ГОСТ Р 51116-97 Комбикорма, зерно, продукты его переработки. Метод определения содержания дезоксиниваленола (вомитоксина)

     5 Проведение испытания

5.1 Экстракция дезоксиниваленола (вомитоксина) из исследуемого продукта

Навеску исследуемого продукта массой (25±0,05) г помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 500 см, приливают 20 см бидистиллированной воды и затем 105 см ацетонитрила. Колбу закрывают пробкой и встряхивают на аппарате для встряхивания проб в течение 30 мин. После этого содержимое колбы фильтруют через бумажный складчатый фильтр в колбу с притертой пробкой.

5.2 Очистка экстракта

5 см фильтрата (5.1) переносят в колонку 1 (ЖХ) (4.6) и элюируют в остродонную колбу вместимостью 50 см со скоростью не более 0,5 см/мин. С целью ускорения элюирование можно проводить с помощью вакуума водоструйного насоса. Не допуская осушения сорбента, через колонку пропускают 15 см ацетонитрила, собирая элюат в ту же остродонную колбу.

По окончании элюирования из колбы с помощью ротационного вакуумного испарителя при температуре не более 60 °С полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку добавляют 1 см бидистиллированной воды. Колбу закрывают пробкой и ее стенки осторожно споласкивают находящейся в ней жидкостью. Содержимое колбы с помощью пипетки переносят в колонку 2 (4.6). Стенки колбы повторно обмывают 1 см бидистиллированной воды, которую также переносят в колонку 2. Колонку 2 промывают 2 см бидистиллированной воды и элюат отбрасывают.

Из колонки 2 дезоксиниваленол элюируют 7,5 см ацетонитрила в остродонную колбу вместимостью 25 см. Собранный элюат упаривают досуха с помощью ротационного вакуумного испарителя. Остаток растворяют в 0,2 см метилового спирта. Полученный раствор используют для хроматографического анализа (далее - испытуемый раство

р).

5.3 Выполнение измерений

5.3.1 Условия проведения измерений

Измерения проводят в следующих условиях:

а) разделение компонентов проводят на колонке размером 80х2 мм;

б) сорбент - диабонд С 16 с эффективностью не менее 5000 т. т.;

в) рабочие длины волн УФ-детектора - 230 и 276 нм (230 нм - опорная длина волны, 276 нм - длина волны для контроля чистоты экстракта);

г) скорость элюирования - 100 мкдм/мин.

Элюирование проводят в градиентном режиме. Для этого в шприце насоса готовят элюент с перформированным градиентом. Насос устанавливают в перевернутое положение и набирают последовательно:

600 мкдм воды;

500 мкдм раствора ацетонитрил-вода (0,05:1);

600 мкдм раствора ацетонитрил-вода (0,125:1);

100 мкдм раствора ацетонитрил-вода (0,5:1);

100 мкдм раствора ацетонитрил-вода (1:1);

700 мкдм ацетонитрила;

д) объем анализируемого раствора - 4 мкдм;

е) чувствительность - 0,1 е.о.п. при 100 милливольтах шкалы самописца.

На приборе устанавливают следующие параметры:

количество образцов - 3;

объем ступеней, мкдм: 1-600, 2-500, 3-600, 4-100, 5-100, 6-700;

объем регенерации, мкдм - 200, буфера - 15, пробы - 4, буфера - 10;