МУК 4.2.1779-03
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Метод микробиологического измерения концентрации клеток микроорганизма
Bacillus subtilis 72 - продуцента щелочной протеазы в воздухе рабочей зоны
Дата введения 2003-12-01
1. РАЗРАБОТАНЫ: Российским государственным медицинским университетом (к.б.н. Н.И.Шеиной).
2. УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем министра здравоохранения Российской Федерации - Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 24 октября 2003 г.
3. ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ с 1 декабря 2003 г.
4. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.
Настоящие методические указания устанавливают методику проведения микробиологического количественного анализа концентрации клеток штамма В. subtilis 72 - продуцента щелочной протеазы в воздухе рабочей зоны в диапазоне концентраций от 50 до 500000 клеток в 1 м воздуха.
Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования" и Р 8.563-96* "Методики выполнения измерений".
______________
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать ГОСТ Р 8.563-96. ГСИ "Методики выполнения измерений". - Примечание "КОДЕКС".
Методические указания предназначены для применения в лабораториях предприятий, организаций и учреждений, аккредитованных в установленном порядке на право проведения микробиологических исследований.
Методические указания одобрены и рекомендованы секцией "Гигиенические аспекты биотехнологии и микробного загрязнения окружающей среды" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены окружающей среды".
Систематическое положение микроорганизма.
Класс | Schizomycetes |
Отряд | Eubacteriales |
Семейство | Васillасеае |
Род | Bacillus |
Вид | subtilis |
Штамм | 72 |
На МПА штамм образует мелкие ровные круглые колонии, максимальный диаметр которых составляет 2,0 мм. Край колоний сильно изрезанный, фестончатый. Колонии гомогенные, гладкие, плоские, матовые. Врастают в агар и трудно отделяются от него. Цвет сероватый на 1-е сутки и желтоватый на 2-е сутки развития.
Морфологически штамм представлен подвижными мелкими удлиненными палочками, образующими центрально расположенные эндоспоры, чаще располагаются поодиночке или небольшими конгломератами ("кучками"). Палочки снабжены жгутиками, расположенными перитрихиально.
В. subtilis 72 аэроб, сапрофит, мезофил, грам-положителен. Штамм интенсивно разлагает белковые среды благодаря действию протеолитических энзимов, при этом на желатине происходит разжижение, на среде лакмус-молоко - пощелочение, пептонизация.
Чувствителен к целому ряду антибиотиков, устойчив к бензилпенициллину, карбенициллину, ампицилину, доксициклину, линкомицину.
Штамм-продуцент растет на жидких и агаризованных средах. Оптимальная температура роста 40 °С, оптимальная рН 7,2-8,0, культивирование 48 часов. Для размножения используется мясопептонная агаризованная среда (МПА).
Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе рабочей зоны - 50000 кл./м, 4 класс опасности.
Методика обеспечивает выполнение измерений количества клеток микроорганизма в воздухе рабочей зоны в диапазоне концентраций от 50 до 500000 клеток в 1 м воздуха при доверительной вероятности 0,95.
Прямой метод основан на аспирации из воздуха производственных помещений клеток микроорганизма на агаризованную среду МПА и подсчета количества выросших колоний по типичным культурально-морфологическим признакам.