - нержавеющая хром-никелевая кислотостойкая сталь, пластика, стекла, искусственной или натуральной кожи, поверхности из облицовочной плитки - кафельной и метлахской, фаянса и др.), но не менее 5 видов поверхностей. Набор тест-поверхностей для исследований определяется назначением средства.

В качестве тест-микроорганизмов используют S. aureus, E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa.

При разработке режима обеззараживания технологического оборудования и поверхностей в помещениях в различных отраслях пищевой промышленности в качестве тест-поверхностей используют неокрашенный металл, пластик, облицовочную плитку (кафельная, метлахская, фаянсовая), контаминированные санитарно-показательными и специфическими для предприятий данного вида промышленности микроорганизмами.

Перед контаминацией тест-культурой поверхности подвергают механической очистке - моют водой с мылом и щеткой (за исключением поверхностей, оклеенных обоями и окрашенных клеевой краской). Последние протирают несколько раз стерильной салфеткой, увлажненной стерильной питьевой водой.

Высушенные поверхности располагают горизонтально, и на них пипеткой наносят взвесь тест-микроорганизмов из расчета 0,5 мл 2 млрд микробной взвеси на площадь в 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности и равномерно распределяют ее по поверхности стеклянным шпателем. Поверхности подсушивают (до полного высыхания) при температуре 18-20 °С и относительной влажности воздуха 50-60%, затем обрабатывают дезинфицирующим раствором.

При изучении эффективности обеззараживания линолеум, плитку метлахскую, искусственную или натуральную кожу, стекло располагают горизонтально, а дерево, окрашенное масляной, силикатной, водоэмульсионной или клеевой красками, поверхности, оклеенные обоями, пластик, кафельную и фаянсовую плитки - вертикально.

Для имитации загрязнения поверхностей используют белковое или фекальное загрязнение: 40% инактивированной сыворотки, 40% фекальная эмульсия (при разработке режимов обеззараживания унитазов).

Обработку поверхностей проводят способами протирания или орошения крупнокапельное и аэрозольное.

Для определения нормы расхода при однократной обработке дезинфицирующий раствор наносят с помощью пипетки на поверхность размером 10Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности10 см при применении способа протирания в количестве 1,0, 1,5 или 2,0 мл, а при крупнокапельном орошении наносят с помощью дозатора 1,5-3,0 мл. При аэрозольном методе обработки изучают эффективность обеззараживания при норме расхода 30-50-100 мл/мР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности (в зависимости от вида аэрозольного генератора и применяемой аэрозольной насадки). Многократное протирание или орошение проводят с интервалом между обработками 5-15-30 мин.

Время обеззараживания поверхностей определяют в интервале от 5 до 120 мин. Выбор экспозиции зависит от назначения и рекомендуемых условий применения ДС.

Контрольные поверхности обрабатывают стерильной питьевой водой так же и из того же расчета, что и опытные.

Исследования проводят при температуре 18-20 °С. При необходимости оценивают эффективность обеззараживания поверхностей при повышенной до 50 °С или пониженной до -30 °С температуре (исследования проводят в термо- или холодильной камере).

Контроль эффективности обеззараживания тест-поверхностей проводят следующим образом: марлевой салфеткой (размером 5Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности5 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности), смоченной в растворе соответствующего для данного дезинфицирующего средства нейтрализатора, тщательно протирают тест-поверхность, затем ее погружают в 10 мл этого же нейтрализатора, находящегося в пробирках с бусами. Время отмыва марлевой салфетки 10 мин при постоянном встряхивании. Отмывную жидкость сеют (на 2-3 чашки по 0,1-0,2 мл в каждую) на твердые дифференциально-диагностические питательные среды.

В зависимости от вида тест-микроорганизма посевы выращивают в термостате при температуре 37 °С. Учет результатов проводят в течение 1-2 суток путем подсчета количества выросших колоний, затем рассчитывают плотность контаминации 100 смР 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности поверхности и % обеззараживания, принимая количество колоний, снятых с контрольных поверхностей, за 100%.

Критерий эффективности обеззараживания поверхностей - не менее 99,99% гибели тест-микроорганизмов; время обеззараживания при контаминации S. aureus, E. coli, S. typhimurium, P. aeruginosa - не более 120 мин.

Доступ к полной версии этого документа ограничен

Ознакомиться с документом вы можете, заказав бесплатную демонстрацию систем «Кодекс» и «Техэксперт».

Что вы получите:

После завершения процесса оплаты вы получите доступ к полному тексту документа, возможность сохранить его в формате .pdf, а также копию документа на свой e-mail. На мобильный телефон придет подтверждение оплаты.

При возникновении проблем свяжитесь с нами по адресу spp@kodeks.ru

Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности

Название документа: Р 4.2.2643-10 Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности

Номер документа: 4.2.2643-10

Вид документа: Р (Руководство)

Принявший орган: Главный государственный санитарный врач РФ

Статус: Действующий

Опубликован: официальное издание

М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2011 год

Дата принятия: 01 июня 2010

Дата начала действия: 02 июня 2010