МУ 3.5.2.1759-03

     
Методические указания


3.5.2. ДЕЗИНСЕКЦИЯ

     
Методы определения эффективности инсектицидов, акарицидов, регуляторов
развития и репеллентов, используемых в медицинской дезинсекции

     

Дата введения: с момента утверждения

1. РАЗРАБОТАНЫ: Институтом медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского, кафедрой паразитологии, паразитарных и тропических болезней ММА им. И.М.Сеченова (В.П.Сергиев, Л.А.Ганушкина, В.П.Дремова, Р.Л.Наумов, М.М.Артемьев, И.С.Васильева, В.П.Гутова, А.С.Ершова, Е.А.Черникова); Научно-исследовательским институтом дезинфектологии Минздрава России, кафедрой дезинфектологии ММА им. И.М.Сеченова (М.Г.Шандала, Е.И.Баканова, О.М.Германт, О.Ю.Еремина, М.Н.Костина, Ю.В.Лопатина, В.В.Олифер, Т.А.Перегуда, С.А.Рославцева, А.И.Фролова, И.А.Хрусталева, Н.И.Шашина); Министерством здравоохранения Российской Федерации (Н.В.Шестопалов, Л.С.Бойко); Федеральным центром государственного санитарно-эпидемиологического надзора (Т.Н.Сыскова, Т.Н.Цыбина); Центром государственного санитарно-эпидемиологического надзора в г.Москве (Т.Н.Иванова, В.Ф.Негрий); Центром государственного санитарно-эпидемиологического надзора в г.Нижневартовске (Т.М.Гузеева); Центром государственного санитарно-эпидемиологического надзора в г.Нижнем Новгороде (Т.Д.Душина).

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Министерстве здравоохранения Российской Федерации (протокол N 19 от 19 сентября 2003 г.).

3. УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации Г.Г.Онищенко 28 сентября 2003 г.

4. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.

1. Область применения

Методические указания предназначены для специалистов организаций, занимающихся тестированием и исследованием инсектоакарицидной, рострегулирующей, репеллентной и аттрактивной активности различных веществ и эффективности препаративных форм на их основе, рекомендуемых для целей медицинской дезинсекции.

2. Общие положения

Вновь синтезированные вещества проходят скрининг (отбор). Вещества, поступающие на скрининг, должны быть снабжены паспортом, в котором указаны химическая формула, молекулярная масса, степень чистоты соединения, основные физико-химические параметры, организация, в которой синтезировано соединение.

При изучении препаративных форм дезинсекционных средств должна быть представлена рецептура, в которой указаны все компоненты и их процентное содержание.

2.1. Расчет дозировок и оценка токсичности препаратов

Если инсектоакарицидность веществ для членистоногих неизвестна, исследования проводят в два этапа, если же имеются ориентировочные сведения об уровне инсектоакарицидности, исследования начинают сразу со второго этапа.

На первом этапе для испытания готовят серию из 4-5 последовательных 10-кратных разведений испытуемого вещества. Вначале готовят исходный раствор () с концентрацией вещества, необходимой для получения исследуемых концентраций ДВ.

Расчет концентрации исходного раствора (эмульсии, суспензии) проводят по формуле:

,  где                                                                         (1)

- необходимая концентрация ДВ;

- необходимое количество раствора;

- концентрация ДВ в веществе.

Пример 1. Из вещества, содержащего 90% ДВ, необходимо приготовить 100 мл раствора с концентрацией ДВ 0,3%.

=0,3х100:90=0,33 мл (мг), т.е. к 99,67 мл растворителя необходимо добавить 0,33 мл испытуемого вещества.

Пример 2. Из 50% концентрата эмульсии необходимо приготовить 0,7%-ную водную эмульсию.

=0,7х100:50=1,4 мл.

В том случае, если необходимо приготовить раствор заданной концентрации для обработки определенной площади так, чтобы получить заданную дозировку, производят расчет по формуле 2:

, где                                                            (2)

- концентрация ДВ в препарате;

- концентрация ДВ в исходном растворе;

- заданная дозировка;

- площадь обрабатываемой поверхности;

- объем препарата для обработки этой поверхности.

Пример. Нужно получить дозировку () величиной 0,1 г/м при обработке диска из фильтровальной бумаги площадью () 78 см (0,0078 м) раствором в объеме () 1 мл. Концентрация ДВ в препарате () - 5% (0,05). Все показатели используют в одной размерности - граммы и квадратные метры или килограммы и гектары. Проценты обозначают десятичной дробью (5%=0,05).

Расчет: =(0,1х0,0078):(0,05х1)х100%=1,56%.

То есть, для получения исходного (рабочего) раствора нужно приготовить 1 мл 1,56%-ного раствора препарата (развести в соотношении 1:63).

Из исходного раствора готовят серию 10-кратных разведений. Для этого к 1 мл исходного раствора добавляют 9 мл растворителя и в результате получают второе разведение; к 1 мл второго разведения добавляют 9 мл растворителя и получают третье разведение и т.д. В нашем примере получаем серию растворов, 1 мл которых на фильтрах стандартного размера обеспечивает дозировки 0,1, 0,01, 0,001 г/м и т.д.

На втором этапе для исследования препаратов за исходный берут раствор с максимальным разведением, вызвавшим 100%-ную гибель особей в опытах первого этапа, и исследуют серию растворов с нисходящими 2-кратными разведениями.

Для определения , используют графический способ вычисления этих показателей на пробит-логарифмической бумаге. На оси абсцисс откладывают дозы ДВ (г/м, мкг/г массы насекомого, мг/особь) или концентрации (%) в последовательных разведениях. На оси ординат - %% гибели насекомых при этих дозах (концентрациях). Между полученными точками проводят линию регрессии. Для определения () проводят горизонтальную линию на уровне 50% до пересечения с линией графика. Опущенный из точки пересечения перпендикуляр на ось абсцисс покажет по шкале на этой оси искомое значение. Проводя горизонтальную прямую на других уровнях и опуская перпендикуляр, можно определить соответствующие другие значения , например, для определения горизонтальную прямую до пересечения с линией графика проводят на уровне 99% и т.д.

Для определения массы 1 членистоногого до опыта взвешивают не менее 10 анестезированных особей (обычно от 10 до 100 особей).

Пересчет концентрации (%) в дозу (мкг/г массы членистоногого) при использовании топикального метода нанесения проводят по формуле:

, где                                                           (3)

- концентрация , %;

- нанесенный объем, мкл;

- масса членистоногого, мг.

Пересчет величин () мкг на 1 мг массы проводят по формуле:

, где                                                          (4)

- на 1 насекомое в мкг;

- средняя масса 1 насекомого в мг.

Среднюю величину гибели насекомых вычисляют по формуле:

, где

- % гибели в каждом опыте;

- число повторностей;

- знак суммы.

Для оценки степени достоверности средней величины при данном числе наблюдений используют формулу для подсчета ошибки средней:

, где

- каждое измерение;

- среднее из всех измерений;

- число измерений;

- знак суммы.

2.2. Расчет инсектицидной активности веществ и препаративных форм

Инсектицидную активность оценивают по гибели членистоногих в опытах по сравнению с контролем. В зависимости от организации эксперимента возможны 3 варианта оценки инсектицидной активности (формулы 5, 7, 8).

Опыт, при котором членистоногое контактирует с испытуемым веществом, нанесенным на поверхность (или при топикальном нанесении вещества на тело), и в контроле - с растворителем или необработанной поверхностью. В этом случае инсектицидную активность вещества () в каждой повторности оценивают по формуле:

, где                                                          (5)

и - исходное число особей в опыте и в контроле;

и - число погибших в опыте и в контроле.

Заключительная оценка представляет среднюю величину из всех повторностей опыта.

В случае гибели в контроле 5-20% особей к данным опытов вводят поправку по формуле Аббота:

, где                                                           (6)

- гибель насекомых в опыте (%);

- гибель насекомых в контроле (%).