РД 64-051-87

     

ИНСТРУКЦИЯ

КОНТРОЛЬ СТЕРИЛЬНОСТИ ПЕРЕВЯЗОЧНЫХ МАТЕРИАЛОВ

     

Дата введения 1988-07-01

1. Общие положения

1.1. Настоящая инструкция устанавливает требования к помещению, подготовке персонала и инструментов к работе, отбору проб, методике посева и учету результатов при контроле стерильности перевязочных материалов, а также составу и качеству питательных сред.

Инструкция распространяется на все производственные объединения и предприятия химико-фармацевтической и других отраслей промышленности, выпускающей стерилизованные перевязочные материалы.

1.2. Контроль стерильности проводит бактериологическая лаборатория предприятия, выпускающего перевязочные материалы.

2. Мероприятия, обеспечивающие асептические условия при посевах

Контроль стерильности простерилизованной продукции проводят в боксе при условиях, исключающих возможность вторичной контаминации.

2.1. Требования к помещению для посева на стерильность

2.1.1. Лаборатория, в которой проводят контроль перевязочных материалов на стерильность, должна быть изолирована от производственных помещений и оборудована боксом.

2.1.2. Бокс должен иметь предбоксник, отделенный от него перегородкой с дверью и передаточным окном. Площадь бокса должна быть достаточной для проведения в нем бактериологических исследований, но не менее 3 м. Высота потолков в боксе и предбокснике 2,5 м - для удобства ежедневной влажной обработки.

2.1.3. Стены боксов и предбоксников должны быть окрашены масляной краской или выложены кафельной плиткой и не иметь выступов, карнизов, щелей, трещин, пол должен быть покрыт линолеумом или плиткой.

Потолок и оборудование бокса с предбоксником (боковые поверхности и ножки столов, стеллажи, стулья) должны быть выкрашены масляной краской. Рабочие поверхности столов следует изготавливать из водонепроницаемого, кислотно-щелочеустойчивого, несгораемого материала, не портящегося от обработки кипятком и дезинфицирующими растворами (оцинкованная жесть и др.).

2.1.4. Бокс должен быть оборудован приточно-вытяжной вентиляцией с избыточным давлением (с преобладанием притока над вытяжкой). Обмен воздуха в боксе должен быть не менее десятикратного в час и подаваться стерильным.

2.1.5. В боксе и предбокснике для обеззараживания воздуха устанавливают настенные и потолочные бактерицидные облучатели на высоте не ниже 2 м от пола. Мощность ламп не должна превышать 1 Вт потребляемой от сети мощности на 1 м помещения при экранированном облучении и 2-3,5 Вт - при использовании неэкранированных ламп. Через 1000 часов работы бактерицидные лампы в облучателях следует заменить.

2.1.6. В боксах, предназначенных для проведения контроля стерильности перевязочных материалов, работы с живыми культурами микроорганизмов не допускаются.

2.2. Подготовка боксов, инструментов и персонала к работе

2.2.1. Ежедневно перед работой помещение бокса и предбоксника подвергают тщательной влажной уборке. Потолок, стены, двери, мебель, поверхности инвентаря протирают стерильной ветошью или губкой, обильно смоченной 3% раствором перекиси водорода с 0,5% моющего средства. Этим же раствором моют пол. Расход дезинфицирующего средства: от 100 до 150 мл на 1 м помещения.

При отсутствии вышеуказанного дезинфицирующего раствора производят обработку свежеприготовленным 2% раствором хлорамина.

В случае обнаружения в воздухе споровых форм микробов или грибов, протирание или орошение из гидропульта проводят 6% раствором перекиси водорода с 0,5% моющего средства из расчета от 150 до 200 мл на 1 м помещения при протирании и 500 мл на 1 м при орошении. Затем ветошью или губкой удаляют излишнюю жидкость.

В конце рабочего дня мебель, стены и пол в боксе и предбокснике протирают стерильной тканью, смоченной 3% раствором перекиси водорода с 0,5% моющего средства или 2% раствором хлорамина.

В качестве моющих средств добавляют Астру, Лотос и другие, разрешенные Минздравом СССР к применению в медицинской практике.

2.2.2. Перед включением бактерицидных ламп в боксе включают вентиляцию на время, достаточное для полного обмена воздуха в нем.

2.2.3. Все необходимые для работы материалы и инструменты вносят в бокс не ранее чем через 45 минут после его обработки. Контролируемые образцы перевязочных материалов вносят в бокс последними.

Перед внесением образцов перевязочных материалов в бокс в предбокснике протирают их наружную оболочку салфеткой, смоченной свежеприготовленным 3% раствором перекиси водорода с 0,5% моющего средства. Обработанные образцы раскладывают на столе в боксе по порядку исследуемых номеров.

2.2.4. Перед началом работы в предбокснике и боксе включают бактерицидные лампы на 1 час. Во время внесения образцов и их обработки лампы выключают. Затем лампы вновь включают на 1 час. Работа в боксе может быть начата через 30 минут после отключения ламп.

2.2.5. Для работы используют инструменты, посуду и спецодежду, предварительно простерилизованные в паровом стерилизаторе. Металлические, стеклянные и тканевые изделия обрабатывают при следующем режиме: температура (132±2) °С, время стерилизационной выдержки 20 минут или температура (120+2) °С, время стерилизационной выдержки 45 минут. Для стерилизации изделий из резины следует использовать второй из указанных режимов.

Во время работы в боксе вспомогательный инструмент дополнительно обжигают в пламени горелки. В процессе работы инструмент заменяют новым стерильным комплектом 2-3 раза.

2.2.6. Перед посевом сотрудники лаборатории тщательно моют руки теплой водой с мылом и щеткой, вытирают их стерильным полотенцем. В предбокснике надевают стерильные или обеззараженные дезинфицирующим раствором (протирание наружной поверхности и подошвы) тапочки, стерильные халаты, шапочки или косынки и марлевые маски. Руки протирают 70% этиловым спиртом или надевают стерильные резиновые перчатки.

2.2.7. В боксе воздерживаются от разговоров, хождения из бокса и обратно до окончания посева.

2.2.8. В процессе посева в боксе регулярно проверяют обсемененность воздуха. Для этого на рабочем столе оставляют две открытые чашки Петри с мясопептонным агаром (МПА) и агаризованной средой Сабуро в течение 15 минут. Затем чашки с МПА выдерживают в термостате при (30-35) °С в течение 48 часов, со средой Сабуро - при температуре (20-25) °С в течение 72 часов. Допускается рост не более трех колоний неспорообразующих бактерий. При обнаружении колоний спорообразующих бактерий и плесневых грибов запрещается проведение дальнейших работ в боксе без дополнительной его обработки.

Результаты проверки обсемененности воздуха должны быть зарегистрированы в специальном журнале.

2.2.9. Постоянно следует вести контроль стерильности питательных сред, проверять надежность стерилизации используемых для работы в боксе инструментов, халатов.

3. Отбор проб для контроля стерильности

3.1. Отбор проб проводит представитель отдела технического контроля (ОТК).

3.2. Образцы перевязочных материалов отбирают на контроль из разных мест стерилизатора с учетом распределения температуры в стерилизационной камере при паровом методе стерилизации и дозы облучения при радиационном методе.

Отбор проб производят от каждой серии и не менее двух раз в различное время суток от каждой партии простерилизованной продукции по формуле , где - количество изделий в серии или партии.

Серией называется число изделий, простерилизованное паровым методом за один цикл в одном стерилизаторе; партией называется число изделий, простерилизованных радиационным методом за сутки.

При контроле стерильности изделий, простерилизованных паровым методом, пробы отбирают в количестве не менее 24 упаковок от каждой серии. На первичный посев направляют 6 упаковок, для повторного контроля - 12 для арбитражного хранения - 6 упаковок.

Максимальное количество проб, отбираемых для первичного посева при радиационном методе стерилизации, 40.

При отборе проб для контроля стерильности перевязочных материалов, простерилизованных радиационным методом, следует руководствоваться таблицей.

Таблица

     
Отбор проб для контроля перевязочных материалов, простерилизованных радиационным методом

При отсутствии роста в первичных посевах, дубликаты, предназначенные для повторного контроля, подлежат реализации.

4. Методика посева на стерильность

Контроль стерильности перевязочных материалов проводит бактериолог при участии помощника, используя стерильные инструменты: ножницы, пинцеты, иглы и др.

4.1. Посев ваты

Помощник разрезает ножницами оболочку пакета по его длине и осторожно освобождает ролик ваты от оболочки. Поддерживая за конец ватного ролика, помощник осторожно отделяет наружный пласт ролика и начинает медленно его разматывать, чтобы отворачиваемый слой ваты опускался вниз. В процессе разматывания пласт ваты обращен внутренней поверхностью к засевающему. Бактериолог производит посев при помощи ножниц, пинцета, иглы и других инструментов, отрезая небольшой кусочек ваты массой около 1 г из того места, от которого только что отошел отворачиваемый пласт. Отрезанный кусочек ваты переносят с соблюдением асептических условий в пробирку, колбу или флакон с питательной средой. Перед взятием каждого следующего кусочка отворачивают пласт. Размер кусочка должен соответствовать диаметру пробирки, горловины колбы или флакона. Таким способом, постепенно разматывая ролик ваты, можно выбрать пробы из любых мест пакета. Из каждого пакета засевают 4 пробы: две из поверхностного слоя и две из глубокого слоя.

На пробирках, колбах или флаконах с посевами указывают наименование перевязочного материала, номер серии или партии. Пробирки с посевами помещают в штативы или металлические емкости, а колбы и флаконы - в лотки, на которых указывается дата посева и дата окончания инкубации посевов.

4.2. Посев бинтов

При исследовании бинтов помощник держит пакет за левый край и с помощью пинцета или ножниц делает разрез пергаментной оболочки и снимает ее правую половину. Бактериолог производит посев, отрезая кусочек бинта размером 2 см с торцовой части от нескольких слоев. Отрезанный кусочек переносят, с соблюдением правил асептики, в пробирку, колбу или флакон с питательной средой. Помощник берет рукой использованную часть бинта, с помощью пинцета снимает левую часть оболочки, а бактериолог делает срез с торцовой части бинта от нескольких слоев и также производит посев на питательную среду. Помощник пинцетом вытягивает внутреннюю часть бинта длиной от 20 до 30 см, а бактериолог производит срез и посев, затем помощник повторно вытягивает внутреннюю часть бинта длиной от 20 до 30 см, от которой бактериолог производит срез и посев.

4.3. Посев марлевых салфеток

Марлевые салфетки исследуют так же, как и бинты, с той лишь разницей, что после взятия проб с торцов пакета помощник осторожно развертывает пакет для взятия проб из глубинных его частей. В дальнейшем поступают так же, как и при посеве ваты.

4.4. Посев ватно-марлевых изделий

Держа пакет за левый край, помощник пинцетом или ножницами делает разрез пергаментной оболочки и снимает ее. Бактериолог вырезает кусочек бинта и марлевых подушечек с торцовой стороны и тотчас их засевает. Помощник берет за использованную часть пакета и снимает часть оболочки. Бактериолог делает срез кусочка бинта и ватных подушечек левой торцовой части пакета и засевают. Затем помощник осторожно развертывает пакет для взятия проб из глубокой части ватно-марлевых подушечек. В дальнейшем поступают так же, как при посеве ваты.

4.5. Посев мелких изделий

Мелкие изделия (турунды, тампоны и др.) при посеве в пробирки, колбы или флаконы с питательными средами погружают целиком.

4.6. Для контроля стерильности перевязочных материалов применяют универсальную полужидкую тиогликолевую среду и жидкую среду Сабуро. Одновременный посев проб образцов на две среды обязателен. Количество среды в пробирках, колбах или флаконах должно быть достаточным для полного погружения засеваемых проб образцов.

4.7. Посевы на тиогликолевой среде выдерживают в термостате при температуре (30-35) °С, на среде Сабуро - при температуре (20-25) °С. Посевы инкубируют в термостате при соответствующей температуре в течение 14 суток при контроле изделий, простерилизованных радиационным методом. Изделия, простерилизованные паровым методом, инкубируют в течение 8 суток.