МУК 4.2.1777-03

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

     

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

     
Метод микробиологического измерения концентрации клеток
Aspergillus terreus 44-62 - продуцента ловастатина в воздухе рабочей зоны

     


Дата введения 2003-12-01

1. РАЗРАБОТАНЫ: Российским государственным медицинским университетом (к.б.н. Н.И.Шеиной).

2. УТВЕРЖДЕНЫ Первым заместителем министра здравоохранения Российской Федерации - Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 24 октября 2003 г.

3. ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ с 1 декабря 2003 г.

4. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.

1. Общие положения и область применения

Настоящие методические указания устанавливают методику проведения микробиологического количественного анализа концентрации клеток штамма Aspergillus terreus 44-62 - продуцента ловастатина в воздухе рабочей зоны в диапазоне концентраций от 10 до 3000 клеток в 1 м воздуха.

Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования" и Р 8.563-96* "Методики выполнения измерений".

_____________

* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать ГОСТ Р 8.563-96. - Примечание "КОДЕКС".

Методические указания предназначены для применения в лабораториях предприятий, организаций и учреждений, аккредитованных в установленном порядке на право проведения микробиологических исследований.

Методические указания одобрены и рекомендованы секцией "Гигиенические аспекты биотехнологии и микробного загрязнения окружающей среды" Проблемной комиссии "Научные основы гигиены окружающей среды".

2. Биологическая характеристика Aspergillus terreus 44-62
и его гигиенический норматив

Штамм Aspergillus terreus 44-62 является продуцентом ловастатина. Штамм-продуцент растет на жидких и агаризованных средах. Рост на питательной среде и ферментация могут происходить при температуре 20-37 °С. Оптимальная температура роста 27-30 °С, оптимальное значение рН среды - 5,0-6,0, культивирование 12 суток.

Строгий аэроб. Утилизирует глюкозу, фруктозу, мальтозу и глицерин. Хорошо растет на многих органических субстратах: овсяная, рисовая и кукурузная мука. В качестве источников азота благоприятно использование пептона, дрожжевого экстракта, гидролизата казеина. Среди неорганических солей предпочтительно использование хлорида натрия, сульфата магния и фосфата калия. Для размножения можно использовать сусло-агар 5-6 °Б.

Систематическое положение микроорганизма.

Уже на 4-5 день развития гриб появляется в виде характерной кремоватой округлой маленькой колонии с оранжевым пятном в центре. Поверхность колонии бархатисто-шероховатая. Однако своего терминального развития микромицет достигает к 11-12 дню, когда наиболее ярко выражены его культурально-морфологические свойства.

12-суточная культура на агаризованной питательной среде представляет собой округлые неправильной формы колонии с характерной нерегулярно изрезанной поверхностью, напоминающей вулканический профиль. В центре колонии, как правило, имеется кратер. Максимальный диаметр колоний 3,5-4,0 см.

Окраска колоний от оранжево-коричневого у основания до желто-коричневого на вершине. Мицелий плотный, компактный без воздушного пушистого слоя. Гифы короткие, сильно разветвленные, состоящие из расширенных клеток нерегулярной формы. Боковые ветви короткие, сор немного. Типичных конидиеносцев нет. Субстратный мицелий прорастает глубоко в питательную среду, образуя воздушные полости на дне чашки.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) в воздухе рабочей зоны - 300 кл./м, пометка А.

3. Пределы измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений количества клеток плесневого гриба в воздухе рабочей зоны в диапазоне концентраций от 10 до 3000 клеток в 1 м воздуха при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений